分子生物学第三次课.ppt

（5）复制的终止 到达终止子序列（Ter）时，Ter-Tue复合物使DnaB不再将DNA解链，阻止复制叉迁移。 相反方向的复制叉到达后停止复制 其间少量未复制序列由修复方式填补 拓扑异构酶IV作用下复制叉解体，释放子链。 1.错配修复 错配修复 3 ? 5 ? 3 ? 5 ? 解链方向 复制方向与解链方向相反，须等待解开足够长度的模板链才能继续复制 ，所得到一条由不连续片段组成的子链 。 随从链 (lagging strand) 冈崎片段（ Okazaki fragment ） 3’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5` 5` 5` DNase I OH P 5` DNA聚合酶 dNTP 5` 5` P ATP ADP+Pi 5` 5` DNA连接酶 随从链上不连续性片段的连接 真核生物复制的特点 真核生物的每条染色体上有多个复制起始点，如酵母17号染色体有400多个起始点， 真核生物的染色体在完成复制之前各个起始点的复制不能再开始 真核生物复制的起始需要起始原点识别复合物 真核生物的DNA聚合酶 DNA - pol ? 引物合成 在前导链延长中起主要作用 DNA损伤修复中起作用 在后随链复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用 在线粒体 DNA复制中起催化作用 DNA - pol ? DNA - pol ? DNA - pol ? DNA - pol ? DNA 的半不连续复制 拓扑异构酶 DNA 解链酶 单链DNA结合酶 引发酶 DNA聚合酶 Rnase H 降解酶 DNA连接酶 DAN 复制为半保留复制 DAN 复制为半不连续复制 DAN 复制在特定的起始位点起始，多为双向等速进行复制 1.首先拓扑异构酶解开超螺旋 2.DNA解链酶解开DNA双链 3.单链结合蛋白与DNA单链结合 4.引物酶合成引物提供3-OH 5.DNA聚合酶合成新链，一条链为前导链，另一条链形 成冈崎片段 6.RNA酶将RNA引物水解，DNA聚合酶将却空缺按互补配对原则合成DNA,DNA连接酶将DNA连接，形成连续的新链 解 链、 解 旋 酶 类 解链酶 （ helicase ) —— 利用 ATP 供能，作用于氢键， 使DNA双链解开成为两条单链。 单链DNA结合蛋白（SSB） SSB Dna B Dna C 解链方向 DNA拓扑异构酶 （DNA topoiSOmerase） 10 8 局部解链后 引物酶和引发体 引物酶 ( primase ) 在模板的复制起始部位催化NTP的聚合, 形成短片段的RNA,这一小段RNA作为复制 的引物（primer），提供3?-OH末端,使DNA-pol能够催化dNTP聚合。 依赖DNA的RNA聚合酶 引物酶与其他和复制有关的蛋白质形成的复合物。 引发体（primosome） DNA复制的特点： 1.DNA 半保留复制 2.半不连续复制 3.需要引物 4.双向复制 5.有一定的复制起始点 6.DNA复制的保真性 与DNA复制有关的物质 1.四种脱氧核苷三磷酸 2.模板 亲代DNA 解链后分别作为模板进行复制 3.引物合成酶 4.DNA聚合酶 5.DNA连接酶 6.DNA解旋酶 7.单链结合蛋白 2.DNA复制的几种方式 (1).线性DNA复制的方式 多数为双向复制，多个起始位点，复制叉处有眼状结构，称为复制眼。 (2).环状DNA复制方式 A.θ复制 B. D-环复制 单向复制 线粒体，叶绿体 C. 滚环复制也叫σ复制 DNA 复制的调控 原核生物的调控，DNA链的延伸速度恒定，复制叉的数量决定细胞生长和增值速度。 ColEI 质粒DNA 的复制调控 DNA编码两个负调控因子，Rop 蛋白和反义RNA DNA复制方向 起始点 RNA前体 100 200 300 400 500 600 -500 -400 -300 -200 -100 RNA1 Rop基因 Rop蛋白63个aa RnaseH 真核细胞DNA 的复制调控 真核细胞的生活周期分为4个时期G1复制预备期S、复制期G2、有丝分裂准备期、M有丝分裂期 真核生物复制有3个水平的调控 细胞生活周期水平调控，决定细胞停留在G1期还是进入S期 染色体水平，决定不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按一定顺序起始复制 复制子水平调控，决定复制的起始与否 真核细胞DNA 的复制调控 真核细胞的生活周期分为4个时期G1复制预备期、S复制期、G2有丝分裂准备期、M有丝分裂期 真核生物复制有3个水平的调控 细胞生活周