17项肿瘤标志物化学发光检测方案.ppt

肿瘤标志物17项 （化学发光免疫分析法） 2016-5-26 各种类型肿瘤发生率 (不考虑性别) 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 27 13 18 75 12 52 12 45 9 70 7 38 4 3 4 75 4 67 肺 乳腺 结直肠 胃 前列腺 卵巢 胰腺 膀胱 宫颈 发生率 5年生存率 数据来自the American Cancer Society 肿瘤诊断方法 1、临床—病史、体症 2、辅助—物理检查：X光、CT、核磁共振、 B超、 红外扫描 病理 术前：穿刺、刮片、拉网 术后：组织切片 免疫学检查：肿瘤标志物和代谢物测定 分子生物学检查： 核酸分析 ?在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞合成、释放、或者是宿主对肿瘤反应产生的一类生化物质。 ?在血液、体液及组织中肿瘤标志物的定量或定性检测可以作为肿瘤筛查、鉴别诊断、治疗后病情监测及预后判断的标志与依据。 ?这些物质必须在正常人中不存在或者是在癌症患者中出现的水平显著高于正常人。 肿瘤标志物 【tumor markers TM】 肿瘤标志物的分类（化学特性） 癌胚抗原类标志物 糖类抗原标记物 酶类标志物 激素类标志物 癌基因 其他 理想的肿瘤标志物的标准 特异性100% 灵敏度100% 器官特异性 与肿瘤大小或分期有关 能进行疗效观察 与预后有关 可靠的预测价值 然而目前所应用的肿瘤标志物均未达到上述要求，但如 正确合理使用，仍有很大临床价值，关键是要正确评价肿瘤 标志物检测的临床意义。 目前临床应用肿瘤标志物现状 理想形式 特异性100% 真阴性100% 假阳性 0% 健康人 临界值 敏感性100% 真阳性100% 假阴性 0% 肿瘤患者 实际状况 假阴性 假阳性 临界值 敏感性100% 特异性- 60% 健康人 肿瘤患者 特异性100% 敏感性- 50% 敏感性上升 特异性上升 肿瘤标志物参数在健康人和肿瘤患者两组人群间的区别 实际状态：假阴性和假阳性在选择临界值中的作用：特异性越高，敏感性越低，反之亦然 肿瘤标志物的临床应用 正常人群中的筛查 有症状者的辅助诊断 癌症的临床阶段的分期 疾病进程的预后指标 评估治疗方案 判断癌症是否复发 治疗应答的监测 肿瘤标志物的注意事项 定位 TM基本上不能对肿瘤定位。极少数TM如PSA，甲状腺球白等具器官特异性，但不是肿瘤特异性。 确诊 通常不能进行确诊。 分期 大多数TM与疾病分期有关，且浓度与肿瘤大小通常存在关联，但并不能根据个体测得值来判断肿瘤大小，也不能以TM 浓度精确指示各期肿瘤，因为各期肿瘤的TM浓度范围极广，且互相重叠。 预后 术前TM浓度增加，术后降低，表示这些TM对此肿瘤有预后价值。 在病程监测中，TM的浓度增加或降低与疾病的预后密切相关。 TM评价治疗有效性方案（Beastall, 1991) 无效：TM浓度与治疗前相比下降50% 改善：TM浓度与治疗前相比下降50% 有效：TM浓度与治疗前相比下降90% 显效： TM浓度下降至临界值以下 检测肿瘤标志物的试验方法 ◆放射免疫法（RIA） ◆免疫放射法（IRMA） ◆ ELISA法 ◆斑点法 ◆金标法 ◆荧光免疫法 ◆流式荧光免疫法 ◆时间分辨免疫荧光法 ◆化学发光法（CLIA） ◆磁微粒化学发光法 ◆电化学发光法（ECLIA） ◆蛋白芯片技术 化学发光免疫分析 化学发光免疫分析包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或 酶作用于发光底物 进样系统 反应池 PMT 放大器 记录仪 负高压 检测系统 化学发光分析法仪器方框图 PMT:光电倍增管 肿瘤类型 已选标志物 补充标志物 肺癌 肝癌 乳腺癌 胃癌 前列腺癌 结肠直肠癌 胰腺癌 卵巢癌 睾丸肿瘤 CEA AFP、 CEA CA15-3、CEA CEA、 CA199 PSA CEA、CA199 CA199、 CEA、CA5