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日程安排 第一天上午 (8:00-12:00) 理论讲授 操作示教 取材、铺片、固定 第一天下午 (2:00-6:00) 脱水、透明 HE染色 醛复红-伊红染色 第二天上午 (8:00-10:00) 理论讲授 PAS 第二天上午 (10:00-12:00) 石蜡切片 浸蜡、包埋 14/9上午实验流程 分组:4人/组,自由组合。 领取实验器具:选举负责人签名领取,并清点。 取材 实验对象:2人一只小白鼠 动物处死:颈椎脱臼法 取材内容:两种脏器(心,肝,脾,肾)和皮下组织 取材要求:组织块小,形状规则。 固定: 4%甲醛。 修块:固定20min后,修出包埋面。 铺片:每人铺一张玻片。 取皮下组织铺片 → 自然风干 → 4%甲醛酒精固定5min → 自来水洗 →自然风干 脱水透明 70% 酒精 30min 80% 酒精 30min 95% 酒精 20min 95% 酒精 20min 100%酒精 20min 100%酒精 20min 苯甲酸甲脂 过夜 HE染色(1) 二甲苯 10min 二甲苯 10min; 100%酒精 2min 100%酒精 2min 95% 酒精 2min; 80% 酒精 2min; 70%酒精 2min; 自来水洗 ----- 伊红-醛复红染色(铺片) 水洗 2min 醛复红染液 40min 100%酒精稍洗2次,镜检 伊红 10秒 100%酒精稍洗2次 二甲苯 10min两次 → 封片 HE染色(2) 苏木精 5min 自来水洗 ----- 盐酸酒精分色:1秒 自来水 -----;镜检 饱和碳酸锂 2min 自来水洗 ----- 伊红 1 min HE染色(3) 95%酒精 2min 95%酒精 2min 100%酒精 2min 100%酒精 2min 二甲苯 2min 二甲苯 2min 中性树胶封固 PAS染色方法 组织切片,脱蜡入水; 过碘酸氧化液15min; 蒸馏水洗3次; Schiff氏试剂20min; 流水冲洗变红; 上行梯度酒精脱水; 二甲苯透明; 中性树胶封固; 镜下观察 。 评分内容 铺片技术及染色,封片 HE染色,封片 PAS染色,封片 包埋块
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