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实验室规章制度及实验基本要求 1.遵守实验室规则,爱护实验仪器设备。 2.实验前要写预习报告,了解目的、原理和基本方法,做到心中有数、思路清晰。 3.进入实验室要签名,指导老师检查预习报告。 4.实验操作要细心谨慎,严格遵守操作规则,认真进行观察,做好实验记录。 5.以实事求是的态度认真完成实验报告,并交给指导教师批阅。 6.随时注意实验台面的清洁,做完实验要清理好实验台面,卫生值日生要做好当日的清洁卫生。 7. 指导老师检查实验记录和实验任务,检查通过签字后方可离开实验室,走时注意关闭灯、电、火、窗。 实验考核 1. 微生物学实验成绩包括实验过程表现成绩、实验报告成绩 2. 实验过程表现成绩包括:实验操作是否正确规范、学习态度是否认真、实验结果如何是否符合逻辑、清扫值日等方面。成绩分为 :良好、一般、差三级,相当于百分制 85、75、55。 3. 实验报告成绩包括:实验报告的格式是否正确、原理是否论述清楚,实验结果分析讨论是否正确,报告字迹是否清楚等方面,实验报告给定成绩分为:A+、 A、 A-、 B+、B、B-、C+、C、C- 九级,相当于百份制的 95、90、85、80、75、70、65、60、55。 微生物实验进程表 实验一 实验室环境、人体表面微生物检查及常用器皿包扎 实验二 普通光学显微镜的使用及细菌形态观察 实验三 培养基的制备、消毒与灭菌 实验四 细菌简单染色和革兰氏染色法 实验五 神农架土壤微生物分离纯化 实验六 放线菌、霉菌形态观察 实验七 平板菌落计数与接种 实验八 酵母菌形态观察及死活细胞鉴别、微生物大小测定 和显微镜直接计数 实验九 环境因素对微生物生长的影响 实验十 微生物生理生化实验 实验十一产碱性蛋白酶菌株的筛选 (综合实验) 注意: 带菌的器皿在洗涤前用 2 %煤酚皂溶液或 0.25 %新洁尔灭溶液等消毒液内浸泡 24 h或煮沸 30 min,再洗涤; 带病原菌的培养物先进行高压蒸灭菌,然后倒去培养物,再洗涤。 四、证明实验室环境与人体表面存在微生物 基本原理: 平板培养基含有微生物生长所需要的营养成分,当取自不同来源的样品接种于培养基上,在 28~37 ℃ 温度下培养,1~3 天内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖,形成一个可见的细胞群体的集落,称为菌落。每一种微生物所形成的菌落都有它自己的特点,例如菌落的大小,表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑,边缘整齐或不整齐,菌落透明或半透明或不透明,颜色以及质地疏松或紧密等。因此,可通过平板培养基来检查环境中微生物的数量和类型。 1、培养皿做记号 任何一个实验,在动手操作前均需首先将器皿用记号笔做上记号,培养皿的记号一般在皿底上。用记号笔写上班级、姓名、日期,本次实验还要写上样品来源,字尽量小些,写在皿底的一边,不要写在当中,以免影响观察。 2、接种 (每人接种2只平皿) 用棉签接种实验室空气、台面及手指(洗手前和洗手后)、头发、咳嗽、鼻腔等。 五、实验任务 每人: 包扎4个平皿、1只吸管; 做2个试管塞、做1个三角瓶塞子并包扎好; 接种2只平皿。 六、思考题 1、记录实验结果,描写观察到的菌落形态。 2、比较各种不同来源的样品,哪一种样品的平板菌落数与菌落类型最多? 3、通过本次实验,在你防止培养物的污染与防止微生物的扩散方面,你学到些什么?有什么体会? 结 束 请注意实验台面清洁! 请值日生留下来打扫卫生! 冷冻干燥机 蒸馏水器 超声波清洗仪 磁力搅拌器 方法一:用旧报纸密密包紧,一般以5-8套培养皿作一包。包好后用干热或湿热灭菌(见无菌操作技术)。 方法二:将培养皿放入金属(不锈钢)筒内,干热灭菌。金属筒配有盖子,内部还有一个可以放培养皿的带底框架。框架可以从筒内提出,以便装取培养皿。 1、培养皿的包装 二、玻璃器皿的包装 包好的培养皿 塑料培养皿架 金属筒和内部的框架 2、吸管的包装 准备好干燥的吸管,在粗头端塞入一小段棉花,以免使用时将杂菌吹入或不慎将微生物吸出。 将吸管尖端斜放在旧报纸的近左端,与报纸成45°角,左端多余的一段覆折在尖头上,再将整根吸管卷入报纸,右端多余的报纸打个小结。 包好的吸管再用一张大报纸包好,干热灭菌。或一起装入专用吸管筒进行灭菌。 如果一次可以用完,也可以将吸管直接装入筒内。尖端向内,使用时将筒平放在桌面上,手持粗端抽出。 3、试管和三角瓶的包装 试管管口和三角瓶瓶口塞以棉花塞或泡膜塑料塞,然后在外面用两层
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