细菌感染的病原学诊断_培训课件.ppt

* * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 3．β―半乳糖苷酶试验（ONPG试验） 迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为 阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本试验 主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 4．七叶苷水解试验 主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别。 5．甲基红试验 主要用于鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌。 6．V―P试验 本试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的 细菌，后者通常为阴性。 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 2．吲哚(靛基质)试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。 （二）蛋白质和氨基酸的代谢试验 1．明胶液化试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴别。 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 3．硫化氢试验 培养基：醋酸铅培养基 应用：主要用于肠杆菌 科中属及种鉴别 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 4．尿素分解试验 主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。 5．苯丙氨酸脱氨酶试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。变形杆菌属、普罗菲登斯菌属和摩根菌属细菌均为阳性，肠杆菌科中其他细菌均为阴性。 6．氨基酸脱羧酶试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 （三）碳源和氮源利用试验 1．枸橼酸盐利用试验 用于肠杆菌科中菌属间的鉴定。 2．丙二酸盐利用试验 肠杆菌科中属间及种的鉴别。 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 （四）各种酶类试验 1．氧化酶试验 主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别。 2．过氧化氢酶试验（触酶试验） 用于革兰阳性球菌的初步分群。 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 3．硝酸盐还原试验 本试验在细菌鉴定中广泛应用。肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌等假单胞菌可产生氮气；有些厌氧菌如韦荣球菌等试验也为阳性。 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 4．脂酶试验 主要用于厌氧菌的鉴别。 5．卵磷脂酶试验 主要用于厌氧菌的鉴定。 6． DNA酶试验 在革兰阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生 DNA酶，在肠杆菌科中沙雷氏菌和变形杆菌 产生此酶。 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 8 ． CAMP试验 在链球菌中，只有B群 链球菌CAMP试验阳性， 故可作为特异性鉴定。 7 ．凝固酶试验 作为鉴定葡萄球菌致病性的重要指标，也是葡萄球菌鉴别时常用的一个试验。 * * 第三节 细菌的分离培养和鉴定 （五）抑菌试验 1． O/129抑菌试验 用于弧菌科的属间鉴别，弧菌属、邻单胞菌属 对O/129敏感，而气单胞菌属耐药。 2．杆菌肽试验 用于A群链球菌与非A群链球群的鉴别。 3．奥普托欣（Optochin）试验 主要用于肺炎链球菌与其他链球菌的鉴别。 * * 第四节 细菌的非培养检测方法 一、免疫学检测 抗原检测、抗体检测 二、分子生物学检测 核酸杂交、聚合酶链反应、生物芯片技术 三、细菌毒素的检测 内毒素、外毒素 四、动物实验 * * 第四节 细菌的非培养检测方法 一、免疫学检测 （一）抗原检测 免疫荧光技术是利用免疫学特异性反应与荧光 示踪技术相结合的显微镜检查手段。既保持了血清 学的高特异性，又极大地提高了检测的敏感性，在 细菌鉴定方面占有重要地位。常用的方法有直接 法、间接法和免疫荧光菌球法。 * * 第四节 细菌的非培养检测方法 一、免疫学检测 （二）抗体检测 抗体的量常随感染过程而增多，表现为效价的 升高。因此用已知的细菌或其特异性抗原检测病人 血清中有无相应抗体及其效价的动态变化，可作为 某些传染病的辅助诊断。主要适用于抗原性较强的 致病菌和病程较长的感染性疾病。 * * 第四节 细菌的非培养检测方法 二、分子生物学检测 （一）核酸杂交 DNA可进行变性、复性、杂交。我们利用这一特性，制备特定序列DNA片段，进行标记后用作探针，在一定条件下，按照碱基互补配对原则与标本中已变性的细菌DNA进行杂交，通过检测杂交信号确定是否发生杂交反应，从而鉴定标本中有无相应的病原菌基因。 * * 第四节 细菌的非培养检测方法 二、分子生物学检测 （一）核酸杂交 1. 探针的种类 （1）全染色体DNA探针 （2）染色体克隆片段DNA探针 （3）质粒DNA探针 （4）rRNA基因探针 （5）寡核苷酸探针 * * 第四节 细菌的非培养检测方法 2．核酸杂交在临床细菌检测中的应用 （1