HC2产品基本知识介绍.pptx

digene HC2 HPV检测临床应用及其优势介绍WH市场部 利用基因杂交、化学发光、信号放大的原理在分子水平同时检测被WHO确认的13种高危型-HPV 病毒DNA96test/kit( 88病人标本/盒）Hybrid Capture? 2（HC2 ）--杂交捕获二代HC2 HPV检测流程：样本收集：样本类型及采样注意事项样本处理过程检测步骤HC2 HPV检测 采样器用于HPV检测的最常见的样本 是:The hc2 DNA Collection Device采样器?采集的STM标本The ThinPrep? 样本 (Hologic)新鲜宫颈活检标本（截面为2-5mm的宫颈活检组织）插入宫颈口1-1.5cm，直到刷子最外圈接触到外宫颈逆时针方向,旋转三圈,停留十秒HC2 HPV检测宫颈取样将刷子底部放到转移管中，在划线处折断杆子，将整个刷子留在转移管中 HPV标本的保存 1、室温下：保存2周 2、 2-8℃：再保存1周 3、 -20℃：保存3个月或更长HC2 HPV检测宫颈取样标本保存使用专用的DIGENE HPV采样器（含试剂，可抑制细菌生长，保持DNA完整性） 注：切勿将小刷子扔掉，以保留足量标本采样前三天内不要阴道内用药或冲洗，避免经期采样采样前不要进行醋酸/碘液涂抹开盖、折断小刷子时勿大力震荡试管，以免试剂溅出影响检测或标本溅出造成污染少量血液不影响检测结果在试管壁上标明患者名称和年龄盖紧瓶盖标本保存注意事项HC2 HPV检测流程：样本收集：样本类型及采样注意事项样本处理过程检测步骤The ThinPrep 细胞保存液 hc2 DNA Collection Device采样器细胞溶解: 只保留DNA保留细胞不同类型的样本不同类型的样本处理Thinprep 样本在进行 hc2检测前进行转换样本转换试剂盒PreservCyt （即Thinprep样本）的转换流程Step 1Step 2Step 3Step 4Step 5加盖和漩涡混合取出上清液摇动 / 漩涡混合 10 sec.取出 4 mL加入 400uL 转换缓冲液离心 15 minStep 10Step 9Step 8Step 7Step 6CCU取出残余液态65° 水浴 15 min.漩涡混合15-30 sec.在水浴 30 min.加盖漩涡混合 30 sec150 uL 变性液漩涡混合 5 sec.去盖，取75 uL 加入微孔板Step 1Step 2Step 3500uL混有指示剂的变性剂加入样本加盖和漩涡混合 (MST)65° 水浴 45 min.漩涡混合 5 sec用Digene自己的采样标本，可直接进行检测! HC2 HPV检测流程：样本收集：样本类型及采样注意事项样本处理过程检测步骤HC2 技术的检测步骤Hc2检测方法分为简单的5部变性溶解细胞，释放DNA单链杂交全长病毒 RNA探针与病毒靶DNA结合捕获DNA:RNA 复合物被包被在微孔板上的抗体捕获 一抗特异性结合DNA:RNA 复合物 杂交检测用二抗结合捕获后的复合物二抗偶联有碱性磷酸酶发光信号产生 加入碱性磷酸酶的底物 产生化学发光信号Capture and detect hybridsLuminescenceDenature specimenHybridize with RNA probeHC2 HPV检测步骤-----简单的5步Step 1:变性溶解细胞，解链和变性核酸, 释放HPV DNA单链Step 4:杂交检测用二抗结合捕获后的复合物二抗偶联有碱性磷酸酶二抗Step 2:杂交全长病毒 RNA探针与HPV病毒靶DNA结合，形成RNA:DNA 复合物偶联的碱性磷酸酶Step 5:产生发光信号加入碱性磷酸酶的底物 产生化学发光信号，仪器判读发光信号Step 3:捕获RNA:DNA 复合物被包被在微孔板上的抗体捕获 一抗特异性结RNA:DNA 复合物 Now I’ll show the technology platform for the Hybrid Capture? System. The technology is a nucleic acid hybridization assay with signal amplification that utilizes chemiluminescent microplate detection. Opening slide for Pre-analytical discussions