产淀粉酶的芽孢杆菌筛选.ppt

鉴定 1、将单菌落点种落接到淀粉平板上纯培养，在37摄氏度培养2天。 2、在培养后的平板上滴加碘液，用直尺测量透明圈的大小。 从土壤中分离产淀粉酶的 芽孢杆菌 巩固微生物分离纯化、细菌保藏等技能，对所学习过的微生物学实验方法进行综合技能训练 培养综合利用微生物学、生物化学等相关知识，自行设计、实施并判断实验结果的能力 学习掌握从环境中分离产淀粉酶菌株以及菌株初步鉴定的方法 目的 实验目的 获得产淀粉酶的菌株并对其进行初步的鉴定 1、富集培养基： 10g的可溶性淀粉，蛋白胨10g， 酵母膏 3g/L、Nacl 2g、 蒸馏水1000ml (2倍浓缩100ml/500ml锥形瓶) 2、淀粉培养基：可溶性淀粉2g/L蛋白胨10g/L 牛肉膏3-5g/L NaCl5g/L PH7.2—7.4 ` 培养基 实验材料 实验前选取淀粉密集的地方（面粉厂附近）取样品土壤， 用塑料袋将样品保存好，留做实验之用。 ` 试验样品处理 实验材料 ` 玻璃器皿 烧杯（500ml） 锥形瓶（250ml） 培养皿 涂布棒 移液枪 试管 超净 工作台、生化培养箱、高压蒸 汽灭菌锅、水浴锅、培养接种器具， 等 ` 其他设备及仪器 一 产淀粉酶的芽孢杆菌含量在不同土壤中含量也不同，实验前进行预埋工作，能使土壤中产淀粉酶的细菌含量增加。待实验前取样即可 二 在只用淀粉充当碳源的选择培养基中，只有能产生淀粉酶利用淀粉的菌体能成为优势菌种，从而得到富集 实验原理 五 在已确定的芽孢杆菌情况下，在菌落处滴加碘夜来观察透明圈情况。 三 细菌富集一段时间后，生长环境不利，会产生芽孢，再在80-90 温度下杀死菌体，可使芽孢得到富集 配无菌水，并将其分装 到7个试管中,每只9ml。（7个管） 1、取10g土壤加入250ml烧杯中，再加入90ml无菌水,充分震荡，制成土壤混悬液。 2、在37摄氏度摇床（200r/min）培养箱中培养2~3个小时，使菌体充分扩散到无菌水中。 3、在80 ℃水浴锅中加热10~15分钟，杀灭菌体，使芽孢得到富集. 4、静置，取上清至富集培养基的锥形瓶中。在37摄氏度摇床（200r/min）培养箱中培养一天，使菌体富集且产生大量芽孢。 将富集后的芽孢菌液上清分别稀释 101、102、103、104、105 、106、107倍，分别取102 、104 、105 、106、107菌液0.1ml均匀涂布在10个淀粉培养基上，在37摄氏度培养箱培养2天，平板培养基表面便形成了若干分散的单菌落。 2 10 - 在单菌落处滴加碘液，挑取有透明圈的单菌落划线分离，在37的培养箱中培养2天。 初筛