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实验三 酶的基本性质 （P85） 酶的定义： 是生物细胞产生的、以蛋白质为主要成分的生物催化剂。生物体内的化学反应基本上都是在酶催化下进行的。 酶的特点： 酶具有高效性、专一性、活性可调节控制等特性 。 温度、pH值、激活剂、抑制剂可影响酶的活性。 一、目的 通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性，了解温度对酶活性的影响，明确最适温度的概念； 了解pH值对酶活力的影响，学习测定最适pH值的方法； 了解激活剂、抑制剂对酶活性的影响，学习检定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。 二、原理 酶的催化作用受温度的影响很大 提高温度可以增加酶促反应的速度。通常温度每升高10摄氏度，反应速度加快一倍左右，最后反应速度达到最大值。 酶是一种蛋白质，温度过高可引起蛋白质变性，导致酶的失活。因此，反应速度达到最大值以后，随着温度升高，反应速度反而逐渐下降，以至完全停止反应。 反应速度达到最大值时的温度称为某种酶作用的最适温度。高于或低于最适温度时，反应速度逐渐降低。 二、原理 酶的活性受环境pH的影响极为显著。 通常各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活性。一种酶表现其活性最高时的pH值，称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时，酶的活性逐渐降低。 不同酶的最适pH值不同，例如，胃蛋白酶的最适pH为1.5-2.5，胰蛋白酶的最适pH为8等。 酶的活性常受某些物质的影响。 有些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂； 有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制剂。 例如，氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂，硫酸铜为其抑制剂。 很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性，而且常具有特异性。 激活剂和抑制剂不是绝对的，有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂，而在高浓度时则为该酶的抑制剂。 例如，氯化钠达到1/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活性。 三、仪器和试剂 仪器 移液管、吸耳球、试管、试管架、恒温水浴锅、胶头滴管、白瓷反应盘 试剂 1%淀粉溶液（含0.3%NaCl），0.1%淀粉溶液，唾液淀粉酶液，pH7.0、8.0、5.0的磷酸缓冲液（PB），碘液，1%NaCl，1%CuSO4，蒸馏水（dH2O） 四、实验方法 （一）温度对酶活性的影响 四、实验方法 （二）pH值对酶活性的影响 四、实验方法 （三）酶的激活和抑制 五、结果与分析 （三）酶的激活和抑制 各试管中现象，解释原因 六、讨论与心得 * * 最适温度 （一）温度对酶活性的影响 （二）pH对酶活性的影响 二、原理 （三）酶的激活和抑制 二、原理 本实验分别在不同温度、不同pH值及不同物质作用的条件下使淀粉酶作用于其底物——淀粉，并用碘液检查酶促淀粉水解程度来说明各条件与酶活力之间的关系。 淀粉 糊精 麦芽糖 淀粉酶 淀粉酶 大 小 中 碘液 碘液 碘液 碘液 碘液 蓝色 蓝紫色 暗褐色 红色 碘色 1 1 1 碘液（滴） 流动水冷却 冷却3min 100℃ 37℃ 0℃ 反应10min 1 1 1 1%淀粉液（含0.3%NaCl）（mL） 2 2 2 pH7.0缓冲液（mL） 100℃ 37℃ 0℃ 酶液处理5min 1 1 1 唾液淀粉酶液（mL） 3 2 1 管号 操作项目 保温2min后，从2号试管中取出1滴溶液置于白磁盘上，用碘液检查淀粉的水解程度 检查淀粉水解程度 1 1 1 碘液（滴） 将各管混匀37 ℃水浴中保温 保温 1 1 1 淀粉酶液（mL） 1 1 1 1%淀粉液（含0.3%NaCl）（mL） 3 / / pH8.0缓冲液（mL） / 3 / pH7.0缓冲液（mL） / / 3 pH5.0缓冲液（mL） 3 2 1 管号 操作项目 保温1min后，从1号试管中取出1滴溶液置于白磁盘上，用碘液检查淀粉的水解程度 检查淀粉水解程度 2 2 2 碘液（滴） 将各管混匀37 ℃水浴中保温 保温 3 3 3 0.1%淀粉液（mL） 1 1 1 淀粉酶液（mL） 1 / / 蒸馏水（mL） / 1 / 1%CuSO4（mL） / / 1 1%NaCl（mL） 3 2 1 管号 操作项目 （一）温度对酶活性的影响 各试管中现象，解释原因 （二）pH值对酶活性的影响 各试管中现象，解释原因