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临床病原体检查 临床病原体检查目的 明确感染是否发生以及病原体的类型。 提供体外抗微生物药物敏感实验的结果。 密切监视烈性传染病与新的传染病的发生,及时向行政主管部门报告。 配合相关机构进行流行病学调查。 临床病原体检查的基本程序 医生、护士、病人、检验师:正确采集运送标本。 检验科:直接镜检、免疫学和分子生物检测、病原体分离培养鉴定、药敏实验——报告结果。 医生:明确诊断、合理用药。 一、标本采集和运送 标本采集的基本原则 无菌、及时、按照要求、标注清晰 根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位,尽量采集病变明显部位标本。 在发病的早期或急性期采集标本,最好在抗生素使用前(如使用过抗生素应在申请单上注明)。 采集标本防止污染,并置于无菌容器,加盖密封、立即送检。 标本必须贴上标签,与检验申请单同时送检。 拒收标本 1.样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不符合。 2.样本以不适当的温度、运送培养基及容器运送。 3.样本的量不足、已被防腐剂固定和运送时间过长。 4.样本外漏、容器破损及明显受污染的样本。 5.样本的检验项目申请不适合进行。 6.当日重复送样本(除血液培养外)。 7.已接触空气的厌养菌检测标本。 8.被正常厌养菌污染的标本,要求检测。 血液标本的采集 适应症:疑似菌血症、败血症或脓毒血症的病人。 一般在抗生素使用前,于发热初期或高峰期采血。 24小时内采血2~3次可提高阳性率。 血液与培养基的比例为1:10,一般成人血量10~20ml,婴儿1~5ml。 呼吸道标本采集 类型:鼻咽拭子、痰和经气管采集的标本。 上呼吸道存在正常菌群,在采集标本与结果分析时应予考虑。 痰标本的采集 采集时间:晨痰,且在取痰前用清水反复漱口。 方法: (1)自然咳痰法 (2)气管镜下采集法 (3)气管穿刺法 尿标本的采集 无菌采集中段尿 如考虑厌氧菌感染,采取膀胱穿刺法采集标本。 排尿困难者考虑导尿采集标本。 粪便标本采集 自然排便,挑取脓、血或粘液部分于清洁容器中送检。 排便困难者,采用直肠拭子采集。 怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻,立即接种或将标本置于碱性蛋白胨或卡-布运送培养液送检。 传染性腹泻应连续送检3次。 生殖道标本 男性:无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。 女性:用无菌棉纤采集阴道或宫颈分泌物。怀疑厌氧菌感染,应采用阴道后穹隆穿刺法,并立即接种于厌氧平板。 疑似梅毒螺旋体感染,直接从外生殖器硬下疳蘸取渗出液,置于盖玻片上,立即送检。 脑脊液 由临床医生采用腰椎穿刺,抽取2-3ml,置于无菌容器中立即送检,不能暂时保存于冰箱中。 胸腹水等穿刺液标本 标本采集应在用药前或停止用药后1~2天进行。 用无菌注射器抽取可疑标本,分别置于抗凝与不抗凝无菌容器中立即送检。 怀疑厌氧菌感染,采用床边接种为宜。 脓液及创伤感染分泌物标本 开放性脓肿及脓性分泌物:用无菌棉纤采取脓液或病灶深部分泌物,置于无菌试管中送检。 封闭性脓肿:局部消毒后,用注射器抽取,怀疑厌氧菌感染,应隔绝空气采集。 大面积烧伤的创面分泌物:用无菌棉纤多点采取脓液或分泌物,置于无菌试管中送检。 检查方法 直接显微镜检查 病原体抗原与抗体的检测 病原体核酸的检测 病原体的分离培养与鉴定 显微镜直接涂片检测 不染色标本: 染色标本:革兰氏染色 抗酸染色 墨汁染色 病原体分离培养与鉴定 目的: 明确感染病原体。 为临床提供体外抗微生物药物敏感试验结果。 结果评价: 正常人群的无菌体液中检测到细菌,应考虑细菌为感染的病原体。 存在正常菌群的标本检测到细菌,应结合细菌的量考虑是否为致病菌。 如临床表现支持感染,但培养阴性,应考虑为标本不合格、培养不恰当等因素。 直接镜检找到病原体,而培养阴性,应考虑有L细菌、厌氧菌或苛氧菌感染 三、临床常见病原体检查 临床常见病原体为:细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次体 以及寄生虫等 不同部位感染的细菌学 血液 中枢神经系统 呼吸系统 泌尿生殖道 胃肠道 脓肿、创伤分泌物及穿刺液 眼、耳部 血液标本常见病原菌 中枢神经系统常见病原菌 脑膜炎奈瑟菌多见,其次为流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、B群溶血性链球菌、脑膜败血黄杆菌 呼吸系统 肺炎链球菌 、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、肺炎衣原体 泌尿生殖道 淋病奈瑟菌、大肠埃希菌、变形杆菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、沙门菌、铜绿假单胞菌和沙雷菌、肠球菌 胃肠道 幽门螺杆菌 、霍乱弧菌、沙门菌属的细菌、志贺菌属的细菌 脓肿、创伤分泌物及穿刺液 化脓性感染中最常见的病原菌是金黄色葡萄球菌和化脓性链球菌,创伤感染病中多由厌氧菌引起。 眼、耳部 球菌、杆菌均可
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