第15章骨代谢异常的生物化学诊断全解.ppt

四、性激素 包括雌激素和雄激素，对处于生长阶段的个体骨骼发育和成熟十分重要。 雌激素对1,25-(OH)2D3的合成、降钙素和PTH分泌均有重要的调节作用。 雄性激素能促进蛋白质和骨基质的合成，促进肌肉和骨骼生长。 国内外报道中老年人骨矿物质丢失速度与血清性激素含量呈负相关。 一、骨代谢调节激素的测定 （一）甲状旁腺素的测定 1. 测定方法概述 存在形式：PTH-N、PTH-C和PTH-M 测定形式：PTH-C、PTH-M和完整PTH 主要方法： RIA、IRMA、ELISA、ICMA等 国外采用IRMA法和ICMA法测定完整的PTH分子 国内应用最普遍的是RIA法 　IRMA：免疫放射法 　ICMA：免疫化学发光法 2. RIA法测定PTH 测定对象：PTH-M和PTH-C 方法类型：竞争性RIA法 125I 标记PTH-M和PTH-C 125I标记的PTH-M和PTH-C与病人样本中的PTH- M和PTH-C竞争抗体结合位点。 （二）维生素D的测定 1. 测定方法概述 25-(OH)D3是反映机体维生素D营养状态的理想指标 1,25-(OH)2D3更适合用受体结合法进行分析 25-(OH)D3的测定方法：RIA-CPB和HPLC等 1,25-(OH)2D3的测定方法：RIA、RRA、生物学方法等 以RRA和RIA最为普遍 RIA-CPB：放免－竞争性蛋白结合法 RRA：放射受体法 2. 25-(OH)D3的测定 目前主要采用RIA法 佝偻病大鼠血清中维生素D结合蛋白为特异性的结合物 基本流程：①有机溶剂提取血清 ②与放射性标记物竞争与维生素D结合蛋白结合 ③反应平衡后分离游离型和结合型标记物 ④液闪计数、计算浓度 评价： ①方法简便，结合蛋白较稳定 ②测定前都需要对25-(OH)D3提取纯化 3. 1,25-(OH)2D3的测定 （1）RRA 采用维生素D缺乏或正常的鸡肠道维生素D受体 采用Sep-Pak色谱柱代替高效液相色谱的纯化步骤 （2）RIA 采用佝偻病大鼠血清中维生素D结合蛋白作为特异性的结合物，比受体更稳定，更方便 （三）降钙素的测定 1. 生物分析法：降血钙效应分析 2. 放射免疫分析法：样品CT、放射性标记CT竞争性地与CT特异性抗体结合 3. 夹心放射免疫分析：快速、灵敏、特异 二、骨形成标志物的测定 （一）骨钙素（osteocalcin, OC）的测定 又称骨γ-羧基谷氨酸蛋白（BGP） 由成骨细胞合成和分泌的一种活性多肽 主要生理功能是维持骨的正常矿化速率 血骨钙素是反映骨代谢状态的一个特异和灵敏的生化指标 测定BGP的方法应用最多的是放射免疫法和酶联免疫法 （二）骨性碱性磷酸酶（B-ALP）测定 ALP是在碱性条件下催化磷酸酯水解的酶类 B-ALP来自成骨细胞，是骨形成的特异性标志物 血清B-ALP测定方法： 总体分为电泳法和非电泳法 应用较多的方法是放射免疫法 HPLC是目前B-ALP测定分辨率最高的方法 B-ALP增高常见于：①甲状腺、甲状旁腺功能亢进 ②恶性肿瘤骨转移 ③佝偻病、骨软化病 ④骨折和绝经后骨质疏松症等 B-ALP测定意义： ①骨病早期诊断骨病 ②疗效的评价和预后的判断 ③骨转移癌的病程和治疗效果的监测 Ⅰ型胶原前肽是胶原的延伸段 多检测Ⅰ型前胶原羧基前肽(PICP)来评价骨形成 PICP的检测大多采用RIA和电化学发光免疫分析（ECL） 血清中Ⅰ型胶原前肽水平在一定范围内是反映成骨细胞活动和骨形成以及反映Ⅰ型胶原合成速率的特异指标 （三）Ⅰ型胶原前肽测定 三、骨吸收标志物的测定 HOP是体内胶原代谢的终产物之一 尿HOP排出量可以反映骨吸收和骨转换程度 尿HOP增高见于：儿童生长期、甲状旁腺功能亢进 骨转移癌、慢性肾功能不全