2010国标 金葡.ppt

GB/T 4789.10-2010 金黄色葡萄球菌检验  1、分类 2、生物学特征 3、环境分布及危害 4、流行病学 5、食品中金黄色葡萄球菌的检验 1、分类 根据《伯杰氏鉴定细菌学手册》，按葡萄球菌的生理化学组成，金黄色葡萄球菌划为葡萄球菌属。葡萄球菌属分为金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(S. epidermidis)和腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)，其中金葡多为致病菌，表葡偶尔致病。 2、生物学特征 ––菌体形态及培养特征 典型的金黄色葡萄球菌 为球型，显微镜下排列成葡 萄串状,革兰氏阳性、无芽 孢，无荚膜。血平板菌落周 围形成透明的溶血环。 2、生物学特征 ––菌体形态及培养特征 金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上 生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度30 ℃ ~37℃，最适生长pH 6~7。 金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。 金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。 3、环境分布及危害 环境分布：空气、水、灰尘及人和动物的排泄物 危害：金黄色葡萄球菌引起的感染；金黄色葡萄球菌肠毒素； 在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中 毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多， 占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。 4、流行病学 季节分布：多见于春夏季； 中毒食品种类多：奶、肉、蛋、鱼及其制品； 剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等。 致病性 金黄色葡萄球菌为条件致病菌，其致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：　　 a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死；　　 b.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。 c.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；　　 d.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C1、C2、C3、D、E及F八种血清型。 e.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； 肠毒素形成条件 存放温度：在37℃内，温度越高，产毒时间越短； 存放地点:通风不良氧分压低易形成肠毒素； 食物种类:含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。 污染途径 食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染； 食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒； 熟食制品包装不密封，运输过程中受到污染； 奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。 污染的控制 防止金黄色葡萄球菌污染食品 防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员要暂时停止其工作或调换岗位。 污染的控制 防止金黄色葡萄球菌污染食品 防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染：如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至-10℃以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。 污染的控制 防止金黄色葡萄球菌污染食品 对肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。 污染的控制 防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成 应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防肠毒素形成； 在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时，并且食用前要彻底加热。 5、食品中金黄色葡萄球菌的检验 检测步骤---样品的制备 固体和半固体样品：称取25g样品至盛有225ml 7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质杯内，8000r/min~10000r/min均质1min~2min，或放入盛有225ml 225ml7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质袋中，用拍击器拍打1min~2min。 液体样品：吸取25ml样品至盛有7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠 胰酪胨大豆肉汤的无菌锥形瓶（瓶内可预置适当数 量的无菌玻璃珠）中，振荡混匀 检测步骤---增菌 利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性,因此用7.5%氯化钠肉汤，或者是含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌。 检测