第5章 致病菌的检验7——革兰氏阳性无芽孢杆菌.ppt

第13章 革兰氏阳性无芽孢杆菌 李氏杆菌属 丹毒丝菌属 第1节 李氏杆菌属（Listeria） 最初，李氏杆菌属仅有产单核细胞李氏杆菌一个种，之后相继确认了伊氏李氏杆菌(L.ivanovii)、无害李氏杆菌(L.innocua)、威斯梅尔氏李氏杆菌(L.Welshimeri)和西里杰氏李氏杆菌(L.seeligeri)等5个种。该属代表种是产单核细胞李氏杆菌(L. monocytogenes)，引致人和动物的李氏杆菌病。 期间曾将默氏李氏杆菌(L.murrayi)和格氏李氏杆菌(L.grayi)也划到本属中，但后来的研究结果表明它们是一个独立的特殊属——默里亚属(Murraya) 。 李氏杆菌属（Listeria） 一、形态与染色 短杆状 , 革兰氏染色阳性。不形成荚膜、无芽胞，有鞭毛，20-25℃培养可产生4根周鞭毛，37℃至少可产生1根鞭毛。R型菌多为长丝状。 R型 产单核细胞李氏杆菌 　1、兼性厌氧，营养不高；对食盐耐受力很强(18%)； 　2、血液葡萄糖琼脂：圆形、光滑、淡蓝色、透明、露滴状菌落，狭窄β溶血； 　3、 1℃-45℃均可生长，30℃-37℃ 最适， 4 ℃需7天可生长 ——故称“冰箱菌”； 　4、麦康凯上不生长。 5、普通琼脂平板：光滑型、蓝绿色光泽菌落； 6、半固体培养基穿刺: 沿穿刺线呈云雾状生长。 二、培养特性 1、可分解多种糖 2、接触酶：＋ 3、H2S：－ 4、尿素酶：－ 5、硝酸盐还原：－ 三、生化特性 1 耐碱不耐酸，耐盐。在土壤、牛奶、青贮饲料和粪便中长期存活； 2 对热的耐受性较多数无芽孢杆菌强，常规巴氏消毒法不能杀死该菌，在70℃ 5-10min可被杀死； 3 对消毒剂的抵抗力不强，常用消毒药5-10min能杀死本菌：2.5%石炭酸、70%乙醇、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林均可有效杀灭。 四、抵抗力 具有O抗原（阿拉伯数字表示）及H抗原 （小写英文字母表示）, 16个血清型，常见1a、2a、4b型。与多种细菌存在共同抗原，故血清学诊断意义不大。 五、血清型 六、致病性 1、本菌细胞内寄生，不被宿主细胞吞噬而破坏。产生的李斯特溶血素O（listeriolysin O, LLO）与其能在巨噬细胞内生长有关。 2、可自然感染多种家畜：猪、马、牛、绵羊； 3、病畜神经症状，成年牛、羊往往表现为“转圈病” ； 4、妊畜流产、血液中单核细胞增多。 5、鸡可全身感染，心肌坏死。 6、成人脑膜炎，新生儿脑膜炎(10%)。 七、微生物学诊断 1. 镜检：肝、脾、脑组织等涂片、革兰氏染色镜检可见G＋呈Ｖ字排列的小杆菌。 2. 分离培养：普通琼脂平板蓝绿光泽的菌落，接种血液葡萄糖琼脂，露滴状菌落，β溶血。 3. 纯培养：溶血检查、运动性检查、生化鉴定。 4. 动物试验 ：病料接种家兔或豚鼠眼内，1d后发生结膜炎，不久败血症死亡；小鼠腹腔注射，剖检肝脏坏死，分离细菌；妊娠2w的动物接种后可发生流产。 5. 血清学检查 ：凝集反应。 第2节 丹毒丝菌属（Erysipelothrix） 本属只有1种，即猪丹毒丝菌（E.rhuriopathiae），是猪丹毒病的病原体，也可引起人的“类丹毒” ，通称猪丹毒杆菌。 1、G+细长小杆菌，0.2-0.4×0.5-2.5μm；组织涂片或血液涂片中，呈单在、成对或小丝状，无鞭毛，无芽胞，无荚膜； 2、有形成长丝状的趋势（陈旧培养物和慢性病猪的心内膜增生组织）。 一、形态与染色 急性病例 慢性病例 二、培养特征 1、兼性厌氧或微需氧，普通琼脂生长不良，麦康凯不生长。血平板上生长茂盛，针尖大小露滴状菌落，圆形、灰白、透明、α溶血，生长温度5-42℃，最适30-37℃。 2、鲜血琼脂平板培养时粗糙型菌落的菌体呈多形性。 三、生化特性 1、糖类发酵：糖发酵能力极弱，仅葡、果、乳，＋； 2、接触酶：－； 3、H2S：＋； 4、不分解尿素； 5、明胶穿刺：呈试管刷状生长，不液化； 无芽胞菌中抵抗力最强的一种，对腐败和干燥环境有 较强的抵抗力： 腌肉中可生存5~6个月； 深埋尸体中生存7~10个月； 腐败猪粪中生活5个月； 土壤中可长久存活，甚至繁殖。 本菌对常用消毒剂抵抗力不强，0.5％甲醛数十分钟 可杀死。 四、抵抗力 最初被分为A、B、N型。 A型：强毒型，多分离自急性病例； B型：弱毒型，多分离自慢性病例，免疫原性较好； N型：无毒型。 目前根据肽聚糖抗原可分为25个血清型，以阿拉伯数字表示。其中：1a亚型—急性败血症；2型—亚急性、慢性