【十八】小型种猪场伪狂犬病净化今日畜牧兽医.doc

农户小型种猪场伪狂犬病净化一例 党晓鹏 （陕西金冠牧业有限公司，西安，710018） 宁明正（陕西省蒲城县龙阳畜牧兽医站，蒲城，715507） 摘 要：某农户小型种猪场疑似感染伪狂犬病病毒，为了检测出野毒感染猪，净化伪狂犬病，提高猪群健康水平，采用PRV gE抗体ELISA检测试剂盒，对该场免疫了猪伪狂犬病基因缺失疫苗的猪群进行5次 野毒感染检测；同时应用实时荧光PCR检测试剂盒，对有临床症状的新生仔猪进行PRV病原检测。经过连续监测、综合防控并适时淘汰，该猪场的PRV野毒感染率降为1.72%，发病仔猪伪狂犬病毒野毒阳性率均降为零。猪场新生仔猪成活率提高，猪群基本无PRV感染，净化效果良好。 关键词：伪狂犬病毒 检测 净化 猪伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病病(Pseudorabies virus，PRV)引起的一种急性传染病[1]，我国将其列为二类传染病。近年来，猪伪狂犬病在我省流行范围较广，特别是农户散养猪场和小规模种猪场，野毒感染率较高。该病对种猪的危害主要是侵害繁殖系统，导致猪群繁殖力下降，产死胎、木乃伊数量增加，新生仔猪成活率下降[2]。 农户小型种猪场（基础母猪100头左右）在猪病净化方面难度较大，猪场卫生隔离消毒防疫等设施较差，种猪来源复杂多样，猪瘟（HC）、猪2型圆环病毒（PCV2）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪传染性胸膜肺炎（APP）、副猪嗜血杆菌病（HPS）等混合感染普遍，感染猪及带毒猪淘汰措施难以执行等。但针对猪伪狂犬病的净化条件目前已基本具备，一是有商品化基因缺失疫苗免疫接种，二是有可区分疫苗免疫抗体与野毒感染抗体的PRV gE抗体ELISA试剂盒和检测PRV病原的实时荧光PCR检测试剂盒，在此基础上结合消毒隔离等生物安全措施，逐步淘汰阳性感染猪，引入阴性种猪，在2-3年的时间里完全可以将猪伪狂犬病彻底净化。国内许多大型规模化种猪场已经按照此方案对伪狂犬病成功进行净化，消灭了伪狂犬病野毒感染[3]。本试验用伪狂犬病病毒 gE抗体ELISA检测试剂盒，对本省蒲城县一农户小型种猪场的伪狂犬病野毒感染情况进行连续抽样监测，同时应用实时荧光PCR检测试剂盒，对表现有临场症状的乳仔猪进行实时荧光PRV病原检测。然后根据抗体和病原检测结果制定切实可行的净化方案。 通过科学严格的疫苗接种，连续对猪群进行5次抽样检测，包括PRV gE抗体和疑似病仔猪病原检测，严格隔离饲养抗体阳性猪，并实时逐步淘汰处理。该猪场的伪狂犬病野毒感染率由最初的45.45％逐步降低至1.72％，发病仔猪伪狂犬病野毒阳性率由48.28％降至0%，基本达到净化猪群伪狂犬病的目标。 1材料与方法 1．1 试验材料 陕西蒲城某种猪场。存栏种公猪7头，能繁母猪135头。年出售商品仔猪近2000头。将猪群分组：哺乳仔猪、保育猪、中大猪、后备母猪、空怀母猪、妊娠母猪及种公猪。种公猪逐只采样，其它每组分别抽样20%。 1．2猪群接种疫苗 猪场伪狂犬病免疫接种采用猪基因缺失弱毒疫苗。 1．3检测试剂盒 伪狂犬病gE缺失ELISA诊断试剂盒，购自武汉科前公司；猪伪狂犬病病毒(gE基因)实时荧光PCR检测试剂盒，购自北京世纪元亨公司。 1．4 血样采集时间 猪伪狂犬病病毒 gE抗体检测在2014年的3月、6月、9月、12月和2015年3月各采集血样1 次，按照猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒说明书要求检测 PRV野毒感染抗体效价。 检测结果判定：在酶标仪上测各孔OD630nm值。试验成立条件是阴性对照孔平均OD630nm值与阳性对照孔平均OD630nm值之差≥0.4. S=样品孔OD630nm值，N=阴性对照孔平均OD630nm值。 若S/N比值≤0.6,样品判为PRV抗体阳性。 若S/N比值≤0.7但0.6,该样品必须重测，如果结果相同，则过一段时间后重新采集血样进行检测。 若S/N比值0.7,样品判为PRV抗体阴性。 1.5 猪伪狂犬病病毒实时荧光PCR检测 对有临床症状的仔猪采集淋巴结组织，处理后进行病原检测，操作方法按照试剂盒生产厂家说明书操作。 检测结果判定：被检组织样品Ct 值≤30并出现特定的扩增曲线为猪伪狂犬病病毒野毒阳性， 被检样品30Ct37并出现特定的扩增曲线，需要重新取样提取DNA，扩增后进行结果判定，如仍为可疑，则判定为阳性；被检样品Ct值37时，判定为阴性；对于某些未呈现特定的扩增曲线，但本底值较高的样品，判为阴性。 1．6免疫程序 2014年3月以来，选用猪伪狂犬病基因缺失弱毒疫苗进行全群免疫。新生仔猪3日龄滴鼻免疫，然后在8周龄时再肌注加强免疫1次；种公猪及后备