Bcl―2 Bax在外阴营养不良和外阴鳞癌中的表达研究.docVIP

Bcl―2 Bax在外阴营养不良和外阴鳞癌中的表达研究 　　摘要：目的 探讨Bcl-2、Bax基因与外阴鳞癌细胞凋亡的关系。方法 应用免疫组化SP法检测30份外阴鳞癌石蜡包埋组织中Bcl-2、Bax的表达情况。结果 bcl-2蛋白在正常外阴皮肤基底层中有弱阳性表达；在增生型营养不良及外阴癌组织中表达率有不同程度增高，有显著差异；该基因蛋白表达与外阴癌细胞分化程度有关，与临床分期无关。结论 外阴鳞癌的发生、发展与细胞凋亡被抑制有关，这一过程可能主要由bcl-2基因调控. 　　关键词：bcl-2； bax； 外阴营养不良；外阴癌； 　　外阴营养不良（VD）是女性外阴皮肤和黏膜的慢性病损，与局部表皮细胞凋亡或细胞增殖异常有密切关系。本实验采用免疫组化方法检测正常外阴、营养不良组织及外阴鳞癌组织中bcl-2和Bax蛋白的表达，了解Bc1-2家族成员的相互作用及其与凋亡的关系，以及与外阴癌发生发展之间的关系，为外阴癌的早期诊断提供有意义的帮助。 　　1.一般资料实与方法 　　1.1 标本来源 　　采用大庆油田总医院妇产科收治的外阴病变患者62例，其中外阴癌30例、外阴营养不良32例，所有标本均经HE染色和组织学观察确定诊断，所有患者术前均未接受过放疗、化疗或激素治疗。 　　1.2 实验试剂及仪器 　　1.2.1免疫组化实验 　　1.2.1.1免疫组化试验试剂：免疫组化染色（SP-9000）试剂盒为北京中山生物技术有限公司产品。 　　1.2.1.2免疫组化实验：采用免疫组化（S-P）法。 　　1.2.2结果判定 　　根据阳性细胞的百分率分为4个等级：阳性细胞数〈5%为0分；5%～24%为1分；25%～49%为2分；50%为3分。按染色强度将其也分为4个等级：0分：无阳性细胞；1分：阳性细胞染色呈浅黄色；2分：阳性细胞染色呈黄色；3分：阳性细胞染色呈棕黄色。阳性细胞数评分与染色强度评分相加后除以2得出综合评分。综合评分≥2为阳性表达。 　　1.3统计学分析： 采用SPSS12.0软件包进行X2检验、方差分析及相关分析，P0.05提示差异显著。 　　2.结果 　　2.1不同外阴组织中Bcl-2及Bax蛋白阳性表达率的比较 　　Bax阳性细胞为胞浆内棕黄色细颗粒，有时可见胞膜和（或）核膜着棕黄色，在正常外阴组织中少量表达，在外阴营养不良以及外阴鳞癌中阳性表达率逐渐增加，Bax 在营养不良组织表达阳性率为52.7%，在外阴癌中表达阳性率分别为71.2%，两者比较有明显统计学差异（p0.05）。Bcl-2 在外阴营养不良组织表达阳性率为32.1%，在外阴癌中表达阳性率分别为94.2%，两者比较有明显统计学差异（p0.05）。见表1。 　　2.2不同临床病理指标的外阴癌组织中Bcl-2、Bax蛋白的表达 　　Bcl-2在Ⅰ级外阴鳞癌组织中表达率为85.7%，明显高于Ⅱ、Ⅲ级鳞癌组织中的表达（33.3%，25%， p 0.05）。 　　3.讨论 　　细胞凋亡是与细胞坏死截然不同的一种细胞死亡类型。近年来的研究表明，细胞凋亡在机体的正常细胞生理代谢过程、疾病发生的病理过程和肿瘤形成过程中起着一定作用，而bcl-2是一个重要的凋亡抑制基因，观察该基因在外阴营养不良及外阴癌中的表达其意义十分重要。国外学者曾发现bcl-2基因在正常胃肠道粘膜上皮及其它上皮组织基底层表达阳性，并且在表皮组织发生异常增生及不典型增生时bcl-2基因蛋白表达阳性并增强〔1〕。本研究发现bcl-2基因在外阴癌表达率增高，实验结果提示，该基因蛋白存在于正常皮肤组织基底层，对基底层干细胞有保护作用，防止细胞凋亡。随着基底细胞向表层细胞分化而该蛋白消失，对维持正常皮肤的正常代谢起着一定的作用。如果bcl-2基因蛋白在外阴皮肤其余各层组织中异常表达，将对皮肤其余表层组织细胞的凋亡过程及正常分化代谢产生一定的影响。本研究还发现，该蛋白在外阴癌组织中高度表达，与慢性外阴营养不良病变有显著差异。提示了bcl-2基因表达与外阴癌的病理过程有一定的关系。Lauwers等在胃癌、乳腺癌中也同样发现bcl-2异常表达。外阴增生型营养不良、不典型增生和外阴癌的发生有密切关系。bcl-2基因表达不是唯一因素。该基因表达抑制凋亡，只使得细胞长时生存，产生基因不稳定性，更易使得其它致癌因素作用。这一观点，Sae-gusa等曾在宫颈癌、食道癌的bcl-2表达研究中得到同样提示。本研究还发现bcl-2表达随着外阴癌细胞分化程度增高而表达增强，并且在外阴癌有、无淋巴结转移的外阴癌组织中表达状况无显著差异。这与Ohbu[2]和Herod[3]报道一致，提示bcl-2可能是分化良好的标志，并且与癌的临床分期无一定关系。 　　参考文献 　　[1] Lauwers GY，Sc