抗磷脂抗体、同型半胱氨酸与青年卒中的相关性分析.docVIP

抗磷脂抗体、同型半胱氨酸与青年卒中的相关性分析 　　摘要：目的 探讨抗磷脂抗体、同型半胱氨酸与青年卒中的相关性。方法 分别用ELISA、循环酶法测定50例青年卒中及40例老年卒中患者外周血APLA、Hcy水平，同时记录CT所示梗死体积和部位，测定神经功能评分。结果 ①青年卒中组外周血APLA、Hcy水平较老年卒中组明显升高（P0.01）；④APLA与Hcy之间呈正相关（P0.01）。结论 二者促进了青年卒中的发生、发展，是青年卒中的独立危险因素。 　　关键词：青年卒中；抗磷脂抗体；同型半胱氨酸 　　近年青年卒中发病率越来越高，给家庭及社会造成沉重的经济负担。青年卒中的病因与老年人相比更加复杂，且有些病因及危险因素至今仍不被知晓或重视，以至最终造成卒中发病越来越年轻化[1]。故探讨青年卒中的更多未知病因及危险因素对及早预防青年卒中具有重要意义。本研究力图证实青年缺血性脑卒中患者血浆抗磷脂抗体（APLA）、同型半胱氨酸（Hcy）水平明显高于老年卒中患者，以证实血浆APLA、Hcy是青年卒中的独立危险因素，为临床早期干预青年卒中的发生、发展开辟一条崭新的途径。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 实验组（青年卒中）：收集2012年1月～2013年1月在我院神经内科住院的青年缺血性脑卒中患者50例。青年人按WHO必威体育精装版的划分标准：大于18岁，小于等于45岁。患者均按全国脑血管病学术会议制定的诊断标准，全部经头颅CT或MRI检查证实。并按1995年全国第四届脑血管病学术会议制定的脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准（CNFDS）进行评分。排除标准 肿瘤、严重的全身感染及自身免疫性疾病。 　　对照组（老年卒中） 选取同期住院老年缺血性脑卒中患者40例，除外近期感染或有变态反应病史者。 　　对两组患者均进行卒中危险因素检测，包括高血压、糖尿病、高脂血症、高尿酸血症、心脏病、吸烟等病史。两组患者年龄、性别、临床资料的差异无统计学意义（P0.01）。 　　1.2实验方法 　　1.2.1 ELISA法检测APLA 　　1.2.1.1试剂 ①纯心磷脂②辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgC、IgM、IgA。 　　1.2.1.2操作步骤 将纯心磷脂用无水乙醇配成12.5g/mL，加入干燥洁净的聚苯乙烯反应板，50gL/孔，置氮气下室温蒸发干燥。次日以PBS-T洗板3次后，以0.3%明胶封闭，150gL/孔，置37℃90 min，洗板3次。加1：1 000稀释的待测血清或阳性和阴性对照血清，l00gL/孔，置37℃湿盒反应2h洗板5次后，加HRP-羊抗人IgC或IgM、IgA 100gL/孔，置37℃湿盒反应1h。洗板5次后甩干，加新鲜配制的底物液100gL/孔，37℃反应10～15min，待充分显色后每孔滴加2mol/LU2S04 50gL终止反应，测各孔492nm吸光度（A）。 　　1.2.1.3结果判定与临床意义 标本及阳性、阴性对照均采用双孔测定，取2孔A值的平均值以P/N2.1判为阳性。 　　1.2.2循环酶法检测同型半胱氨酸 　　1.2.2.1试剂与仪器 贝克曼DXC800全自动生化分析仪，酶学试剂由宁波瑞源生物科技有限公司提供。 　　1.2.2.2实验样本 所有实验者均在清晨空腹采血2ml以EDTA-2Na抗凝。 　　1.2.2.3实验原理 氧化型Hcy被氧化成游离Hcy，游离Hcy与共价底物S-腺苷甲硫氨酸在Hcy甲基转移酶催化下反应生成蛋氨酸和S-腺苷同型半胱氨酸（SAH），SAH被S-腺苷同型半胱氨酸水解酶水解成腺苷和Hcy，Hcy可循环加入反应，腺苷水解为次黄嘌呤和氨，氨在谷氨酸脱氢酶作用下使NADH+转变成NAD，其转化速率与样品中Hcy含量成正比。 　　1.3统计学方法 实验数据采用SPSS16.0软件处理，计数资料用χ2检验；计量资料以均数加减标准差（x±s）表示，两组间比较用t检验，多组间比较用方差分析；相关分析用直线相关分析。各组间年龄经t检验均无显著性差异（P0.01）。 　　2结果 　　2.1实验组与对照组外周血中APLA、Hcy测定值，见表1。 　　2.2外周血中APLA、Hcy水平与神经功能评分的关系见表2。 　　青年卒中组中，神经功能评分重度者，血浆APLA及Hcy水平最高，中度者次之，轻度者最低。重度者与轻度者比较差异有显著性（P0.01），说明随血浆APLA及Hcy水平降低，神经功能缺损评分降低，病情好转。 　　2.3急性期血浆APLA、Hcy水平较恢复期明显升高（P0.01） 　　2.4 APLA及Hcy与梗死体积呈正相关（P0.01）。 　　2.5 APLA与之Hcy间呈正相关（P0.01）。 　　3讨论 　　3.1抗磷脂抗体（anti2phosp