实验三氨基酸、蛋白质的性质鉴定ppt课件.pptVIP

实验三、氨基酸、蛋白质的性质鉴定 一、目的要求 了解氨基酸及蛋白质的主要化学性质及检验方法 二、实验原理 氨基酸与蛋白质分子组成中的某些特殊结构与某些试剂作用可以表现出特殊的颜色反应，利用此性质，可检验出氨基酸及蛋白质。 三、试剂 甘氨酸（1%）、鸡蛋白、茚三酮（0.2%） 氢氧化钠（5%）、硫酸铜（1%）、谷氨酸（1%） 浓硝酸、浓氨水、饱和硫酸铵、氯化汞（0.5%） 注：1、鸡蛋白制备：取鸡蛋打一小孔，吸取 2.5ml蛋清，放入烧杯，加100—120ml蒸 馏水，搅拌过滤，滤液备用。 2、茚三酮试剂制备：0.1g茚三酮溶50ml 蒸馏水中，两天内用完，否则失效。 1、茚三酮反应 于二支试管中分别加入1%甘氨酸、鸡蛋白溶液各2ml，再加0.2%茚三酮溶液3—4滴，然后将两支试管放在沸水浴中加热8—10分钟，观察两支试管有什么现象发生？ 解释：茚三酮反应：aa和Pr都显蓝色 2、缩二脲反应 于一支试管中加入鸡蛋白溶液2ml，再滴加5%氢氧化钠溶液至呈碱性，再加3—5滴1%硫酸铜溶液，观察有何颜色？ 另取1%谷氨酸2ml按上法加入同样试剂作对照实验，比较反应结果。 解释：缩二脲反应：凡含有两个- CONH2基团和 缩二脲反应呈紫色 3、黄蛋白反应 一支试管中加入鸡蛋白溶液2ml和浓硝酸0.5ml，加热煮沸1—2min，观察呈什么现象？溶液冷却后，加入过量浓氨水，又呈什么颜色？ 解释：黄蛋白反应：黄色沉淀，这一反应为苯丙氨 酸、酪氨酸、色氨酸等苯环aa特有。 4、蛋白质盐析 取2ml鸡蛋白溶液于试管中，慢慢加入等量硫酸铵饱和溶液，混合均匀，即成不饱和硫酸铵溶液，静置数分钟，则析出球蛋白，滤出沉淀，向滤液中加入结晶硫酸铵，使其饱和（硫酸铵不再溶解为止），此时析出清蛋白。 解释：不同Pr硫酸铵沉淀饱和度不同 5、重金属盐对蛋白质作用 两支试管中，各加入蛋白质溶液1ml，然后一支试管中慢慢加入1%硫酸铜溶液几滴，另一支试管中加入0.5%氯化汞（剧毒）3—5滴，有什么现象？说明什么问题？ 解释：Pr和重金属离子汞在碱性溶液中生成沉淀。 * *