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实验五 放线菌、真菌形态观察及各类微生物菌落特征观察 实验内容 一 各类微生物菌落特征观察 2 实验原理 霉菌的菌落特征 比细菌菌落大,由菌丝组成疏松的绒毛状、絮状或蜘蛛网状,有的无固定大小,延至整个培养基中,产色素,使菌落显色。 二 放线菌形态观察 三 酵母菌形态观察 四 霉菌形态观察 2 实验原理 4 操作步骤 (1) 在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染液,用 拨针以无菌操作方式挑取少许根霉菌丝在染液 中铺展开,盖上盖玻片。 (2) 用低倍镜观察菌丝结构及孢子形态。 (3) 绘出黑根霉形态图 * * 一 各类微生物菌落特征观察 二 放线菌形态观察 三 酵母菌形态观察 四 霉菌形态观察 1 实验目的要求 2 实验原理 3 实验步骤 1 实验目的要求 (1)观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生 物具体菌种菌落的形态特征。 (2)总结几类微生物菌落的一般特征并能识别。 菌落:单个菌体在固体平面培养基上生长繁殖形成 的肉眼可见的群体。 粘质沙雷氏菌 沙门氏菌 铜绿假单胞菌 区分和识别各类微生物可从菌落形态(群体形态)和细胞形态(个体形态)两方面进行,菌落形态是无数细胞形态的集中反映,因此,每一大类微生物都有其一定的菌落特征,可通过这些特征差异区分和识别之。 特征描述:形状、大小、颜色、边缘、隆起、 光泽、质地等。 粘质沙雷氏菌 细菌菌落特征:凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合不紧密,易挑取,正反颜色一致。 放线菌特征 致密、坚硬、多皱、不易用针挑起,不透明。孢子成熟后,表面粉末状,干燥。 酵母菌菌落特征 与细菌相似 比细菌大而厚,不透明,表面光滑、湿润、粘稠,易用针挑起。多呈乳白色。 青霉菌落 4 实验步骤 ▲ 借助放大镜分别观察各类微生物的菌落的 大小,表面粗糙及含水分状况,边缘,致 密程度、透明程度,及厚度等特征,并填 写记录表。 ▲ 根据观察结果总结各类微生物菌落的一般 特征。 青霉 霉菌 黑曲霉 黑根霉 啤酒酵母 霉状芽孢杆菌 八叠球菌 酵母菌 细黄链霉菌 5406放线菌 枯草杆菌 真 菌 放线菌 色泽 透明 程度 厚薄程度 致密程度 边缘 表面 大小 细菌 菌落特征 描述的特征 微生物种类 表1 细菌、放线菌、真菌菌落形态特征观察 1 实验要求 2 实验原理 3 实验材料 4 实验步骤 1 实验要求 学习并掌握印片法制备标本片的方法 观察放线菌各部分菌丝特征 巩固显微镜油镜的使用 按要求绘放线菌的形态图 2 实验原理 放线菌形态结构介于细菌与真菌之间,菌体由无隔、分支状菌丝构成,可分为基内菌丝和气生菌丝两类,基内菌丝伸入营养基质内;气生菌丝位于营养基质上方。在发育过程中,气生菌丝分化形成孢子丝,孢子丝产生孢子。孢子丝形态因菌种不同而不同,有直线形、波曲形、螺旋状等形态,而孢子一般有球形、圆柱形、椭圆形等。 3 实验材料 5406 (细黄链霉菌)培养平板(在高氏一号培养基平板上以涂布法接种细黄链霉菌稀释液,28℃培养5--7日)。 4 操作步骤 1 用拨针将平板上的菌落培养基切割成小方块,并用拨针挑起 一块菌落培养基(注意无菌操作),用火焰微加热的洁净载 玻片,以生长的菌落面朝向载玻片,在载玻片上不同部位印 压。 2 将印片加热固定。 3 用蕃红染色2-3min,水洗风干。 4 镜检:先用低倍镜观察,后换用油镜观察气生菌丝、孢子丝 孢子等结构。 5 绘出放线菌形态图 孢子丝 气生菌丝 营养菌丝 气生菌丝 孢子丝 分生孢子 1 实验要求 2 实验原理 3 实验材料 4 操作步骤 1 实验要求 学习并掌握水浸片法制备标本片的方法 观察酵母菌的菌体形态特征及出芽生殖 按要求绘酵母菌形态图 2 实验原理 真菌形态结构比细菌复杂。习惯上,真菌可分为酵母菌和霉菌。 酵母菌是单细胞构造,个体形态多为卵圆形、圆柱形,但有时某些酵母菌可形成假菌丝。酵母菌无性繁殖以出芽方式生殖。常用碘液制水浸片。 3 实验材料 啤酒酵母斜面菌种 (马铃薯斜面培养基培养24小时) 4 操作步骤 水浸片观察 (1)在载玻片上滴加一滴碘液,用接种环以无菌操作 方式挑取少许啤酒酵母,在碘液中充分混匀,盖上 盖玻片。 (2)镜检:先低倍镜观察,后换用高倍镜观察细胞形态 (3)绘出酵母菌形态特征图 1 实验目的要求 2 实验原理 3 实验材料 4 操作步骤 ▲学习并掌握水浸片法制备标本片的方法 ▲观察黑根霉的菌丝形态
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