第5章 致病菌的检验6——革兰氏阴性微需氧和厌氧菌.ppt

第12章 革兰氏阴性微需氧和厌氧菌 本属菌共包括8个属和1个科：1、弯曲杆菌属，2、水螺菌属，3、螺菌属，4、固氮螺菌属，5、海洋螺菌属，6、蛭弧菌属，7、吸血弧菌属，8、螺杆菌属，以及拟杆菌科。 在医学检疫上有意义的是弯曲杆菌和螺杆菌属。 第1节 弯曲杆菌属 Campylobacter 一类呈逗点状或S形的革兰氏阴性杆菌，广泛分布于动物界，其中有些可引起动物和人类腹泻、胃肠炎和肠道外感染。 目前弯曲菌属有18个种（含亚种），对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌的胎儿亚种，前者引起人类急性腹泻，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等，其次是胎儿弯曲菌和大肠弯曲菌等。 1983年分离的幽门弯曲菌则与慢性胃炎和胃溃疡、十二指肠溃疡有关。 兽医临床上常见的有五个种（含亚种）：空肠弯曲杆菌、胎儿弯曲杆菌（胎儿亚种和性病亚种）、小肠弯曲杆菌、幽门弯曲菌。其中以空肠弯杆菌最多见，胎儿亚种次之。 弯曲杆菌属 一、形态与染色 1、0.2-0.4×1.5-3.0μm； G-, 呈弧形、S形或海鸥展翅状，不易着色； 2、无芽孢，一端或两端各有一根鞭毛，运动活泼，形态似霍乱弧菌； 3、从微需氧到厌氧，CO2有利于其生长。 二 培养特性 微需氧，最适生长环境: 氧气5％、二氧化碳10％、氮气85％；通常42℃初分离空肠弯和大肠弯曲菌，其他菌株37℃生长良好。 营养要求高，普通培养基不生长，常用含头孢哌酮的选择性培养基，以抑制肠道正常菌群。含血的Skirrow培养基、头孢哌酮-万古霉素-两性霉素琼脂培养基（CVA）和不含血的碳-头孢哌酮-去氧胆酸盐（CCDA）、碳基选择性培养基（CSM）和半固体动力培养基等常用于分离该属的细菌。 三 生化特性 氧化酶和触酶阳性，可还原硝酸盐，不分解、不发酵各种糖类，不分解尿素。 四 抵抗力 本属细菌抵抗力弱，对一般消毒剂敏感，但耐寒，在4℃冰箱或水中可存活4周。 本菌具有粘附定居和入侵上皮细胞的能力，通过产生的肠毒素、细胞毒素和内毒素等多种毒力因子致病，病变部位通常在空肠和回肠，也可蔓延至结肠。 五 毒力 六 致病性 　　可引起人畜急性传染病——弯曲杆菌病。 1、带菌者：动物和人类，经肠道或生殖道排出； 2、感染：经口(污染的食物或水)；经产道感染婴儿； 3、临床症状：潜伏期1-10d，一般3-5d。 （1）肠炎：腹泻、腹痛、呕吐及发热等，初为水样，继而转为粘液便，少数呈脓血便。 （2）肠道外感染：可致菌血症、心内膜炎、脑脊髓膜炎、血栓性静脉炎、关节炎、肺脓肿和腹膜炎等。 （3）母畜感染：上呼吸道症状、肺炎、发热及菌血症；死胎或流产；新生畜败血症及脑脊髓膜炎。 七 微生物学检查 1. 标本采集 采集粪便及剩余食物，立即送检，或将标本接种于卡-布运送培养基中送检； 对于高烧和脑膜炎者，于用药前抽取静脉血或脑脊液，注入布氏肉汤送检。 2. 细菌检验 （1）显微镜检查 ①悬滴法动力检查：显微镜下观察有无螺旋状或投标样运动，脑脊液标本经离心沉淀后再制成悬滴标本检查； ②染色标本检查：取新鲜粪便或脑脊液离心沉淀物涂片、革兰氏染色，找革兰氏阴性、弯曲呈S状或螺旋状杆菌，鞭毛染色见一端或两端单根鞭毛； （2）分离培养 将标本直接接种于选择性培养基上，也可将标本过滤后培养，弯曲菌形成的菌落为灰色、扁平、表面湿润、圆形凸起、边缘不规则，常沿穿刺线蔓延生长，血平板不溶血，布氏肉汤中呈均匀混浊。 3. 细菌鉴定 弯曲菌属的鉴定较复杂，必须综合多种试验确定。通常氧化酶阳性、革兰染色阴性、弯曲呈S形或螺旋形，进一步鉴定试验： ①马尿酸盐水解试验：鉴别空肠弯曲菌空肠亚种和多氏亚种的重要试验；前者阳性，后者阴性。 ②醋酸吲哚水解试验：空肠弯曲菌为阳性而胎儿弯曲菌为阴性。 ③萘啶酸、头孢噻吩耐药试验： 空肠弯曲菌和大肠弯曲菌对萘啶酸敏感，对头孢噻吩耐药； 胎儿弯曲菌对萘啶酸耐药而对头孢噻吩敏感。 近来出现了对萘啶酸耐药的空肠弯曲菌，应结合醋酸吲哚水解试验进行鉴定。 八、治疗 弯曲菌感染大多呈轻症和自限性，一般不需特异性治疗。体外试验显示，头孢菌素和青霉素耐药，环丙沙星治疗弯曲菌感染对绝大多数弯曲菌非常有效，但近年出现了不少耐药菌株。 空肠弯曲菌通常对红霉素敏感，耐药率小于5％；而80％以上的大肠弯曲菌对红霉素耐药。胎儿弯曲菌引起的全身感染可用红霉素、氨苄西林、氨基糖苷类和氯霉素治疗。 第2节 螺杆菌属 Helicobacter 螺杆菌属（Hilicobacter）是一群氧化酶和触酶阳性、微需氧、37℃生长、25℃和42℃均生长不良的革兰阴性弯曲菌。 本属细菌最早根据形态染色、培养条件等归