抗核抗体检测及临床意义-张瑾幻灯片.ppt

抗核抗体检测及其临床意义 宁波市李惠利医院 张瑾 风湿免疫性疾病相关自身抗体 抗核抗体谱（ANAs） 类风湿关节炎相关抗体(RF, 抗CCP等) 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） 抗自身免疫性肌炎谱 自身免疫性肝病相关抗体谱 抗磷脂抗体谱 抗核抗体谱检测的意义 有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体； 抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体； 抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体； 观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体 研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体 基本概念 ANA荧光核型 ANAs中的常见抗体 抗核抗体 自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分的抗体 ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。ANA存在一个谱。 ANA新概念：抗核酸(Nucleic acid)和核蛋白(Nucleoprotein)抗体总称 某些核抗原成分在核仁和 胞浆内比核质内更丰富 (如SSA/RO,Jo-1,rRNP等) ANA滴度的意义 结缔组织病的粗筛（1:160） 阳性标本还需进一步识别 感染、肿瘤及5%正常人可出现低滴度阳性 ANA阴性基本可以除外SLE ANA滴度与疾病活动性无明确相关性 荧光显微镜下ANA的染色型别 均质型（H） 核膜型（M) 斑点型（S） 核仁型（N） 着丝点型（ACA） 胞浆型（C） 混合型 均 质 型 (H) 抗组蛋白 抗ds/ssDNA 抗核小体 主要出现在SLE中 核　膜 　型 (M) 主要与抗dsDNA有关 　与抗原底物片固定方法和备制过程有关 　出现在SLE中　 部分与抗核包膜蛋白有关 　抗板层素 　抗gp210 出现在PBC中 　 与抗ENA成分有关 抗Sm 抗RNP 抗SS-A 抗SS-B 出现在SLE、MCTD、pSS、SSc、PM/DM等 与抗核仁蛋白有关 抗Scl-70 抗RNA多聚酶I 抗PM-Scl 出现在SSc中 与抗着丝点染色质有关 存在于有丝分裂期 出现在SSc、CREST综合征等中 胞 浆 型 (C) 与抗胞浆成分有关 抗核糖体P蛋白（rRNP）：出现在SLE中 抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ 抗信号识别颗粒（SRP) 抗线粒体：出现在PBC中 抗高尔基体 抗溶酶体 等等 ANA荧光核型小结 均质型（H）：像大饼，SLE相关 核膜型（M)： 像圈圈，SLE相关 斑点型（S）：像藕片，抗ENA 核仁型（N）：像纽扣，SD相关 着丝点型（ACA）：像满天星，抗ACA 胞浆型（C）：像空心大饼,SLE PM/DM PBC相关 混合型：稀释后检测有助于区分 抗核抗体谱（ANAs） 抗dsDNA检测方法 以短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法(IIF) ：≥1:5 短膜虫或马疫锥虫的动基体 内含有天然纯dsDNA，未经 人工处理，不含组蛋白与 ssDNA，抗原性纯一特异。 优点：特异性好 抗dsDNA检测方法 酶联免疫吸附法（ELISA）: ≥100IU/ml 优点：敏感性最高 缺点：过于敏感，同时可能检测到ssDNA抗体和低亲和力dsDNA抗体,而 这两种致病力均不强 放射免疫法(Farr): ≥20% 优点：对高亲和度DNA抗体的检测优于CL-IIF 缺点：具有放射性，对技术人员身体造成一定影响 蛋白印迹法（WB） 缺点： dsDNA抗原在纯化包备过程中可变性解链，变成ssDNA,导致假阳性结果 不同方法检测SLE患者抗dsDNA抗体的结果：　　　　everything is possible 至少用两种方法做（报告结果时注明方法学）,互为补充。如：IIF法+ ELISA法 抗dsDNA抗体临床意义 SLE 的血清特异性抗体 多有致病性（IgG型），与亲和力（高）有关 与LN与SLE疾病活动性相关，活动期达90％ 可用于SLE 疾病活动期判断＆药物疗效观察 与SLE急性皮疹、血管炎、浆膜腔炎、白细胞减少等有关 抗组蛋白抗体（AHA）（酶联免疫吸附法?X?2SD) 可出现于多种结缔组织病，不具有诊断特异性 SLE ：50% 活动期SLE 可达90.2% 与LN相关，与SLE疾病活动性存在一定意义的相关性 药物性狼疮（DIL）：90% 如：异烟肼、苯妥因钠、青霉胺、雌激素等 仅有AHA而无其他ANA，强烈支持DIL 其他结缔组织病：23-30% 如