诊断学基础血液学检查_培训课件.ppt

交叉配血试验 结果判断：受血者配血试验的血标本必须是输血前3天之内的。同型血之间作交叉配血时，主侧管与次侧管均无凝集反应，表示配血完全相合，可以输血；不论何种原因导致主侧管有凝集时，则绝对不可输用。 反映红细胞寿命缩短的检查 51Cr标记红细胞寿命缩短 有关红细胞代偿性增生的检查 网织红细胞增多 血中出现大量幼红细胞和嗜多色性红细胞 骨髓检查呈典型增生性改变 确定溶血部位的依据 血浆游离Hb增多，血红蛋白尿（+）表示存在血管内溶血； 含铁血黄素尿为慢性血管内溶血的依据。 血管内和血管外溶血的鉴别 特征 血管内溶血（细胞外溶血） 血管外溶血（细胞内溶血） 病因 红细胞内缺陷，外因素获得性多见 红细胞内缺陷，外因素遗传性多见 RBC破坏场所 血管内（在血循环中破坏） 在肝和脾的单核-巨噬细胞内破坏 发病特征 一般为急性，也可慢性 一般为慢性，可有急性溶血危象 贫血 较重 较轻，溶血危象时加重 黄疸 较明显 可轻可重 血间接胆红素 增高明显 增高 肝脾肿大 少见 常见 血管内和血管外溶血的鉴别 红细胞形态异常 可见 常见 红细胞脆性改变 变化小 多有改变 血浆血红蛋白 增高，常大于100mg/L 轻度增高 血红蛋白尿 常见 无 含铁血红蛋白尿 慢性常见 一般阴性 骨髓再障危象 少见 急性溶血加重时可见 LDH 增高 轻度增高 确定溶血病因的依据 1.红细胞膜缺陷 (1)血涂片观察：球形红细胞增多常见于遗传性球形红细胞增多症，椭圆形红细胞常见于遗传性椭圆形红细胞增多症。(2)红细胞渗透脆性试验 是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。是红细胞膜缺陷过筛试验，脆性增加为红细胞膜异常。脆性降低主要见于珠蛋白生成障碍性贫血，血红蛋白C、D、E病，低色素性贫血，肝疾病等。 （3）对阵发性睡眠性血红蛋白尿，蔗糖溶血试验为过筛试验，酸溶血试验为确诊试验。 （五） 蔗糖溶血试验 实验原理 在离子状态蛋白质结构发生某些变化，RBC与血清免疫球蛋白之间发生抗原抗体反应，被补体包围，PNH患者RBC由于膜结构异常，在有补体情况下，容易破坏，发生溶血。 试剂 1. 蔗糖 2. 3.8%枸橼酸钠溶液 样本要求 枸橼酸钠抗凝静脉血2ml（ 3.8%枸橼酸钠与静脉血比为1：9） 操作程序 将一份枸橼酸钠全血加入9份新鲜配制的糖水中（即0.5g蔗糖+4.5ml蒸馏水+0.5ml抗凝血，或10%蔗糖水5ml+0.5ml抗凝血），混合后，置37℃温箱中孵育30分钟，离心沉淀。 结果分析 如有溶血蔗糖液为红色，即为阳性。 参考值 正常为阴性 （三）酸溶血（Hams）试验 实验原理 PNH患者体内存在对补体敏感的红细胞。Hams试验即红细胞在酸性（PH6.4-6.5）的正常血清中孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶血，而正常人RBC不被溶解，无溶血现象。 试剂 1. 1/6N HCL 2. 8.5g/L NaCl溶液 样品要求 1. 机械抗凝静脉血5ml，用0.9%NaCl洗涤 数次，取RBC备用（需同时用同型或O型正常人对照）。 2. 静脉血2ml分离出血清备用  参考值 正常人 阴性 临床意义 本试验阳性主要见于PNH，确诊意义大。某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时可呈阳性 确定溶血病因的依据 2.红细胞酶缺陷 高铁血红蛋白还原试验为葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺乏（G-6-PD）缺陷症的过筛试验，还原率降低常见于 G-6-PD缺乏症。 变性珠蛋白小体（Heinz）生成试验，G-6-PD荧光斑点试验和活性测定、丙酮酸激酶荧光斑点试验和活性测定等。 确定溶血病因的依据 3.血红蛋白病 （1）血涂片观察 （2）异丙醇沉淀试验 （3）血红蛋白电泳试验 （4）抗碱血红蛋白增高 (5) 血红蛋白基因PCR技术 确定溶血病因的依据 4.自身免疫性溶血性贫血 自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia，AIHA)系体内免疫发生异常，产生自身抗体或(和)补体，结合在红细胞膜上，红细胞破坏加速而引起的一组溶血性贫血。 确定溶血病因的依据 （1）抗人球蛋白试验： 直接抗人球蛋白试验阳性- 新生儿溶血病、输血导致溶血、 自身免疫性溶血性贫血、 SLE、类风湿关节炎、 恶性淋巴瘤、甲基多巴及 青霉素型等药物性溶血反应。 阴性- 不能排除免疫性溶血性贫血， 遗传性溶血性贫血 （自幼发病家族史阳性） 确定溶血病因的依据 间接抗人球蛋白试验，用于新生儿同种免疫性溶血中母亲和新生儿血清内不完全抗体的检测。 2.冷凝集素测定：阳性见于冷凝集素