第23章重组DNA技术.ppt

第23章 重组DNA技术 DNA重组或基因重组？ 非同源染色体之间的自由组合与非等位基因的重组 DNA重组或基因重组？ 同源染色体的染色单体之间的交叉互换与非等位基因重组 DNA重组或基因重组？ 连锁基因之间的交叉交换而在后代中出现亲代所没有的基因组合 DNA重组或基因重组？ 是自然界中生物体内细胞内同源染色体的染色单体之间的交叉互换或连锁基因之间的交叉互换，导致控制不同性状的非等位基因重新组合，在后代中出现亲代所没有的新基因型。 人工重组DNA技术？（又称基因工程） 是指在离体条件下，通过人工体外操作，将不同来源的DNA重新组合，就是有目的地将一个个体细胞（供体细胞）内的遗传基因（目的基因）转移到另一个不同性状的个体细胞（受体细胞）内，构建成一个新功能DNA分子，并使它们在适当的细胞中增殖和表达技术，目的是获得用一般方法难以获得的产品。 如将胰岛素的基因转移到大肠杆菌体内，并使之与受体细胞的DNA重组，通过受体细胞的增殖和表达而大量生产胰岛素。 DNA重组技术的基本步骤以大肠杆菌生产胰岛素为例 ①获得目的基因（外源DNA）：从人的DNA中提取胰岛素基因。 ②从大肠杆菌的细胞质中提取质粒（受体DNA）作为目的基因进入宿主细胞的载体。 DNA重组技术的基本步骤以大肠杆菌生产胰岛素为例 ③基因重组: 取出目的基因与质粒,先利用限制性内切酶将质粒切开,再使用DNA连接酶将目的基因与质粒“缝合”连接，形成一个能表达胰岛素的重组DNA质粒。 DNA重组技术的基本步骤以大肠杆菌生产胰岛素为例 ④将重组质粒导入大肠杆菌: 在大肠杆菌的培养液中加入含有Ca+的物质，如CaCl2，同时将重组的质粒也放入培养液中，此时大肠杆菌便会将重组质粒吸收，胰岛素基因进入大肠杆菌。 DNA重组技术的基本步骤以大肠杆菌生产胰岛素为例 ⑤转化菌的筛选与胰岛素的产生: 重组DNA导入受体菌后，经过培养使其大量繁殖，再设法将含有目的基因的菌落区分鉴定出来作为生产胰岛素的工程菌，这一过程即为筛选。 在大肠杆菌内,重组质粒通过复制、转录与翻译表达后,便产生出胰岛素蛋白质.通过大肠杆菌的大量繁衍，便可大量生产出胰岛素! 基因工程的重要步骤有二？ 1、构建DNA重组体 2、DNA重组体的扩增和表达 基因工程的目的？ 1、分离获得某一感兴趣的基因或DNA序列 2、获得感兴趣基因的表达产物(蛋白质) 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 一 核 酸 的 分 子 杂 交 第一节 基因工程的相关技术 第一节 基因工程的相关技术 第一节 基因工程的相关技术 第一节 基因工程的相关技术 第一节 基因工程的相关技术 第一节 基因工程的相关技术 第一节 基因工程的相关技术 第一节 基因工程的相关技术 第一节 基因工程的相关技术 第二节 基因工程主要的工具酶 第二节 基因工程主要的工具酶 第二节 基因工程主要的工具酶 第二节 基因工程主要的工具酶 第二节 基因工程主要的工具酶 第三节 基因克隆的质粒载体 第三节 基因克隆的质粒载体 第三节 基因克隆的质粒载体 第三节 基因克隆的质粒载体 第四节 重组DNA的基本步骤 第四节 重组DNA的基本步骤 第四节 重组DNA的基本步骤 第四节 重组DNA的基本步骤 第四节 重组DNA的基本步骤 第四节 重组DNA的基本步骤 第四节 重组DNA的基本步骤 第四节 重组DNA的基本步骤 二 聚合酶链式反应 变性 退火 延伸 5’ 5’ PCR反应过程及条件图示 DNA聚合酶 二 聚合酶链式反应 二 聚合酶链式反应 PCR反应小结 二 聚合酶链式反应 二 聚合酶链式反应 二 聚合酶链式反应 PCR技术应用： ◎扩