厌氧菌的分离和鉴定_培训课件.pptVIP

厌氧菌的分离与鉴定 卫生部北京医院 陈东科 厌氧菌检验是临床微生物检验的重要组成部分。在无氧（或少氧）条件下，或氧化还原电势低的条件下才能繁殖的细菌称为厌氧菌。因为厌氧菌在人体肠道、口腔、泌尿生殖道正常菌群中占优势，所以当人体菌群失调时，厌氧菌可能侵犯人体许多部位，发生严重的甚至致死的内源性厌氧菌感染。厌氧菌感染常发生在深部伤口, 但也可伴兼性厌氧菌和需氧菌侵犯人体任何器官和组织。所以，对厌氧菌检验应给予高度重视。 人体各部位厌氧菌寄生量及其与需氧菌之比 __________________________________________________________ 厌氧菌数量 眼结膜 鼻涕 唾液 牙表面 牙周袋与牙垢 __________________________________________________________ （cfu\g） 103~4 101~4 108~9 109~10 1011~12 厌氧菌与需氧菌之比 10:1 10:1 8~10:1 1:1 1000:1 __________________________________________________________ 厌氧菌数量 胃液 结肠 小肠 阴道 外尿道 皮肤__________________________________________________________ （cfu\g） 102~5 1011~12 104~6 108~9 103~5 103~4厌氧菌与需氧菌之比 1:1 1000:1 1:1 10:1 10:1 10:1 __________________________________________________________ 1.正确地选择标本 下列细菌学指征有助于选择标本做厌氧培养：（1）深部伤口或软组织脓肿的脓，特别是伴有恶臭或含有硫磺颗粒时。（2）可疑为气性坏疽或少见的严重产气或坏死性感染所取得的坏死组织或病灶清除材料。（3）粘膜部位的感染灶取得的材料。（4）从脑、肺、肝或其他器官的脓肿或从腹腔内、肛周、隔下或其他部位的脓肿取得的材料。 （5）无菌区感染灶的吸出液(包括血液、脑脊液、腹水、胸水、滑膜液、羊水等)。（6）人或动物咬伤感染灶取得的材料。（7）变黑的或置于紫外线发红色荧光的渗出物。（8）革兰染色，镜下见到具有厌氧菌独特形态的材料。（9）可疑引起肉毒杆菌食物中毒的食物。 2.正确地收集标本 厌氧菌是人体许多部位（如皮肤、口咽部、肠道和泌尿生殖道）正常菌群中的一部分，因此下列材料无需做厌氧培养：（1）咽、鼻、尿道或直肠拭子。（2）咳出的痰，通过支气管镜取的分泌物，排出或导出的尿、粪及胃内容物。 为排除或尽量减少正常菌群中厌氧菌的污染，用注射器抽取标本比用拭子更好，特别适用于下列临床情况：（1）从未开放的脓肿抽取脓液。（2）通过胸腔穿刺抽出的胸腔液。（3）从耻骨联合上方做膀胱穿刺吸出或从肾造口管收集的尿。（4）气管切开吸取的肺分泌物。 （5）穿刺抽出的腹腔液。（6）通过腰椎穿刺抽出的脑脊液。（7）窦道标本可插入小导管用注射器吸出，注射器和针头内的气体应全部排出，将其内容物直接注入一个已排出气的无菌试管内。也可自窦道损伤部位取材做活组织检查。如果必须使用拭子，应尽快接种于适宜的培养基中。 3. 正确地运送标本 临床标本一旦离开人体部位，在进入厌氧环境前，必须防止大气中氧的毒性作用。应及时将取材的拭子、塑料导管内的少量液体、吸入注射器的标本装入厌氧生物袋或管，在运送过程中要保持厌氧状态。培养基内不应含有肝素，因它会抑制细菌生长。 4. 使用新配制的培养基 初代接种厌氧菌最好使用新配制的培养基。 平板培养基无需在厌氧条件下贮存，用前可进行预还原，但厌氧条件下贮存可延长培养基的有效期。 5. 提供可靠的厌氧环境 使用厌氧罐法、厌氧袋法或厌氧箱法。在厌氧培养中必须使用氧化还原指示剂，一般采用亚甲基美兰或刃天青，每次要新鲜配制。如果能在孵育的整个过程中维持厌氧条件，指示剂溶液将无色，否则指