实验病原性球菌_培训课件.pptVIP

提问：致病性葡萄球菌的鉴别要点？ 详细讲解操作方法并示教。 如何正确观察阳性结果。 强调血浆凝固酶实验注意事项及意义。 提问：什么是溶血素“O”？ 介绍ASO实验原理，本实验属体外中和反应，所用方法为间接凝集 。 动画演示操作过程。 详细讲解操作步骤并示教。 注意阳性结果的正确判断。 强调抗“O”的意义。 参考资料： 1、刘荣臻主编《病原生物与免疫学》人民卫生出版社 2、陈育民主编《病原生物学与免疫学》 第四军医大学出版社 3、山长武主编《医学微生物与免疫学学实验指导》人民卫生出版社 介绍本次课实验报告书写方法，组织学生书写实验报告。 组织学生观察示教标本片。巡视，指导学生正确观察、操作，解答学生疑难 。 教学反思： 1、按教学计划，完成了本次课教学任务和教学目标。 2、正确观察抗“O”阳性结果 很多学生不知如何区分抗“O”阳性与阴性结果，要抓住阳性有细沙一样的凝集颗粒，阴性仍然呈均匀乳液状的特点观察。 3、教师要勤于巡视 在学生操作过程中，教师一定要勤于巡视，仔细观察，如有的学生试剂顺序加错，反应时间不够，搅拌棒重复使用，发现问题后要及时纠正。 4、爱护公物、节约试剂 上实验课时，除了要求学生保持实验室的整洁、安静外，很重要的一点是要求他们爱护标本、仪器设备。告诉他们每一张标本片的来之不易，使他们养成爱护教学设备的习惯。 实 验 五 病原性球菌 实验目的： 熟悉几种常见病原性球菌的形态染色特点。 掌握血浆凝固酶试验的原理、方法、意义。 掌握抗“0”试验的原理、方法及临床意义。 一、常见病原性球菌形态染色的观察（示教） （细菌的形态；革兰染色性；排列方式） 二、血浆凝固酶试验（示教) 三、抗“0”试验(操作) 实验内容： 球菌革兰染色标本片 葡萄球菌培养物、兔血浆、生理盐水、载玻片、接种环、酒精灯、火柴、蜡笔 待测病人血清、抗“O”试剂（溶血素“O”、ASO胶乳）、反应板、搅拌棒 实验用品： 一、病原性球菌形态特征的观察 又称为化脓性球菌 根据革兰染色性的不同可分成 革兰阳性： 葡萄球菌 链球菌 肺炎链球菌 革兰阴性： 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 革兰染色阳性球菌，葡萄串状排列 无鞭毛， 不形成芽胞， 右上图：革兰染色 右下图：扫描电镜 形态与染色 葡萄球菌 革兰染色阳性球菌，呈链状排列 无鞭毛， 不形成芽胞， 右上图：革兰染色 右下图：扫描电镜 形态与染色 链球菌 形态与染色 肺炎链球菌 革兰染色阳性球菌，菌体呈矛头状，成双排列，宽端相对，尖端向外。无鞭毛不形成芽胞有毒株有荚膜 革兰染色阴性双球菌 呈肾形，成双排列 感染急性期 位于中性粒细胞内 形态与染色 奈瑟菌属 二、血浆凝固酶实验 血浆 纤维蛋白原 纤维蛋白 血浆凝固酶 附着于细菌表面 玻片上形成凝块（结合型） 试管中血浆发生凝固（游离型） 致病性葡萄球菌 原理 （1）取洁净玻片一张，玻片分为左右两区并做好标记，于一端加生理盐水一滴，另一端加兔血浆一滴。 （2）用接种环取金黄色葡萄球菌苔一环，在玻片一端生理盐水中研磨混匀，接种环灭菌后再取金黄色葡萄球菌苔一环，在另一端兔血浆中研磨均匀。 （3）立即观察结果。 血浆凝固酶实验方法（玻片法） 结果：细菌在生理盐水无凝集而在血浆中聚集成团块或无法混匀，为血浆凝固酶试验阳性 血浆凝固酶实验注意事项 血浆多挑几环（一滴的量）；菌落不能太多。 要做阴性对照，有一部分葡萄球菌有自凝现象。 最好用抗凝的兔血浆 ，兔血浆凝块结实，凝固速度快 ；兔血浆应放4℃冰箱保存。 意义：血浆凝固酶试验是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标，致病性葡萄球菌为阳性。 链球菌溶血素 链球菌溶血素O（SLO） 链球菌溶血素S（SLS） 抗原性强，产生抗O抗体，该抗体在感染链球菌2-3周 至病后1年内可检出； 正常参考值：成人200 U 风湿热患者抗O抗体250单位以上（高于正常人），