实验室规则与全.ppt

中食高科微生物与分子实验室 中食高科 微生物与分子实验室 实验室规则与安全 余 蔚 微生物危害程度分级 生物安全实验室分级 实验室生物安全防护水平BSL（Biosafety Level）分为：I，II，III，IV级，分别以BSL-1，BSL-2，BSL-3，BSL-4表示实验室的生物安全防护水平 生物安全实验室的选择 II级危害常见致病菌的检测，生化鉴定，免疫实验，PCR提取，涂片，显微观察等均需在BSL-2实验室进行。 实验室生物安全防护屏障 一级屏障主要包括：各级生物安全柜（用于防护可能生成的含有病原微生物的气溶胶）和个人防护装备 二级屏障主要包括：建筑结构，通风空调，给水排水，电气和控制系统 生物安全实验室的硬件要求 BSL-2（基础生物实验室 ） 可共用建筑物，但应有可自动关闭带锁的门，实验室的门应有可视窗 应采用窗户进行自然通风，并应带有防虫纱窗。 应配备有生物安全柜，生物安全柜的作用是防护生成的含有病原生物的气溶胶 实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。 空气流向：缓冲区-低污染区-严重污染区，每个区之间有-10—-60pa的压差，防止空气倒流生物安全柜（BSCs）分级 不同保护类型及生物安全柜的选择 无菌室的硬件要求 墙面及地面应光滑，易于清洁与消毒 入口处应设有缓冲间，缓冲间应有紫外灯消毒，并有自动洗手和干手装置 推荐温度为20℃，湿度为40%-60% 应配备消毒装置：紫外灯等 微生物实验室进入规范 只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。 实验室的门应保持关闭。 儿童以及与实验无关的动物不应被批准或允许进入实验室工作区域。 无菌室的准备与进入 无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风 。 进入无菌室前30分钟应关闭紫外灯，以减少紫外线及臭氧对人体的伤害。 进入程序：肥皂（消毒液）洗手——换无菌室工作鞋——进入缓冲间——更换无菌室工作服，带口罩，帽子 人员防护 在实验室工作中，任何时候都必须穿着工作服。 在进行可能接触到感染性材料的操作时，必须戴手套，手套使用完毕，应先对手套进行消毒再摘除手套，随后必须洗手。 在处理完感染性材料或离开实验室之前，都必须先洗手。 严禁穿着实验室工作服离开实验室。 禁止在实验室工作区域进食，饮水，化妆，戴隐性眼睛。 禁止在实验室工作区域储存食物和饮料。 实验室工作服和日常服装必须分开放置。 无菌室工作结束后的处理 收拾操作台面的废弃物，用容器从传递窗传出。 喷75%酒精（消毒液）消毒操作台面，离开。 进入缓冲间，脱下工作服，口罩，帽子（一次性口罩，帽子应带出丢弃），换鞋 废弃物的处理程序 实验室应配备有普通废弃物和污染废弃物两个垃圾箱，在污染废弃物垃圾箱上应有生物危害标志。 废弃物应分类收集：实验室培养物及其污染物应放入污染废弃物垃圾箱内。 废弃物的处理与消毒： 121℃，30分钟或以上高压蒸汽灭菌，消毒液灭菌，或者高温灭菌。 任何必要的清洗，修复必须在灭菌或消毒处理之后进行 实验室的污染清除程序 无菌室： 紫外灯消毒：30min（室内温度20，湿度40%-60%）；30min（室内温度20或40,湿度60%） 臭氧消毒：20mg/m3浓度的臭氧消毒时间30min 消毒验证：平板计数琼脂平板开盖暴露15min后，转移至36培养48h，计数，要求15cfu 实验室的污染清除程序 实验室废弃物： 高压蒸汽灭菌是清除污染的首选方法。 实验室的培养物，感染材料等应先通过高压蒸汽灭菌（121℃，30min或以上）处理 其他消毒方法：消毒液（70%乙醇，有效氯浓度1g/mL的漂白剂，100mL/L的甲醇等）浸泡，高温消毒等 实验室的污染清除程序 生物安全柜： 多聚甲醛（空气中浓度达到0.8%）熏蒸6h，比多聚甲醛浓度高10%的碳酸氢铵蒸发后，接通生物安全柜电源，启动2s，使碳酸氢铵循环 实验室的污染清除程序 手部污染： 大部分情况下，用普通的肥皂和水彻底冲洗手部即可清除手部污染，在高度危险的情况下，建议使用杀菌肥皂。 手要完全抹上肥皂，搓洗至少10s，用干净水冲洗后再用干净毛巾或纸巾擦干。 没有条件彻底洗手或洗手不方便，应用70%酒精来清除手部的轻度污染。 安全应急程序 刺伤，切割伤或擦伤： 脱下防护服，用肥皂和大量流水冲洗受伤部位，应尽可能挤出伤口处的血液，70%酒精或其他消毒剂消毒伤口，必要时进行医学处理。 潜在危害性气溶胶的释放（生物安全柜外）： 所有人员立即撤离，任何暴露人员都应进行医学咨询，在一定时间内严禁人员进入，应在门口张贴“严禁进入”的标志。过了相应的时间后，应在生物专家的指导下清除污染才可以正常使用。 安全应急程序 容器破碎及感染性物质溢出： 应立即用纸巾或者毛巾覆盖在污染物上，随后在其上倒消毒剂，作用30m