不同产地及不同采收期五味子中木脂素含量比较.docVIP

不同产地及不同采收期五味子中木脂素含量比较 　　[摘要]目的 通过测定不同产地及不同采收期五味子中木脂素的含量，为明确五味子的适宜产地及适宜采收时间提供依据。方法 采用Ecosil Cts-AQ色谱柱（250ram×4.6mm，5μm），乙腈-水为流动相，进行梯度洗脱，流速1mL/min，检测波长为217nm。结果 不同产地五味子中木脂素含量差异明显，辽宁东部山区（丹东、本溪）所产五味子中混合木脂素含量较高，含量在0.9658%～1.1232%之间；不同采收期五味子中木脂素含量差异不大。结论辽宁东部山区（丹东、本溪）适合五味子栽培，九月份是五味子的适宜采收期。 　　[关键词]五味子；HPLC；木脂素；不同产地；不同采收期 　　[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]2095-0616（2016）11-38-04 　　五味子是木兰科植物五味子Sehisandrachinensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果实。五味子是辽宁省的主产药材，有辽五味之称。如果通过研究，能够科学规范引导五味子种植，确定五味子的适宜采收期、适宜种植区域将大大提高五味子质量，将为辽宁药都（本溪）注入新的活力。 　　五味子中含有木脂素、挥发油、多糖及有机酸等成分，我们对不同产地、不同采收期的五味子进行全成分研究，以期从化学成分角度为五味子的适宜采收期、适宜种植区域的确定提供依据。木脂素类成分为五味子中主要活性成分，本文是对不同产地、不同采收期五味子中木脂素含量的比较研究。 　　1仪器与试药 　　1.1实验仪器 　　Waters高效液相色谱仪（Waters e2695 pump、Waters2998检测器，Empower3数字处理软件）；KQ-250DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；电热恒温水浴锅（北京市永光明医疗器械有限公司）；AE240型十万分之一分析天平（瑞士METTLER）；FA1004B电子天平（上海精密科学仪器有限公司）。 　　1.2实验药材 　　五味子由辽宁中医药大学王冰教授鉴定。 　　1.3实验试剂 　　五味子醇甲（1106-101018），五味子醇乙（1327-091027），五味子酯甲（1330-110116），五味子甲素（0764-200006），五味子乙素（110765-200205）均购自中国药品生物制品检定研究院；五味子丙素（A0593）购于成都曼思特生物科技有限公司。甲醇、乙腈为色谱纯，娃哈哈纯净水。 　　2方法与结果 　　2.1色谱条件 　　Ecosil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈（A）-水（B），梯度洗脱（0-20min，55%A；20～25min，55%～75%A：25～40min，75%～65%A：40～45min，65%～55%A）；检测波长217nm；流速1mL/min；进样量10μL；柱温30℃。色谱图见图1。 　　2.2对照品溶液制备 　　精密称取五味子醇甲、醇乙、甲素、酯甲、乙素、丙素对照品适量，置5mL容量瓶中，配制成浓度分别为0.076、0.046、0.01552、0.03528、0.05504、0.02272mg/mL的五味子混合对照品溶液，4℃冰箱中保存，备用。 　　2.3供试品溶液制备 　　取五味子粉末（过60目筛）约0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20mL，密塞，称重，超声30min，用甲醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，经0.45μm微孔滤膜滤过，即得。 　　2.4线性关系考察 　　精密吸取上述混合对照品，分别进样1、5、10、15、20μL，依上述色谱条件进行测定，以进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程见表1。 　　2.5精密度试验 　　精密吸取混合木脂素对照品溶液10μL，连续进样6次，测定峰面积，五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素、丙素的RSD分别为0.64%、1.48%、0.55%、0.90%、0.90%、1.39%，均小于3%，表明仪器性能良好。 　　2.6稳定性试验 　　精密吸取同一五味子供试品溶液10μL，分别在0、2、4、6、8、10h进样测定，结果五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素、丙素6种木脂素峰面积的RSD分别为0.51%、1.50%、2.14%、2.52%、1.32%、1.62%，表明供试品在10h内保持稳定。 　　2.7重复性试验 　　精密称取同一五味子粉末6份，各0.25g，按“2.3”项下制备供试品溶液，依本实验方法测定并计算含量，结果五味子醇甲、醇乙、酯甲、甲素、乙素、丙素6种木脂素的含量的RSD分别为1.22%、2.03%、2.81%、1.56%、2.15%、2.34%，表明方法重复性良