器官保存液.doc

摘要 基于器官保存的方法在当下医学中研究的一个热点，主要用 摘要 针对其水溶性差的关键问题，合成表征了含铬、钼、钨羰基金属化合物。在充分考虑释放体系酸碱度、温度和传输溶剂等因素的基础上，采用肌红蛋白法，全面测定了铬、钼、钨羰基金属化合物的CO释放性能。结果发现，此类化合物能够在水相缓释CO，具有较好的生物相容性。红外表征与释放动力学Boltzmann拟合图谱结果表明，Mo系列（2a-2e）卡宾化合物可作为快速的一氧化碳释放分子，Cr系列（1a-1e）卡宾化合物具有适中的CO缓释性能，其释放速率平稳、有效。W系列化合物等的释放速率较慢，可适用于需要缓释CO的生物体系。 第六族羰基金属阴离子均具有较好的水溶解性和CO缓释性能。由于金属钼生物相容性好，Mo-CO具有适中的稳定性，有可能响应生理释放诱导因子缓释，是一类极具医学应用前景的CO-RM。此类释放分子的CO释放效率很高，每个金属可携带五个CO。水溶性离子化合物Mo-Br键具有适中的调节能力，且含有五个羰基，而且Mo金属无毒，是一类优秀的释放分子。但是通过其释放动力学测试可知，其释放速率均较快。 CORM是近年来合成的一类含有过渡金属的新型撰基化合物,能可控制地释放CO。 f_ 液使用一种大分子量的阴离子( 如乳糖 醛酸和三糖) 来抑制免疫诱导的细胞肿胀，内含胶质#羟乙 基淀粉#腺苷和谷胱甘肽，还包括别嘌呤醇，i j ; ]H j 浓度 比有一定的比例f_ 液比其他保存液有更广阔的保存领 域，如对心脏#肺#肝脏#肾脏#胰腺#小肠的保存这种保存 液允许最长期的安全保存时间，并且显示对保存单个细胞 也有效，包括: 胰岛#肝细胞 ［! 4(］第二，在充分考虑释放体系酸碱度、温度和传输溶剂等因素的基础上，采用肌红蛋白法，全面测定了15种阴离子型卡宾化合物的CO释放性能。结果发现，此类阴离子型卡宾化合物能够在水相缓释CO，具有较好的生物相容性。红外表征与释放动力学Boltzmann拟合图谱结果表明，Mo系列（2a-2e）卡宾化合物可作为快速的一氧化碳释放分子，Cr系列（1a-1e）卡宾化合物具有适中的CO缓释性能，其释放速率平稳、有效。W系列化合物等的释放速率较慢，可适用于需要缓释CO的生物体系。 肌红蛋白(Myoglobin)实验：用分光光度法通过测量脱氧肌红蛋白(deoxy-Mb)转化为羰基肌红蛋白(Mb - CO) 的量来研究金属羰基化合物释放一氧化碳的能力。而Mb-CO的浓度是通过测量该蛋白的Q带(540nm)的吸光度来定量的。将肌红蛋白溶解在 pH 7.4磷酸缓冲液（PBS）中，用连二亚硫酸钠将其还原为脱氧肌红蛋白(deoxy-Mb)，定量并测试并得到其紫外光谱，然后用CO鼓泡，获得羰基肌红蛋白(Mb - CO)的紫外光谱。CO-RMs 溶解在适当的溶剂中（DMSO，乙醇），然后添加到试管中的脱氧肌红蛋白(deoxy-Mb)中，用吸液管混合并上置矿物油以防止CO外溢或者亚铁肌红蛋白被氧化。Mb-CO浓度对时间曲线应用SigmaPlot的非线性回归程序进行处理，一氧化碳释放分子的半衰期可通过外推方程所得。 本文释放分子合成从六羰基金属铬、钼、出发，经由Fischer卡宾反应，生成阴离子卡宾化合物。 2.2 实验部分 2.2.1试剂与仪器 六羰基铬，六羰基钼，六羰基钨（GR，北京鸿睿天维科技有限责任公司），甲基锂（1.6M 乙醚溶液，阿拉丁试剂（上海）有限公司），四甲基氯化铵，四乙基溴化铵，四丁基溴化铵，苄基三甲基溴化铵，苄基三乙基溴化铵（AR，阿拉丁试剂（上海）有限公司），二甲亚砜（AR，国药集团化学试剂有限公司），四氢呋喃（AR，国药集团化学试剂有限公司，除水除氧）。 恒温磁力搅拌器（S25-2，上海司乐仪器有限公司），傅立叶变换红外光谱仪（EQUINX55，德国Brucher公司），超导傅立叶数字化核磁共振谱仪（Bruker公司）。 称取1.1 g（5 mM）六羰基铬加入Schlenk反应管中，采用真空线操作技术，用双头针在N2气保护下加入8 mL 干燥THF，机械搅拌，再用长针头逐滴滴加3.1 mL CH3Li溶液（1.6 M），溶液由淡黄色逐渐加深直至深红色，在冰浴下反应40 min，即得第一步中间产物阴离子卡宾中间体。 将阴离子卡宾中间体溶液转移至圆底烧瓶，加入50 mL四丁基溴化铵（5 mM，1.62 g）的水溶液，振荡，溶液颜色呈亮黄色，烧瓶底部有少量黄色固体形成。将混合溶液进行旋蒸，液面上产生大量气泡，黄色的溶液逐渐变澄清，瓶壁上有雪花状黄色固体生成，直至气泡不再产生时停止旋蒸。抽滤，得淡黄色有金属光泽固体粉末 五羰基乙酰基合铬（0）酸四丁铵 [(CO)5CrC18H39ON]的合成 五羰基乙酰基合铬（0）酸四丁铵合成方