什么是好的分析方法.ppt

什么是好的分析方法？ 评价一种方法的好坏，没有唯一的标准，需要具体情况具体分析。 接下来我将介绍几种定量分析的评价指标。 然后通过举例，来比较方法的好与不好。 标准曲线—普遍使用方法 定量分析普遍使用的方法是标准曲线法。标准曲线是被测物质的浓度或含量与仪器响应信号的关系曲线。 标准曲线的直线部分所对应的被测物质浓度（或含量）的范围称为该方法的线性范围。选择的分析方法应有较宽的线性范围。 相关系数r是用来表征被测物质浓度（或含量）x与其响应信号值y之间线性关系好坏程度的一个统计参数。r值在+1.0000与-1.0000之间。 当｜r｜等于1时，y与x存在严格的线性关系。 当0｜r｜1时，y与x之间有一定的线性关系。 ｜r｜越接近1，则y与x之间的线性关系越好。 灵敏度—一般不用 物质单位浓度或者单位质量的变化引起响应信号值变化的程度，成为该法的灵敏度。 灵敏度也就是标准曲线的斜率。斜率越大，方法的灵敏度越高。 但是许多方法的灵敏度随实验条件而变化。所以一般不用灵敏度作为方法的评价指标。 精密度—一个好的方法应该有比较好的精密度 精密度：是指使用同一方法，对同一试样进行多次测定结果的一致程度。是测量中随机误差的量度。 重复性：同一分析人员在同一条件下测定结果的精密度又称为重复性。 再现性：不同实验室所得测定结果的精密度又称为再现性。 精密度常用结果的标准偏差s或者相对标准偏差（sr）量度。 准确度—决定分析结果的可靠程度 试样含量的测定值与试样含量的真实值（或标准值）相符合的程度称为准确度。 常用相对误差Er量度。 准确度是分析过程中系统误差和随机误差的综合反映，它决定着分析结果的可靠程度。方法有较好的精密度并且消除了系统误差后，才有较好的准确度。 准确度与精密度关系 检出限—评价分析方法及仪器性能的主要技术指标 检出限： 是指某一特定分析方法,在给定的显著性水平内,可以定性地从样品中检出待测物质的最小浓度或最小量。所谓“检出”是指定性检出, 在检出限附近不能进行准确的定量。检出限可分为测量方法检出限和仪器检出限。 仪器检出限：指分析仪器能够检测的被分析物的最低量或最低浓度。 方法检出限：方法检出限不仅与仪器的噪音有关，还取决于样品测定的整个环节，如取样量，提取分离以及测定条件的优化等，实际工作中应注明具体实验条件。 仪器检出限不考虑任何样品制备步骤的影响,一般以溶剂空白测定检出限,因此其值总是比方法检出限低。 XL：最小信号 ：空白信号的平均值 S ：方法的灵敏度 sb ：空白信号的标准偏差 方法的灵敏度越好，精密度越好，检出限就越低。 检出限主要取决于3个方面: ①分析方法的选择性和专一性； ②分析方法的灵敏度； ③分析方法的精密度。 其它指标 评价一个分析方法，还有一些其它的指标，如选择性、分析效率、多组分同时或连续测定的能力、操作的难易程度、设备及维持费用的高低等。 例：测定蛋白质的方法 方法 灵敏度 时间 干扰物 双缩脲法 1mg 20-30min 硫酸铵、Tris缓冲液、某些氨基酸 Bradford法 1μg 5-15 min 强碱性缓冲液 紫外吸收法 50-100μg 5-10 min 各种嘌呤和嘧啶，各种核苷酸 Lowry法 5μg 40-60 min 硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、各种硫醇 凯氏定氮法 0.2-1.0mg 8-10h 非蛋白氮 分析： 凯氏定氮法通过测定氮的量间接测定蛋白质。非法掺杂物，例如三聚氰胺，增加氮的比例从而伪增加蛋白质浓度。 研究人员的工作致力于高度专一，快速，灵敏，简单，并且操作简便。 没有单一的方法能得到精确的量，正如每种方法都有自己的优势和缺陷。 例：测定蛋白质的方法 回收率 准确度系指用回收率测定的结果与真实值或认可的参考值之间接近的程度 。一定的准确度为定量测定的必要条件。因此涉及到定量测定的检测项目均需要验证准确度。 在一些方法中，也会借助回收率在说明实验方法的准确性。 分析：将预测所得天麻素浓度扣除对应的中药天麻空白样中所 含天麻素的浓度，得到天麻素回收浓度，据此计算天麻素的回收率，回收率列于表中。平均回收率为104.6%。 例：中药天麻中天麻素的回收率