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实验九 明胶液化、淀粉水解等生化试验 一、目的与要求 掌握微生物的生化反应原理在微生物分类鉴定中的重要作用，及淀粉试验、明胶液化试验、过氧化氢酶试验、糖发酵（酒精发酵）等的原理、操作方法。 二、实验原理 1. 糖发酵试验 是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上及酿造工业中鉴别培养酵母和野生酵母的一种重要方法。绝大多数微生物能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢、甲烷、二氧化碳等)；有些细菌只产酸不产气。如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气，伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。酵母菌能分解葡萄糖、蔗糖生成乙醇和CO2，不能分解乳糖。 酸的产生可利用指示剂来判断，在配制培养基时，预先加入溴酚蓝(pH3.0～4.6, 黄～蓝)，当发酵变酸时可使培养基由蓝色变为黄色。气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。 2.过氧化氢酶试验 某些微生物能产生过氧化氢酶，将过氧化氢分解而放出氧气，多数需氧或兼性厌氧微生物皆能产生过氧化氢酶，而一般厌氧微生物不产生此酶。 3. 淀粉水解试验 有些微生物能产生淀粉酶(胞外酶)使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖。淀粉水解后遇碘不再变兰色。 4.明胶液化试验 明胶是一种动物蛋自质，高于24℃时可液化成液体，低于20℃时凝固成固体。某些细菌能产生明胶液化酶(一种蛋白酶)，分解明胶后使明胶分子变小，虽低于20℃亦不再凝固。利用此特点，用来鉴定某些微生物，即能产生明胶液化酶的微生物，能使明胶液化，无此酶的微生物则不能液化明胶。 三、实验内容与操作 1. 糖发酵试验 2人/组:每种糖分别接种大肠杆菌和酵母菌 2. 淀粉水解试验 2人/组: 接种酵母菌、黑曲霉；枯草芽孢杆菌 3.明胶液化试验 2人/组：接种枯草杆菌，大肠杆菌 4.过氧化氢酶试验 营养琼脂斜面接种枯草杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌 5. 对自酿果酒进行过滤和杀菌 四、作业 果酒酿造的实验报告 * 2 1 *
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