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* 实验一 细胞膜的渗透性及去污剂对红细胞膜稳定性的影响 一 细胞膜的渗透性 (一)、实验目的 1.了解细胞膜的渗透性 2.了解各种小分子物质跨膜进入红细胞的速度 1 物质运输小分子: 大分子: (二)、实验原理 2. 等渗 (isotonic or isosmotic)溶液和溶血 在等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹圆碟形;在渗透压递减的一系列溶液中,红细胞逐步胀大并双侧凸起,当体积增加30%时成为球形;体积增加45%~60%则细胞膜损伤而发生溶血,絮状物消失,溶液由悬浊液变为澄清,这时血红蛋白逸出细胞外。 将红细胞放入数种等渗溶液中,由于红细胞对各种溶质的透性不同,有的溶质可以渗入,有的不能渗入,渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压,所以促使水分进入细胞,引起溶血,由于溶质透入速度互不相同,因此溶血时间也不相同。 (三)、实验材料、用品 1. 器材 50ml烧杯,试管(1~10cm),试管架,移液管(5mL、0.5mL). 2. 材料 鸡血. 3. 试剂 0.17mol/L氯化钠,0.17mol/L氯化铵,0.17mol/L醋酸铵,0.17mol/L硝酸钠,0.12mol/L草酸铵,0.12mol/L硫酸钠,0.32mol/L葡萄糖,0.32mol/L甘油,0.32mol/L乙醇,0.32mol/L丙酮, (四)、实验步骤 鸡血细胞悬液 取50ml小烧杯一个,加1份鸡血和10份0.17mol/L氯化钠,形成一种不透明的红色液体,此即为稀释的鸡血. 2. 低渗溶液 取试管一支,加入5ml蒸馏水,再加入0.5ml稀释鸡血,注意观察溶液颜色的变化,由不透明的红色逐渐澄清,说明红细胞发生破裂造成100%红细胞溶血,使光线比较容易透过溶液。 3. 鸡红细胞的渗透性 1)取试管一支,加入0.17mol/L氯化钠5ml,再加入0.5ml稀释鸡血,轻轻摇动,注意观察溶液颜色有无变化,有无溶血现象,为什么? 不 同 低 渗 溶 液 中 的 溶 血 现 象 11. 5ml丙酮+0.5ml稀释鸡血 10. 5ml乙醇+0.5ml稀释鸡血 9. 5ml甘油+0.5ml稀释鸡血 8. 5ml葡萄糖+0.5ml稀释鸡血 7. 5ml硫酸钠+0.5ml稀释鸡血 6. 5ml草酸铵+0.5ml稀释鸡血 5. 5ml硝酸钠+0.5ml稀释鸡血 4. 5ml醋酸铵+0.5ml稀释鸡血 3. 5ml氯化铵+0.5ml稀释鸡血 2. 5ml氯化钠+0.5ml稀释鸡血 1. 5ml水+0.5ml稀释鸡血 结果分析 时间 是否溶血 试管编号 (五)、实验结果 将观察到的现象列入下表,对实验结果进行比较和分析。 二 去污剂对红细胞膜稳定性的影响 (一)、实验目的 掌握用比色计测量去污剂对细胞膜溶解作用的原理。 了解各种去污剂对细胞膜稳定性的影响,学会比较这种影响的方法。 (二)、实验原理 多种去污剂可以溶解细胞膜上的磷脂化合物,从而使细胞膜破裂,释放出细胞内物质。 本实验以红血球为材料,检测几种去污剂破坏红血球细胞膜的作用。通过测定几种去污剂作用后的无细胞溶液在540毫微米(血红蛋白的特异吸收高峰)波长处的光密度值,进行检验。 *
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