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根据其移液的物理学原理可分为使用空气垫(又称活塞冲程)加样的移液器和使用无空气垫的活塞正移动加样的移液器。 根据移液量是否可调又可分为定量移液器和可调式移液器。 一、移液器的工作原理 移液器的基本工作原理是依据胡克定律。 在一定限度内弹簧伸展的长度与弹力成正比,也就是移液器的吸液体积与移液器内的弹簧伸展的长度成正比。移液器内活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。在活塞推动下,排出部分空气,利用大气压吸入液体,再由活塞推动空气排出液体。 二、常用移液器的工作原理 目前临床常用的移液器主要有空气垫移液器、活塞正移动移液器、多通道移液器和电子移液器。 1.空气垫移液器 空气垫移液器主要用于固定或可调体积液体的加样,加样体积的范围在1μl至l0ml之间。 空气垫的作用是将吸至塑料吸头内的液体与移液器内的活塞分隔开,空气垫随着移液器活塞的弹簧伸缩而移动,进而带动吸头中的液体。 空气垫移液器最大的不足之处就是容易受温度、气压和空气湿度的影响,导致加样的准确度降低。 2.活塞正移动移液器 该类移液器可以在空气垫移液器难以应用的情况下使用。 如移取具有高蒸汽压、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm3的液体。 3.多通道移液器和电子移液器 多通道移液器通常为8通道或12通道,与96孔(8×12)微孔板一致。 多通道移液器的使用不但可减少实验操作人员的加样次数,而且可提高加样的精密度。 电子移液器多为半自动加样系统,加样重复性高,可减少人为误差和污染,应用范围广。 第二节 移液器的结构、性能与使用 移液器是临床实验室中最常使用的移液器材之一,虽然其基本结构简单,使用方便,但对移液器的性能要求比较严格,作为专业的检验人员应当掌握移液器的基本结构和使用方法。 一、移液器的基本结构 移液器是一种量出式量器,移液量由一个配合良好的活塞在活塞套内移动的距离来确定。 移液器的基本结构主要由显示窗、容量调节部件、活塞、O-形环、吸引管和吸液嘴(俗称枪头)等部分组成 二、移液器的性能要求 移液量能否按照实验的要求精确量取,直接关系到检测结果的准确性和可靠性。 (一)计量性能要求 移液器在标准温度20℃时,其容量允许误差和测量重复性应符合《中华人民共和国国家计量检定规程——移液器》的要求. (二)通用技术要求 (三)移液器的检测 1.气密性检测 ①目视法检测:将吸取液体后的移液器垂直静置15秒,观察是否有液滴缓慢的流出。若有流出,说明有漏气现象; ②压力泵检测:使用专用的压力泵,检测压力情况,判断是否漏气。 (三)移液器的检测 移液器漏气的处理 (三)移液器的检测 2.准确性检测 ①量程小于1μl:建议使用分光光度法检测。 ②量程大于1μl:用称重法检测。通过对水的称重,转换成体积来鉴别移液器的准确性。 (四)移液器的专业校准 移液器的工作量大,长期使用,将会使弹簧弹力发生变形,加之使用塑料材料,不耐磨擦,容易产生误差。 新购进的移液器必须进行校准才能使用。 正在使用的移液器,由于长期使用会造成其设定体积与吸取体积的误差。 目前,由于实验室自身条件的限制,一般实验室进行的常规检测并不能完全取代专业的校准工作。 三、移液器的使用方法 移液器的操作是科学试验的第一步,是一个非常基础的试验操作,而错误的操作容易产生移液偏差,导致实验结果不准确。 (一)设定移液体积 从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可。 从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。 (一)设定移液体积 (二)装配吸液嘴 单通道移液器,将移液端垂直插入吸头,左右微微转动,上紧即可。 多通道移液器,将移液器的第一道对准第一个吸头,倾斜插入,前后稍微摇动上紧,吸头插入后略超过O型环即可 (三)移液方法 移液前,保证移液器、枪头和液体处于相同温度。 吸液前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴。 吸液时,保持竖直,枪头插入液面下2~3毫米。 前进移液法 用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体,最后松开按钮 反向移液法 一般用于转移高粘液体、生物活性液体、 易起泡液体或极微量的液体。 吸取液体时先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。将按钮按至第一停点排出液体,保持按钮位于第一停点,取下有残留液体的吸液嘴,弃之。 (四)移液器的放置 使用完毕,可以将其竖直挂在移液器架上。 当移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。 第三节 移液器的维护与 常见故障的排除 移液器以操作简单,准确性高等优点得到了广泛
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