生化60答题课题.doc

1． 简述Chargaff定律的主要内容。 (2）在一个生物个体中，DNA的碱基组成并不随年龄、营养状况和环境变化而改变。 (3）几乎所有生物的DNA中，嘌呤碱基的总分子数等于嘧啶碱基的总分子数，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)的分子数量相等，鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子数量相等，即A＋G=T＋ C。 这些重要的结论统称为Chargaff定律或碱基当量定律。 2． 简述DNA右手双螺旋结构模型的主要内容。 答案：DNA右手双螺旋结构模型的主要特点如下： (1）DNA双螺旋由两条反向平行的多核苷酸链构成，一条链的走向为5′→3′，另一条链的走向为3′→5′;两条链绕同一中心轴一圈一圈上升，呈右手双螺旋。 (2）由脱氧核糖和磷酸构成的骨架位于螺旋外侧，而碱基位于螺旋内侧。 (3）两条链间A与T或C与G配对形成碱基对平面，碱基对平面与螺旋的虚拟中心轴垂直。 (4）双螺旋每旋转一圈上升的垂直高度为3.4nm(即34?），需要10个碱基对，螺旋直径是2.0nm。 (5）双螺旋表面有两条深浅不同的凹沟，分别称为大沟和小沟。 3． 简述DNA的三级结构。 答案：在原核生物中，共价闭合的环状双螺旋DNA分子，可再次旋转形成超螺旋，而且天然DNA中多为负超螺旋。真核生物线粒体、叶绿体DNA也是环形分子，能形成超螺旋结构。真核细胞核内染色体是DNA高级结构的主要表现形式，由组蛋白H2A、H2B、H3、H4各两分子形成组蛋白八聚体，DNA双螺旋缠绕其上构成核小体，核小体再经多步旋转折叠形成棒状染色体，存在于细胞核中。 4． 简述tRNA的二级结构与功能的关系。 答案：已知的tRNA都呈现三叶草形的二级结构，基本特征如下：(1）氨基酸臂，由7bp组成，3′末端有-CCA-OH结构，与氨基酸在此缩合成氨基酰-tRNA，起到转运氨基酸的作用;(2）二氢尿嘧啶环(DHU、I环或D环），由8～12个核苷酸组成，以含有5，6-二氢尿嘧啶为特征;(3）反密码环，其环中部的三个碱基可与mRNA的三联体密码子互补配对，在蛋白质合成过程中可把正确的氨基酸引入合成位点;(4)额外环，也叫可变环，通常由3～21个核苷酸组成;(5)TψC环，由7个核苷酸组成环，和tRNA与核糖体的结合有关。 5． 简述真核生物mRNA 3′端polyA尾巴的作用。 答案：真核生物mRNA的3′端有一段多聚腺苷酸(即polyA)尾巴，长约20～300个腺苷酸。该尾巴与mRNA由细胞核向细胞质的移动有关，也与mRNA的半衰期有关;研究发现，polyA的长短与mRNA寿命呈正相关，刚合成的mRNA寿命较长，“老”的mRNA寿命较短。 6．简述分子杂交的概念及应用。 答案：把不同来源的DNA(RNA）链放在同一溶液中进行热变性处理，退火时，它们之间某些序列互补的区域可以通过氢键重新形成局部的DNA-DNA或DNA-RNA双链，这一过程称为分子杂交，生成的双链称杂合双链。DNA与DNA的杂交叫做Southern杂交，DNA与RNA杂交叫做Northern杂交。 核酸杂交已被广泛应用于遗传病的产前诊断、致癌病原体的检测、癌基因的检测和诊断、亲子鉴定和动植物检疫等方面。 7．DNA热变性有何特点？ 答案：将DNA溶液加热到70～100℃几分钟后，双螺旋结构即发生破坏，氢键断裂，两条链彼此分开，形成无规则线团状，此过程为DNA的热变性。有以下特点：变性温度范围很窄;260nm处的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性丧失;比旋度下降;酸碱滴定曲线改变。 8. 试述下列因素如何影响DNA的复性过程：(1）阳离子的存在;(2）低于Tm的温度;(3）高浓度的DNA链。 答案：(1）阳离子可中和DNA分子中磷酸基团的负电荷，减弱DNA链间的静电作用，促进DNA的复性;(2）低于Tm的温度可以促进DNA复性;(3）DNA链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度和机会，从而促进DNA复性。 9．对一双链DNA而言，若一条链中(A＋ G)/(T＋ C)= 0.8，则：(1）互补链中(A＋G)/(T＋C)= ？(2）在整个DNA分子中(A＋G)/(T＋C)= ？(3）若一条链中(A＋T)/(G＋C)= 0.8，则互补链中(A＋T)/(G＋C)= ？(4）在整个DNA分子中(A＋T)/(G＋C)= ？ 答案： (1）互补链中(A＋G)/(T＋C)= 1/0.8 =1.25(2）在整个DNA分子中，因为A = T， G = C，所以，A＋G = T＋C，(A＋G)/(T＋C)= 1(3）互补链中(A＋T)/(G＋C)= 0.8?(4）整个DNA分子中(A＋T)/(G＋C)= 0.8 10.在pH7.0，0.165mol/L NaCl条件下，测得某一组织DNA样品的Tm为89.3℃，求出四种