人类疾病模型与模式化实验动物饲料浅谈_培训课件.ppt

给SD大鼠饲喂MCD饲料2-4周可诱导严重非酒精性脂肪肝表型（肝脏脂肪变性、肝炎和肝纤维化） [30,31]；体重减少，不会引起胰岛素抵抗 [32,33] 。 MCD饲料（蛋氨酸—胆碱缺乏饲料）： MCD饲料诱导的肝脏脂肪变性的机制： 蛋氨酸、胆碱缺乏 磷脂酸胆碱合成减少 VLDL分泌受阻 甘油三酯出肝受阻 脂肪浸润肝细胞（脂肪变性）[34] MCD饲料成分的改变： 果糖比葡萄糖更有效诱导小鼠的肝细胞损伤[35] 。 饱和脂肪比非饱和脂肪能加速肝脏脂肪氧化并诱导促炎基因表达[35] 。 相对于奶油，橄榄油诱导肝脏甘油三酯堆积，鱼油降低肝脏胆固醇水平[36] 。 * 给大鼠饲喂CD饲料7周后，血脂水平升高并诱发胰岛素抵抗[37] 。 饲喂10周后，诱导肝脏脂肪变性、肝炎及肝损伤,且体重下降[37] 。 CD饲料（胆碱缺乏饲料）： HFD饲料（高脂饲料）： ? 诱导SD大鼠体重增加，体内脂肪堆积及胰岛素抵抗[38] 。 ? 不能诱导肝纤维化，只能诱导轻度的肝脏脂肪变性[27] 。 ? 添加胆固醇的HFD饲料，能诱导LDLR（-/-）小鼠肝脏脂肪水平升高并产生大小泡型脂肪变性[39] 。 ? VD缺乏的HFD饲料能使SD大鼠NAFLD恶化[40] 。 ? 在35kcal%脂肪的HFD饲料中用中链甘油三酯替代长链甘油三酯，可以阻止大鼠的肝脂肪变性[41] 。 ? 加果糖/蔗糖水的HFD饲料能诱导小鼠的肝纤维化[42] 。 ? 母体在妊娠期与哺乳期就进行HFD饲喂的小鼠后代比那些离乳后才进行HFD饲喂的小鼠对NASH的发病更加易感[43]。 中链脂肪酸（MCFAs）比长链脂肪酸（LCFAs）水解能力强6倍，且MCFAs水解对胆盐和胰酶的依赖性较低，MCFAs的吸收不经过淋巴系统而直接入血由肝门静脉入肝，可以不依赖肉碱载体而直接进入线粒体氧化供能。MCFAs几乎不参与脂肪酸的从头合成，在体内很少沉积[91]。 王倩等2007年用改良的高脂饲料（猪油10%+蔗糖5%+胆固醇2%+胆酸钠0.5%+丙硫氧嘧啶0.2%+基础饲料82.3%）饲喂SD大鼠5周能成功地构建非酒精性脂肪肝大鼠模型，主要表现为大鼠体重与对照组无显著差异，光镜下可见肝细胞内弥漫大量的脂肪空泡，电镜证实肝细胞内有大量脂滴[92] 。 刘贺荣等2010用高脂饲料（猪油10%+胆固醇1.5%+猪胆盐0.5%+基础料88%）饲喂昆明小鼠6周，成功建立非酒精性脂肪肝模型。具体表现为小鼠肝细胞明显肿胀，肝组织内可见弥漫分布的大脂滴和微脂滴并散布全肝[93] 。 小结 啮齿类动物中的大鼠、小鼠是NAFLD很好的动物模型，也是目前研究中常用的动物模型。 诱导NAFLD模型的饲料主要有高脂饲料、胆碱缺乏饲料、胆碱-蛋氨酸缺乏饲料三种。 * 动脉粥样硬化 动脉粥样硬化 饲料诱导的啮齿类动物动脉粥样硬化/高胆固醇血症 动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）是一种复杂的慢性病，是指动脉内膜下有脂质沉积，并伴有纤维基质成分和平滑肌的细胞增殖，逐步发展形成动脉硬化性斑块，斑块部位的动脉壁增厚、变硬，斑块内部的坏死组织与沉积的脂质结合，形成粥样物质的过程[44]。 模型饲料 饲料诱导的啮齿类动物动脉粥样硬化/高胆固醇血症 动脉粥样硬化的诱发因素之一是高胆固醇血症（TC和LDL-C水平升高）。富含饱和脂肪（SF）与胆固醇的食物，如Western-type diets，能引起血液循环系统中的胆固醇（尤其LDL-C）水平升高[44]。 模型饲料： 西方饮食模型饲料。 高脂 高胆固醇 动物模型 小鼠： 诱导动脉粥样硬化模型常用转基因小鼠：LDLR基因缺陷小鼠与apoE基因缺陷小鼠。 含胆固醇（0.15%-1.25%重量比）不含胆酸的Western-type diets能在12周后诱导LDLR基因缺陷小鼠明显的动脉粥样硬化病变[52]。 Western-type diets诱导apoE基因缺陷小鼠出现动脉粥样硬化早期病变只需6 周[53]。 原理：这些小鼠体内的突变体基因阻止了肝脏对血液循环系统中胆固醇的清除作用。 动物模型 大鼠： Western-type diets(45kcal%脂肪，氢化椰子油、胆固醇1%，重量比、胆酸0.25%，重量比) 饲料都能诱导大鼠TC及LDL-C水平的升高[47-49]，若要诱导动脉粥样硬化还需添加0.5%的甲状腺激素抑制剂(2-硫脲嘧啶)[50]。 SD大鼠造模开始