移植免疫及其免疫检测_培训课件.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 一、体液免疫与细胞免疫水平检测的临床意义 特异性抗体水平的检测 相关免疫指标： ABO等血型和HLA抗体 抗供者组织细胞抗体 血管内皮细胞抗体 冷凝集素 测定方法: 交叉配型、补体依赖的细胞毒性试验 血清PRA水平:判断器官移植时受体对移植物的敏感程度， 基于细胞毒性试验的PRA测定，被作为心脏移植前的常规项目， 若PRA超过5％，则应进行供者淋巴细胞与受者血清的交叉配型。 （一）体液免疫水平检测的临床意义 补体水平的检测 补体活性与急性移植排斥反应的发生有关 当移植物遭受排斥时，补体成分的消耗增加 可采用溶血法或比浊法进行检测。 补体活性的检测 补体的裂解产物，如C3a、C3b、C3d等的测定 常用的检测方法有免疫电泳、免疫标记技术 （二）细胞免疫水平检测的临床意义 外周血T细胞及其亚类的计数 CD4/CD8比值大于1.20时:预示急性排斥即将发生， CD4/CD8比值小于1.08时:发生感染的可能性很大。 若进行动态监测，对急性排斥反应和感染具有鉴别诊断的意义 NK细胞活性测定 混合淋巴细胞反应:刺激细胞:灭活的供者的淋巴细胞 反应细胞:受者淋巴细胞 结果显示的是CTL和NK细胞共同作用的结果。 动态监测NK细胞活性则意义更大 血清细胞细胞因子测定 IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ等细胞因子的水平均可升高 个体间血清IL-2R的含量差别显著 粘附分子及其配体的检测 免疫细胞以及血管内皮细胞等细胞膜表面粘附分子及其配体的表达，与急性排斥反应的发生密切相关。诸如ELAM-1、VCAM、ICAM和HLA分子等 比较受者接受移植物前后的细胞因子水平 环孢霉素A具有肾毒性，血清肌酐值增高，而IL-2R却明显降低 血清肌酐值和IL-2R同时增高提示急性排斥反应的发生 巨细胞病毒感染时，IL-2R血清含量的升高将更为明显 二、尿微量蛋白检测的临床意义 尿微量蛋白检测意义： 判断大器官移植、尤其是肾脏移植时排斥反应的发生 检测免疫抑制药的肝肾毒副作用 α1-微球蛋白是能较早反映肾功能损害的指标 尿α-1微球蛋白和尿IgG与肾移植受者短期肾功能关系密切 尿微量蛋白种类： 血浆蛋白：包括白蛋白（Aib）、IgG、IgA、IgM、轻链（κλ）、β2-微球蛋白（β2M）、补体C3、α1微球蛋白（α1M）、α2巨球蛋白（α2M）、转铁蛋白（TRF）、游离血红蛋白（Hb）、肌红蛋白（Mb）及其他血浆蛋白和酶 非血浆蛋白：肾脏的Tamm-Horsfall蛋白（THP）、SIgA、肾小球基底膜（GBM）抗原等 三、急性时相反应物质检测的临床意义 C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、IL-1、IL-6、TNF－α以及HSP等炎症分子，是发生炎症反应的标志性分子，在发生感染性疾病和自身免疫性疾病时均有不同程度的增高。 四、免疫抑制剂体内药物浓度检测的临床意义 免疫抑制药物的主要毒副作用： 骨髓抑制，可发生粒细胞减少或缺乏症 肝功能损伤，可表现为肝功能异常，如SGPT或ALT的升高 影响性功能，尤其是男性，少数可导致不育症 脱发 出血性膀肌炎，可出现血尿 恶心、呕吐、食欲不振等消化道表现 免疫抑制剂检测意义：通过对血液药物浓度的观察，掌握药代动力学的情况，指导临床用药以充分发挥其防治器官移植排斥反应的同时减少其毒副作用 1．何谓移植，移植的类型有哪些？影响移植物存活时间的关键因素是什么，其与HLA的关系如何？ 2．CDC原理是什么，需要那些器材，在器官、组织和细胞移植中有何作用，如何判断结果？ 3．HLA等位基因分型技术有哪些？在分型所用的制剂、过程等方面各有何特点？ 4．试思考现有HLA分型方法的优缺点，并由此分析分型方法学改进的可能途径和发展趋势。HLA分型除应用于器官移植领域外，还有哪些实际应用价值？ 5．HLA是诱导移植排斥反应的主要靶抗原，此外还有哪些组织特异性抗原引起临床工作者的关注，如何认识器官移植时的HLA配型？ 思考题 6．移植排斥反应有那些主要类型，其发生机制如何？ 7．HLA交