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实验二大鼠梗阻性黄疸模型复制、背部皮肤移植 一、实验原理:实验动物通过物理因素所致大鼠组织、器官或者全身一定的损坏,出现类似人类疾病的特征 二、实验动物:大鼠,1只/组 三、实验器材和药品 手术剪,有齿镊,无齿镊,止血钳,持针器,缝合针,缝合线,纱布、棉球,小动物解剖台, 5 ml注射器,器械盘,天平,普通负压吸引管,抗凝负压吸引管, 3%碘伏棉球,75%乙醇,苦味酸溶液,2%水合氯醛。 四、实验步骤与观察项目 1、取大鼠1只,称重、辨认性别,观察其皮肤、黏膜、尿液、粪便颜色及行为表现。 2、用2%水合氯醛腹腔注射1.5ml/100g麻醉后将其固定于小动物解剖台上,剪去上腹部被毛(脱毛剂脱毛)。 3、用3%碘伏棉球、75%乙醇常规消毒手术野皮肤,在剑突下剪1.5 cm-2 cm长的右旁正中切口,逐层打开腹腔。 4、沿胃大弯找到十二指肠并轻轻提起肠管,可见有一纤细、透亮、淡黄色的细管通向十二指肠,此即大鼠的胆总管。用细线结扎胆总管。检查手术野无出血后用缝合线十字包角连续缝合腹膜、肌层,关闭腹腔;再间断缝合皮肤,以碘酒、乙醇消毒皮肤。 5、术后用苦味酸标记大鼠,进行编号,放入笼内喂养。随时观察动物,记录其一般情况及皮肤、黏膜、尿液、粪便颜色的变化。 6、术后3d~4d观察并采集标本。 五、采集标本 1、将手术鼠取出,观察其皮肤、黏膜、粪便颜色,并和正常鼠对照。 2、用2%水合氯醛腹腔注射1.5ml/100g麻醉,待动物麻醉后将其固定于小动物解剖台上。打开腹腔,暴露腹主动脉,用普通负压吸引管和抗凝负压吸引管各采血5 ml,普通负压吸引管送至医院做谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、直接胆红素和间接胆红素定量检测,抗凝血做三分类细胞分析。 3、由膀胱取尿做尿常规。 4、处死大鼠,解剖并观察肝、胆管及其他器官颜色的变化。 5、以同样的方法将正常大鼠麻醉、固定、采血、取尿,做各项测定,并将结果与手术鼠对照。 实验三 大鼠皮肤移植 一、实验原理:皮肤移植是纯系动物遗传质量控制的基本方法之一,利用组织相容性系统来检测实验动物是否发生变异,移植的在同一近交系中可以被互相接受,移植物在不同近交系中互相排斥。 二、实验动物:大鼠 三、实验器材和药品:固定板、2%水合氯醛、医用橡皮膏、紫草油、粉剂青霉素G钠(80万U)、碘酒棉球、75%酒精棉球、眼科剪刀、眼科镊子、注射器(1mL)、4号或5号注射器针头、纱布(剪成40mm长,25mm宽若干条;厚2~3层若干块、脱脂棉做成的棉球。 四、实验操作 .1、每只动物分别编号并称取体重。 2、采用腹腔注射麻醉动物:1.5ml/100g注射2%水合氯醛 3、待动物麻醉失去知觉后,将其背部朝上放在固定板上,固定动物,剪去被毛,脱毛(应用脱毛剂脱毛时用棉球蘸脱毛剂,在所需局部涂一薄层,2-3分钟后,用温水洗去脱落的被毛,以纱布擦干局部)、并用3%碘酒棉球和75%酒精棉球消毒。 4、在背部剪下直径8~10 mm的皮肤左右或上下各一块(其中一块用做自体移植,另一块用异体移植)。 5、 将剪好的皮片翻转过来放入带少量生理盐水的双碟(直径 = 6cm)中,用眼科剪刀,轻轻地切去皮下组织至真皮,然后放在无菌生理盐水中冲一下。 6、两只动物的皮片,除左侧皮片做自体移植外,右侧皮片循环交换,逆毛方向移植并使之吻合。 7、 覆盖涂过紫草油和青霉素G钠的纱布块,3~4层,用1cm宽橡皮膏固定,松紧适度。 8、 手术结束待动物苏醒后,把动物放入鼠盒内,并挂上标记卡片,10d后拆除包扎。 五、结果观察 1、 拆包后,发现皮片干瘪、脱落则为技术失败。如皮片脱痂,手术部位平整、一周后有新毛长出则为手术成功。对照自体移植,技术失败率不得大于10%。 2、 如果皮片在2~3周内脱落,则为急性排斥。遗传污染通常引起急性排斥。 实验四 实验动物的大体解剖和主要脏器腺体识别 实验原理:实验动物的大体解剖学是借助刀、剪、锯等解剖器械,采用切割的方法,通过肉眼观察来研究动物体的形态和结构。 实验内容:大鼠的大体解剖和脏器腺体识别。 实验目的和要求:掌握大鼠大体解剖的顺序、主要脏器腺体的解剖位置与形态特征及脏器指数的计算方法。 实验材料:解剖刀、剪、针、镊子,开颅器及白瓷盘,麻醉剂;动物每组雌性、雄性大鼠各一只。 注意点:注意器械伤害学生。 实验操作: 1.将大鼠麻醉后放入白瓷盘中观察其外形 观察大鼠毛色及身体的头、颈、躯干、四肢、脚、尾、鼻、口,口中有齿及齿式,雌性和雄性生殖器。 2.剖开头骨 用剪刀小心自头骨与颈柱相接的枕骨大孔,向眼窝和前方剪开头骨,剪刀不要插入太深,并尽可能的保持硬脑膜。然后再在额前横剪,小心用镊子取下头盖骨,可分别观察硬脑膜。有血管分布的蛛网膜和脑
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