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生 物 化 学 结构 理化性质 功能 Chapter 1 蛋白质 一、分子组成：1、特别元素N： 每g氮=6.25g蛋白质 基本组成单位：aa NH2 ︱aa：aa：半胱氨酸（酶的活性中心、有保护作用）（谷胱期太） ③酸性aa：天冬氨酸、谷氨酸（带负电荷） ④碱性aa：精、赖、组 （解离带正电荷） 二、aa的理化性质： ①两性解离：aa的等电点（PI） PH＜PI，解离为阳离子 PH=PI，成为兼性离子，是电中性 PH＞PI，解离为阴离子 举例PI1=4.0 PI2=7.8的两种氨基的电泳分离时，分离液PH值介于两个之间 ②茚三酮反应570nm③紫外吸收280nm 三、aa的生理功能： ①多肽链、蛋白质的主键是肽键，其余为次级键 ②多肽链有方向性，由N端→C端（α-氨基，α-羧基） 例：小肽 NH2-精一天冬-甘-谷-COOH 室全不同的肽链NH2-谷-甘-天冬-精-COOH ③肽键平面： 四、蛋白质的分子结构 1、一级结构aa的组成及排列顺序，最重要的结构，基因序例由遗传信息决定一级结构 2、二级结构：一级结构折叠盘旋、表现为α-螺旋，β-折叠 β-转角 无规卷曲、除肽键以外的次级键：氢键。 3、三级结构：特点为（1）形状呈现椭圆形、球形（2）空间维持的次级键主要为 疏水键、离子键、氢键、范得华力也参与（3）使疏水集团位于内部，亲力 集团位于外部，使稳定存在于水中，折叠盘旋后形成数个结构域 4、四级结构：两个（或以上）是有三级结构的多肽链组成的结构，即不同的 蛋白质的亚基，不是在三级结构的基础上盘旋而形成的对大部分蛋白质来源， 具有三级或四级结构才具有生物活性，但并不是所有的有生物活性的蛋白质具有三级（或以上）的结构。 五、蛋白质的理化性质： 两性触离：兼性、同样有PI 紫外线吸收：入=280nm有最大吸收值，测蛋白质含量 大分子物质 沉淀和变性次级键断裂，主键未断裂：蛋白质从溶液中析出来称为沉淀，Pr在水中的 两个稳定因素：水合膜和表面电荷。强电解质(如Nacl)可以抑制弱电触质触离也可以吸收弱电触质的水、使之沉淀，即盐析 六、Pr的分离和纯化 利用分子量：分子筛、离心、透析变性后：①生物学活性丧失 ②对蛋白酶的敏感性增加，易被水解③对化学试剂反应性↑ 利用电荷：电泳、层析、变性（denaturatcon）-不涉及-级洁构 变性的pr容易沉淀，沉淀的pr不一定是变性的。 区别pr变性和沉淀的方法：是沉淀而不是变性①盐析法②冰工醇(丙酮)-80℃ 七、pr的功能和结构的关系 分子病--- 一级结构发生改变影响其功能，如镰刀形RBC chepter2、pr合成 tRNA：将AA转运至核蛋白体 rRNA：与pr结合在一起，成核蛋白体，为pr合成提供场所 二、组成、1、DNA的核酸（dNTP）、A、T、G、C脱氧核糖 磷的一样 2、RNA的——（NTP） A、U、G、C 核糖 特点：①主键是一3`，5`磷的二酯键②方向性：由5`端→3`端游离羟基 三、DNA （1）DNA一级结构： 核苷酸的排列顺序即碱基排列顺序，蕴藏遗传密码。遗传信息就在此处 （2）DNA二级结构-双螺旋结构 ：①[A]=[T] [G]=[C] ②碱基无组织器官 特异性③有种属特异性④碱基不受年龄营养状况外在环境影响而改变。 例：从大脑取出一段DNA，在上列哪种组织中找出同源系列（可以杂交） ①人肝②猪脑③狗肺④狼心⑤猪肝 答案为1 DNA是反平行的互补双链结构，碱基位于内侧，按A=T，C=G配对存在，直向相反， 疏水性堆程力 5`-AACGCT-3互补链是{3’-TTGCGA-5’或5’-AGCGTT-3}’ （3）DNA的三极结构 双螺旋结构基础上扭曲为超螺旋，并且在pr 四、RNA：参与下组成核小体，然后进一步折叠压缩于染色体内，故核小体是染色体基本单位 1、mRNA：7甲基鸟甘帽子，5`端，尾巴、PolgA、3`端（多聚腺苷酸）（转录后又加上去的） 2、tRNA：二级结构是三叶草样 三级结构是倒L型 3、rRNA：与核糖体pr共同组成核糖体 DNA 和RNA的区别：①总体上RNA为单链，DNA为双链②RNA中，mRNA最重要，量最少（1%-2%），半衰期最短， tRNA合量介于两者之间，但含稀有碱基最多， rRNA 合量最多 五、核酸理化性质 在260nm有紫交战吸收峰值 高分子物质 核酸的变性：DNA：氢键被打断 解链温度（Tm）：核酸分子内双链解开50%，增色效应/高色效应 Tm值取决于G+C比例，成正此，同时②与DNA长度有关 DNA变性的复性：解开的单链重新聚合，条件是溶液浓度慢慢降低 但在冰浴中是不能复性的，称为退火，减色效应 六、杂交的条件及其意义及应用 七、核酶：具有酶催化活性