人类疾病动物模型讲义.ppt

2．胆石症动物模型(animal model of cholelithiasis) 我国人群中胆结石疾病，特别是原发性胆管结石发病率高，手术后复发又非常普遍，最后常因反复感染发生胆汁性肝硬化而死亡。因此是医学领域中极为重要的课题之一。近年来对胆结石病的研究和诊断水平有了很大的提高和发展，但临床上开展胆石症的治疗研究仍然存在着一定的局限性，因此临床研究不易获取符合研究需要的，系统性和可比性的病理标本。而胆结石动物模型的建立为临床研究胆石症开辟了一条新的研究途径。自从1952年Dam及Christensen以仓鼠成功地复制成胆固醇结石的实验动物模型以来，各国学者广泛地开展了这方面的研究。 动物可用叙利亚仓鼠、健康成年家兔、大鼠、家犬或猴等，具体方法有： (1) 食饵法：①选用叙利亚仓鼠，50～60g左右，基本食饵的特点为高糖，不含不饱和脂肪酸。食饵配制方法：蔗糖74％，酪蛋白2l％，食盐4.4％，胆碱0.1％，浓缩鱼肝油0.5％。按每只仓鼠每日5～9g，分两次喂养，同时每周喂青菜、麦芽1～2次，以补充维生素等，维持动物生命。14～21d仓鼠胆囊内形成明显结石，22d后成石率高达100％。②选用雌性豚鼠，体重250～300g。成石饲料的配制：在基础食物中加入酪蛋白1％，蔗糖1.5％，猪油1％，纤维素1％，胆酸0.02％，胆固醇0.05％。2个月后在90％的豚鼠胆囊中可产生以胆色素为主的结石，其成分和结构与人类的胆色素结石相似。 ③ 选用成年家犬，成石饲料成分：50％蔗糖、10％酪蛋白、20％玉米淀粉、5％动物油、1％胆固醇，辅以矿物质和维生素，特点为高蛋白、高碳水化合物，其中胆固醇为关键成分。12周后结石成石率达100％，结石为胆色素结石。 本模型适用于饮食与结石生成关系及代谢和防治研究，以及胆石生成过程中胆色素、胆汁酸和糖蛋白三者间的相互关系的研究。 (2) 感染成石法 健康成年家兔，大鼠或家犬，采用无菌条件下剖腹术，显露十二指肠，从十二指肠乳头逆行插入一塑料管进入胆囊，从中注入蛔虫卵或大肠杆菌悬液。蛔虫卵悬液浓度为每毫升含3万～15万个蛔虫卵。7个月后胆囊呈慢性炎症，囊内结石形成。此模型除用于防治研究外，还可进行有关胆系感染的功能代谢变化的分析与观察研究。 (3) 狭窄成石法 可选用健康成年家兔、家犬或猴，家兔诱发率高。 ① 胆囊结扎法：健康成年家兔，无菌条件下剖腹手术，分清胆管与肝管，用银夹适当地夹住胆囊颈部以产生部分梗阻。6个月后胆囊中有明显结石形成。 ② 胆总管结扎法：家兔剖腹后显露胆总管，在十二指肠上缘处预先经双鲸蜡基-26烷磷酸钠(dicetyl sodium phosphate)浸渍外敷纤维素粘胶(cellophane)的细带松松结扎一道。4个月后出现胆总管狭窄或完全梗阻，70％～80％出现胆囊结石，这种结石质软，色深，有的属于纯胆色素结石，但大多为含胆色素与胆固醇的混合结石，此实验模型可用于进行胆色素混合结石的发病学与防治研究。 (4) 切除迷走神经干成石法 健康成年家兔或狗，性别不拘。 ① 采用无菌手术探明家兔胆道及胆囊正常，然后显露胃、贲门及食管，将食管悬吊，显露两侧迷走神经干，从食管下端切除两侧迷走神经干各1.5～2.0cm。手术结束后，在腹腔内注入50％葡萄糖20ml，术后继续禁食16～20h。术后家兔胆汁成分明显改变，4～5周有胆固醇结石形成。 ② 将狗麻醉后行无菌剖腹术。在隔下右侧肾上腺上方找出右侧内脏大神经，用止血钳小心分离，直达交感神经节，在神经干的局部撒无菌的浮石粉(pumice powder ，一种对神经组织有刺激作用的物质)，将放药粉的局部与腹腔内脏分隔，再沿胃的贲门上至食管，切断两侧的迷走神经干，随后缝合腹膜，术后2个月剖腹检查，可见多数动物呈现慢性或亚急性胆囊炎的变化，组织学检查显示胆囊粘膜下水肿，有淋巴细胞和浆细胞浸润和不同程度的结缔组织增生，约有半数个体的胆囊内可找到大小不一、单个或多个胆色素结石。此模型可用于探讨中西药物治疗措施，或对胆石形成和胆道功能的影响及其机制的研究。 3. 胆管囊肿动物模型(animal model of bile ductcyst) 胆管囊肿的基本发病环节有： ① 病变处部分或全部管壁薄弱，可能因胚胎发育的异常或感染，外伤或胰管系结构异常所致胰液逆流而引起，或者是新生期病变部发育不全； ② 在存在或不存在病变部位远侧胆道梗阻情况下，肝胆汁分泌与胆囊胆汁排泄所致胆道内压的增高。胆道梗阻亦可因不同的先天性或获得性病因而引起。 采用绵羊或山羊(出生后14d内)，雌雄不拘，