流动注射化学发光测定铬的含量.ppt

流动注射化学发光测定Cr3+含量 实验目的 1、掌握化学发光流动注射测定Cr3+含量的基本原理。 2、了解流动注射化学发光仪的基本构造和原理，并能简单的操作。 实验原理 流动注射分析（Flow Injection Analysis,FIA）是1974年由丹麦科学家Ruzicka 和Hansen首次提出，并迅速发展起来的溶液自动在线处理及测定的现代分析技术。流动注射分析是基于把一定体积的液体试样注射到一个运动着的，无空气间隔的、由适当液体组成的连续载流中，被注入的试样形成一个带，然后被载流带到检测器中，连续地记录其光强，并以峰高来进行定量分析。因此，流动注射分析是在物理和化学非平衡的动态下进行测定的一种分析方法。 化学发光(简称CL) 的机理是反应体系中某种物质（反应物、产物、中间体）的分子的外层电子吸收了反应所释放的能量而由基态跃迁至激发态，然后再从激发态返回到基态，同时将能量以光辐射的形式释放出来，产生化学发光，利用反应物的浓度与化学发光强度成正比，对反应物进行定量分析。对某些极弱的发光反应，当加入某些痕量金属离子后，往往对化学发光反应产生催化作用，使反应速度加快，从而发出较强的光，且发光强度的增加与所加入的痕量金属离子的浓度成正比，这就拓宽了化学发光的应用范围。 Luminol（鲁米诺）为3－氨基苯二甲酸肼，又名发光氨，在碱性溶液中，与H2O2作用，氧化过程中产生的化学能量被产物氨基邻苯二甲酸根离子所吸收，使其处于激发状态。当其价电子从第一电子激发态的最低振动能级跃回到基态中各个不同振动能级时，便产生最大发射波长为425nm的光辐射。 鲁米诺与H2O2的反应，可以被一些痕量的过渡金属离子所催化，使发出的光大大增强，据此可以测定Co2+、Cu2+、Cr3+ 、 Fe3+、Fe2+ 、Ag+ 、Au3+ 、Mn2+ 等金属离子。 本实验利用Cr3+催化鲁米诺与H2O2的反应，使反应速度加快，发光增强，且发光强度的增加与所加入的Cr3+浓度成正比，因此在保持H2O2浓度不变时，可以利用标准曲线法测定Cr3+含量。 流动注射化学发光法（FIA-CL）是流动注射进样技术与化学发光定量分析相结合而建立起来的一种有效痕量的分析技术，具有设备简单、高效率、低消耗、灵敏度高、线性范围宽、快速、易于自动化的特点，在痕量超痕量金属元素的分析测定方面具有重要意义。 a、b经过蠕动泵流动注射进入混合器混合，一定量的样品c经过蠕动泵流动注射与混合好的a、b在进样阀(换向阀)V内混合，然后进入流通池C，在C里产生化学反应，放出特定波长的光，样品a可参与化学发光反应，样品a的浓度和发光反应的强度存在线形关系，测定光的强度，就可分析样品a的含量。 仪器与试剂 2、鲁米诺储备液0.005 mol/L ： 称取0.4447g Luminol，用0.1mol/L的NaOH溶液配成500mL ； 鲁米诺2.55x10-4mol/L :取储备液12.5mL，配成500mL。 3、H2O2标准溶液0.1mol/L：取1mL 30%的H2O2用二次蒸馏水配成100 mL，用时现配。 4、配1g/L的Cr(NO3)3储备液：称取Cr(NO3)3.9H2O 7.6923g配成500mL。 1、在4只50ml容量瓶中，分别加入0.20、0.40、0.60、0.80 mL铬标准溶液（1g/L），用水稀释到刻度，即0.004、0.008、0.012、0.016 g/L。另取0.50 mL铬待测溶液，配成50mL。 2、开启仪器并预热（约30min），开电脑，运行流动注射化学发光系统软件。 3、参数设定：点击界面最上端“样品测量”按钮，这时会弹出两个选择栏：“建立新参数”和“打开参数文件”这一栏。可进行新建或打开已有测定参数。 4、管线清洗：将三根进样管插入二次蒸馏水中，点击测量按钮，让仪器进行自动清洗。清洗完毕后，把管道中残余的二次蒸馏水放空。 5、谱图横纵坐标的设定：在样品测量界面的最上端点击“测量、暂停、停止”按钮之后的按钮对谱图的横纵坐标进行设定。“X、Y”轴根据测量所需进行设定，也可设定为“自动量程” 。设定完毕后，确定。 6、将管线入口放入试剂，选谱测量类型。 7、点击测量按钮开始进行检测，检测与停止时间可根据实际情况而决定。 8、谱图保存：样品测量完毕后，点击界面最下端处理谱图按钮。此时出现的是处理谱图界面，然后点击此界面的最上端保存谱图按钮，当前谱图进行保存。 * * 在一定的浓度范围内化学发光的强度与H2O2的浓度成正比，因此可以利用标准曲线法测定H2O2含量。 鲁米诺主要用于现代刑侦的血液检测。在要调查的区域内喷洒鲁米诺和激发剂溶液，血