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第七章 革兰阴性球菌 奈瑟菌属（Neisseria）布兰汉菌属（Branhamella） 概述 “伯杰鉴定细菌学手册”第9版 将奈瑟菌属和布兰汉菌属归于群4，将奈瑟菌属、莫拉菌属、金氏菌属和不动杆菌属都归于奈瑟菌科 奈瑟菌属中的淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）、脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）以及莫拉菌属中的卡他莫拉菌（M.catarrhalis）是主要的致病菌。 目前对卡他莫拉菌是归属尚未定论 一、分类 淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌对人致病 寄生在人体内鼻咽腔的腐生菌 解乳糖奈瑟菌、干燥奈瑟菌、微黄奈瑟菌、粘 液奈瑟菌、浅黄奈瑟菌、灰色奈瑟菌、延长奈 瑟菌、去氮奈瑟菌和多糖奈瑟菌 二、脑膜炎奈瑟菌临床意义 寄居于人的鼻咽腔、口腔粘膜上，通过呼吸道分泌 物或空气微滴核而传播。 流行性脑脊髓膜炎 冬末春初，多为学龄儿童、青少年 感染后多为隐性感染，少数可发展为菌血症或败血症，进而累及脑、脊髓膜，形成化脓性脑膜炎 可出现严重的临床症状如发热、头痛、脑膜刺激 症阳性、甚至休克和DIC等；菌血症和细菌的损 伤作用使约半数患者出现皮下瘀斑 脑膜炎奈瑟菌临床意义 尽管可以在鼻咽部形成带菌状态，但侵袭性的脑膜炎奈瑟菌感染多为新近感染，急性发病，发病时机体内缺乏杀菌抗体。 主要致病物质是脂多糖 依据荚膜多糖的抗原成分可分为：A、B、C、……等13个血清群，我国A群占95.8%，其余为B、C等群。 淋病奈瑟菌临床意义 淋病的病原菌 主要通过性接触直接感染 在分娩时通过产道感染新生儿 临床表现为： 单纯性淋病 盆腔炎口咽部和肛门直肠淋病 淋菌性结膜炎 播散性淋病 致病物质包括菌毛、外膜蛋白、蛋白水解酶、脂多 糖和铁调节蛋白 1．形态 革兰阴性双球菌 直径0.6~1.5μm 形似双肾或咖啡豆样，凹面相对 无动力，无芽胞， 某些菌种形成荚膜 2．培养特性 需在培养基中添加羊血、兔血或血清，对脂肪酸敏 感，在培养基中需加入可溶性淀粉。 需氧生长，初次分离需5%~7%CO2和高湿度 最适生长温度为35~37℃，低于30℃不生长 血琼脂平板或巧克力琼脂平板上呈光滑、湿润、 透明或半透明、直径1~2mm的不溶血、圆形、灰兰色菌落 卵黄琼脂平板上为无色、光滑、湿润奶油状菌落 在液体培养基中呈轻度或中度混浊生长，无菌膜 脑膜炎奈瑟菌于孵育24h后在培养基上发生自溶 3．生化特性 氧化酶阳性，触酶阳性（除延长奈瑟菌外） 对糖分解能力、硝酸盐还原能力和DNA合成酶不同，常作为菌种间的鉴别依据 奈瑟菌属DNA中G+Cmol%为46~54 4．抵抗力 对寒冷、干燥和热的抵抗力弱，对化学消毒剂敏感 对青霉素敏感 但近年来由质粒介导的β内酰胺酶所致的耐 药在淋病奈瑟菌中产生较多 脑膜炎奈瑟菌 标本采集 无菌方法抽取脑脊液、关节液、血液、瘀点穿刺液等标本 采集后立即送往实验室 用血平板进行床边接种后置35℃孵育 血液标本接种在血液培养瓶中置35℃孵育 标本运送时需要35℃保温 标本直接检查 直接涂片检查 脑脊液直接或经离心后取沉淀涂片 皮肤瘀点渗出液涂片 革兰染色后显微镜下见白细胞内外的革兰阴性双球菌，可报告“检出革兰阴性双球菌，疑似脑膜炎奈瑟菌”。有助于流行性脑脊髓膜炎早期诊断 抗原检查 通常用胶乳凝集试验和其他凝集试验 包括A、C、Y、W125血清型的多价抗体和血清型B抗体 检测结果应结合涂片和培养结果，抗原检测阳性结果可作出快速、推测性诊断 分离培养鉴定 脑脊液标本 接种在巧克力琼脂或羊血琼脂平板 咽拭子或鼻咽拭子 接种在选择性培养基上如改良的Thayer-Martin(MTM)、GC-Lect、New York City(NCY)等培养基 血液标本 经增菌培养基增菌培养后，移种至巧克力琼脂或羊血琼脂平板上 置5%~7%CO2 35℃孵育，每隔24h观察平板 鉴定 初步确定为奈瑟菌属 直径1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落 涂片革兰染色见阴性双球菌 氧化酶试验阳性 进一步进行葡萄糖和麦芽糖发酵试验阳性、其他糖 类发酵阴性可确定为脑膜炎奈瑟菌 用分型血清确定血清型别 平板上没有发现菌落需继续观察72h后无菌生长可报 告为阴性 （二）淋病奈瑟菌 1．检验程序 2．标本采集 阴道和宫颈分泌物 用无菌塑料棒涤纶拭子，伸入阴道后穹隆或宫颈内1cm处 停留10~15秒时间，蘸取 采集尿道分泌物 弃去前段脓性分泌物，留取后段作为标本 尿液 直肠肛拭标本 废弃第一根污染棉签，用第二根棉签醮取的分泌物 新生儿结膜炎时应采取眼结膜表面分泌物 3．标本直接检查 标本采集后应立即涂片、革兰染色、显微镜检查 男性尿道分泌物标本中可见中性多形核细胞内、外较多