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第六章 动物人工繁殖 胚胎工程技术 试管动物 试管婴儿 首例万枚羊胚胎移植工程在锡盟启动 1.2 万枚澳大利亚多赛特和陶赛克绵羊的胚胎(受精卵),在内蒙古锡盟乌拉盖草原的万余只母羊的子宫内“安家落户”。至此,世界上首例万枚优质种羊胚胎移植工程正式启动。此项工程是由香港屹昌科技集团和美国CCI集团完成,第一批投资0.89亿元人民币,总投资额高达10多亿元人民币。 2001 年春季,将有万余只澳州羊羔在中国出生。这将对整个中国西部畜牧业养殖结构的调整、养殖方式的改进、经营方法的转变及对草场的保护和生态环境的改变,都将产生十分深远的影响。 动物人工繁殖 有性生殖---体外受精、人工授精 无性生殖---核移植 一、胚胎工程简介 1、定义: 对哺乳动物的胚胎进行操作,让它继续发育获得人们所需要的成体动物的一种技术。 主要包括:胚胎培养、胚胎移植、胚胎性别鉴定、胚胎分割与融合、胚胎保存等。 试管动物(test-tube animal) 定义: 将供体的精子和卵子在体外受精、体外培养胚胎发育到一定阶段,通过胚胎移植移入受体完成发育出生的动物。 体外受精(in vitro fertilization,IVF) 定义: 是指使哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。 揭示受精本质和机制 研究胚胎分化和发育 胚胎移植(embryo transfer,ET) 定义: 是指将受精卵或发育到一定阶段的胚胎移植到与供体同时发情排卵但未经配种的受体母畜输卵管或子宫的技术。这个来自供体的胚胎能够在受体的子宫着床,并继续生长和发育,最后产下供体的后代。 2、发展历史 1878年,德国人斯考克,以家兔、豚鼠为材料探索,未成功。 1891年,英国剑桥大学的希普(Walter Hop),世界上首例兔子受精卵移植成功的例子 。 1959年,美籍华人生物学家张明觉,世界首批试管动物,体外受精技术的建立。 1982年,美国学者布拉吉特等培育出世界上第一个试管犊牛。 3、试管动物繁殖的优点: 发挥优良母畜的繁殖潜力----加快优良家畜品种的推广速度 促进家畜改良的速度----繁殖能力的提高 保存遗传资源----胚胎库的建立 辅助技术----克隆动物、转基因动物、胚胎干细胞分离和性别控制等 试管动物的培育流程 (1)精子采集与体外获能,卵子采集与成熟培养。 (2)体外受精。 (3)重组胚激活与体外培养。 (4)胚胎移植。 (5)体内发育、发生。 有活力精子的选择方法:“上浮分离法” 精子获能:指精子获得穿透卵子透明带能力的过程。 精子获能的意义:不仅增强了精子活力,关键是去除了精子表面的覆盖物,暴露出精子膜和卵子的结合位点,使精子具有发生顶体反应的能力。当精子遇到卵子时,精子头部的顶体脱落,顶体酶释放,使卵子的放射冠和透明带溶解,精子进入卵细胞达到受精目的。 自然状态下的精子获能 宫颈、子宫、输卵管液中的酶水解糖蛋白等去能因子,使精子顶体酶活性恢复 精子体外获能 获能: 钙离子 肝素 血清蛋白 精细胞形成过程和卵细胞形成过程的异同 1、在减数分裂第一次和第二次的后期,精细胞形成过程中细胞质是均等分裂的。而在卵细胞形成过程中,细胞质是不均等分裂的。 2、形成的数目不同。一个精原细胞经过减数第一次分裂形成两个次级精母细胞,再经过减数第二次分裂共形成四个精细胞;而一个卵原细胞经过减数第一次分裂形成一个次级卵母细胞和一个极体,再经过减数第二次分裂只形成一个卵细胞,伴随形成三个极体(以后退化消失)。 3、精细胞还要变形才能形成精子,而卵细胞没有这个过程 2.卵子的采集与成熟培养 超数排卵是指在母畜发情周期的适当时间用人工的方法促使其有更多的卵发育、成熟、排卵的一项技术。 目的-----人工地使动物的激素水平达到阈值,从而诱发卵的成熟与排放。 方法-----主要是向动物体内注射某些促性腺激素,对卵巢产生作用促进排卵。 这些激素包括:孕酮、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、促黄体激素(LH)、促性腺激素释放激素(GnRH),前列腺素,孕马血清促性腺激素等 。 影响超数排卵效果的因素:供体年龄、供体品种差异、激素的处理剂量、卵巢状况等。 成熟卵细胞收集方法: 成熟卵细胞的收集----腹腔镜、吸管 关键掌握卵细胞进入输卵管和卵细胞在输卵管中维持受精能力的时间。 卵巢上有腔卵泡卵母细胞 (1)活体卵巢采集--
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