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干细胞的研究意义和研究存在的潜在问题 The significance and potential problems of Stem Cell research 刘昊月 LIUHAOYUE 动物科技学院动科201302班 摘要:本文以干细胞的定义，干细胞的分类等，就干细胞研究的意义和存在问题进行评述。重点就干细胞的提取和鉴定、干细胞的和多能干细胞在医学方面的意义进行讨论。介绍当前研究动向，讨论存在争议的伦理问题，在道德允许下能更有效地发挥干细胞的潜能，更好地为临床实践服务。In this paper, the definition of stem cells, stem cell classification are reviewed, the significance of stem cell research and problems. Focus on the dry extraction and identification of stem cells, cell development and pluripotent stem cells in medicine are discussed. Introduces the current research trends, discuss the ethical issues in dispute, can play a more effective stem cell potential allows to moral, better service for the clinical practice. 干细胞的研究是近年来医学生物学研究中的一项重大课题，它之所以吸引了人们的广泛注意，成为热门话题，是因为它为一些长久困扰人们的医学难题和顽症提供治疗新思路。 干细胞的定义 干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞（专能干细胞）。干细胞是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。具有无限制自我更新能力、同时也可分化成特定组织的细胞，在细胞发育过程中处于较原始阶段。在动物胚胎和成体组织中一直能进行自我更新、保持未分化状态、具有分裂能力的未分化细胞。包括胚胎干细胞和成体干细胞两大类。一类未分化的、具有无限分裂能力的细胞，能通过一次有丝分裂产生两个细胞，一个保持未分化状态，另一个则进入分化途径。按分化潜能：全能干细胞，多能干细胞，单能干细胞。 按发育状态：胚胎干细胞，成体干细胞。 全能干细胞：具有形成完整个体的分化潜能，如胚胎干细胞(ES细胞)。 多能干细胞：具有分化出多种细胞组织的潜能。如造血干细胞、神经细胞。 单能干细胞：只能向一种或两种密切相关的细胞类型分化。如上皮组织基底层的干细胞，肌肉中的成肌细胞。 胚胎干细胞：ES细胞是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。研究和利用ES细胞是当前生物工程领域的核心问题之一。在未来几年，ES细胞移植和其它先进生物技术的联合应用很可能在移植医学领域引发革命性进步。 成体干细胞：成年动物的许多组织和器官，比如表皮和造血系统，具有修复和再生的能力。成体干细胞在其中起着关键的作用。在特定条件下，成体干细胞或者产生新的干细胞，或者按一定的程序分化，形成新的功能细胞，从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平衡。分离方法： 目前胚胎干细胞来源主要是胚泡内细胞群和生殖嵴中的原始生殖细胞 免疫学方法：干细胞表面有许多特殊标记，利用这些标记，采用荧光细胞分离器从单细胞悬液中的分离纯化干细胞。 免疫外科方法：该方法基本原理是利用囊胚腔对抗体的不通透性，通过抗体、补体结合对细胞的毒性杀伤作用，去除滋养层细胞，保留CIM进行培养。 组织培养：将4-6天的胚胎取出培养，滋养层在培养皿底部平铺生长，而CIM形成卵圆柱装结构，在显微镜下用玻璃针挑出这种柱状结构，消化传代 显微外科学法：利用显微镜直接将CIM从胚泡中吸出进行培养。形态学检测：体积小、核大、核质比高，一个或多个突起的核仁，常染色质，胞质少、结构简单。体外培养：细胞排列紧密，集落状生长。碱性磷酸酶染色，细胞呈棕红色，周围成纤维细胞淡黄色。细胞克隆与周围界限明显，细胞克隆间界限不清、形态多样，多数呈岛状或巢状。 碱性磷酸酶活性的检测——染色后呈深蓝紫色 体内分化实验：畸胎瘤 体外分化实验：囊状简单胚体或类胚体，常见多种类型细胞混杂在一起 核型分析法：二倍体正常核型 OCT活性检测：多能性基因标志。OCT抗血清和间接免疫荧光法检测OCT基因表