分子遗传全部总结1.doc

第一章 引言 1分子遗传学概念:广义指研究蛋白质及核酸等生物大分子的结构、功能和生物大分子之间的互作，即分子水平上阐明生命现象和生物学规律。 狭义指研究基因的概念、结构、复制、表达、调控、遗传、突变及交换的分子基础。 2诺贝尔奖获得情况，挑选三个即可： 1932年C.S.谢林顿、E.D.艾德里安（英国人）发现神经细胞活动的机制 1933年T.H.摩尔根（美国人）发现染色体的遗传机制，创立染色体遗传理论 1946年H.J.马勒（美国人）发现用X 射线可以使基因人工诱变 1980年——三位分子生物学家获得化学诺贝尔奖的是:F.Sanger(英国剑桥,分子生物学实验室)以发展核酸分子技术、w.Gibert(美国哈佛大学)以发展核酸序列的各种技术以及P.Berg(美国加州,斯坦福大学)从事核酸和遗传操纵方面的研究而著称。 1989年——美国科罗拉多大学的Thomas Cech与耶鲁大学的Sidney Altman由于在阐明RNA的酶活性方面所作出的杰出贡献而分享了1989年度诺贝尔化学奖。 1999年 Gunter Blobel发现控制细胞运输和定位的内在信号蛋白质 2002年，英国科学家悉尼·布雷内、约翰·苏尔斯顿和美国科学家罗伯特·霍维茨。他们为研究器官发育和程序性细胞死亡过程中的基因调节作用作出了重大贡献。 2007年，两名美国人马里奥·卡佩基、奥利弗·史密斯和一名英国人马丁·埃文斯，获得 2007年诺贝尔生理学或医学奖。诺贝尔奖评审委员会发布的公报说，三位科学家“在涉及胚胎干细胞和哺乳动物ＤＮＡ重组方面有着一系列突破性发现”，为 “基因靶向”技术的发展奠定了基础。 2009年——杰克·绍斯塔克（Jack Szostak，1952年11月9日－），美国生物学家、哈佛医学院遗传学教授。他与伊丽莎白·布莱克本和卡罗尔·格雷德因为“发现端粒和端粒酶如何保护染色体”而一起获得2009年诺贝尔生理学或医学奖。 第二章 遗传的物质基础 1.三种类型的遗传物质（DNA,RNA,蛋白质） 遗传物质必须特性：储存并表达遗传信息，能把遗传信息传递给后代，物理和化学性质稳定，具有遗传变化的能力。 DNA作为遗传物质的优点：①储存遗传信息量大 ②能把遗传信息传递给子代 ③物理和化学性质稳定 ④具有遗传变化的能力 RNA病毒有RNA和蛋白质，类病毒只有RNA（通常致病） 阮病毒只有蛋白质，可以被蛋白酶K灭活，不能被核酸酶处理和UV辐射灭活。 影响DNA双螺旋稳定性的因素 ①氢键—弱键，可加热解键 ②碱基堆积力—碱基堆积力：同一条链中的相邻碱基之间的非特异性作用力；来自于疏水作用力、累积的范德华的作用力；证据（略）③磷酸酯键—强键需酶促解链 ④磷酸基团间的静电斥力，0.2mol/LNa生理盐水消除静电斥力 ⑤碱基内能增加，使氢键因碱基排列有序状态的破坏而减弱 Z—DNA 左旋双螺旋DNA，在双螺旋多核苷酸链中，只要嘧啶和嘌呤交替排列，在高盐浓度下，可出现Z构象，其脱氧核糖—磷酸骨架按之字形从一端伸向另一端。 反向重复序列（回文序列）及重要性 也叫回文序列，两段同样的DNA碱基序列同时存在于一个DNA分子中，但方向相反。 变性后再复性时，同一链内的互补的拷贝可以形成链内碱基配对，形成发夹式或+字形结构。 较长的回文结构：可形成茎环结构或十字形结构；较短的回文序列：可作为一种特别信号，如限制性切酶的识别位点，一些调控蛋白的识别位点；转录的终止与回文结构有关；TRNA的三叶草结构 TM值 DNA双螺旋结构失去一般时的温度，一般为85—95度 DNA分子变性以后的特性，影响变性、复性的因素 变性后特性：变性DNA在A260nm下的光吸收增加（增色效应）；DNA溶液的粘度降低；沉降速度加快，沉降系数变大；DNA严重失去生物活性。 影响变性因素：①ATCG随机分布时，决定于GC含量②GC含量相同时，碱基排列对变性有明显影响③大片段的DNA，片段长短对其影响小，与组成和排列相关④小片段，片段愈短，变性愈快⑤变性液中含有尿素、酰胺等，改变碱基对间的氢键⑥盐浓度影响：Na在磷酸基团周围形成的电子云对静电斥力产生屏蔽作用，减弱静电斥力⑦极端pH的影响：改变氢键的形成与结合力。 影响复性因素：①阳离子浓度，一定浓度可消除polyDNA间的静电斥力②复性反应温度，以消除SSDNA分子内部分二级结构③SSDAN的初始浓度④SSDNA分子的长度：SSDNA愈长，分子扩散愈慢，复性愈慢⑤DNA分子中DNA的排列序列状况（随机排列，重复排列）⑥DNA热变性后将温度缓慢冷却，维持在Tm值左右，变性后的单链DNA即可恢复双螺旋结构，理化性质都能得恢复 PCR技术 标准PCR反应体系：4种DNTP混合物，引物，模板DNA，Taq DNA聚合酶，Mg 特点：灵敏度高，简便快速，