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实验动物遗传质量监测 广东省实验动物监测所 实验动物遗传质量控制的主要内容 对生产过程进行控制,科学引种,繁殖和生产. 建立定期遗传监测制度, 检查是否发生遗传污染或遗传突变,监控各品系应具有的遗传特性. 名词解释 遗传概貌：一套标记基因的组合，可以将不同品系动物之间在遗传上明显区分开来。 近交系：经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成 ，品系内所有的个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。 近交系动物的遗传特征 遗传检测常用方法 我国近交系大小鼠遗传检测主要项目 1.生化标记基因检测 GB规定近交系小鼠选择位于10条染色体上的13个生化位点,近交系大鼠选择位于3条染色体的9个生化作为遗传检测的生化标记. 2.皮肤移植检测法 3.下颌骨测定法 近交系大小鼠遗传检测的实施 1.抽 样 对基础群，凡在子代留有种鼠的双亲动物都应进行检测。 对生产群，按表1要求从每个近交系中随机抽取成年动物，雌雄各半。 2.检测频率 4.结果判定  生化标记基因检测方法 内容：以蛋白质及同工酶的电泳技术近交系动物进行遗传监测。 原理：蛋白质即酶由多个基因位点编码决定，每个遗传基因决定同工酶亚单位。因此一定酶的亚单位多肽链，就成为编码它的生化基因的标记。通过电泳技术分离不同蛋白质，再结合同功酶催化反应显色系统，从而得不同蛋白质的电泳图谱，达到检测不同品系动物遗传生化标记基因的目的。 具体操作 样品：大小鼠血清、溶血素及肝肾匀浆 实验方法：醋酸纤维膜(板)电泳法 染色方法：异构蛋白用直接染色法，同工酶用底物反应显色法。 5.醋酸纤维膜的染色、脱色 大鼠Es4生化位点 * * 1. 纯合性 mozygosity 检测中不应发现杂合体 2. 同基因性 isogenicity 检测中同一近交系内不同个体间基因型一致 。 3. 品系独特性 individuality 每一个近交系品系的基因组成是独一无二的，不同于别的近交系。 质量性状 毛色基因测试法 生化标记检测法 免疫标记检测法, 皮肤移植法等 染色体带型 DNA fingerprinting ,RAPD,SNP 数量性状态 下颌骨测定法,生物学特性监测法 其他性状 遗传性状 常用方法 ≥6% 100只以上 6只 100只以下 抽样数目 生产群中雌性种鼠数量 新建立、新引进品系需全面检测 生产群至少每年检测一次。 3.检测方法的选择 生化标记基因检测：常规方法 皮肤移植 根据需要与可能，可选用其它方法：毛色基因测试、免疫标记基因检测、不颌骨测量法、染色体标记检测、DAN多态性检测等。 淘汰，重新引种 增加检测位点数目和增加检测方法后重检，确实只有一个标记基因改变可命名为同源突变系 处理 不合格 可疑 未发现遗传变异，遗传质量合格 判断 两个或以上位点的标记基因与标准遗传概貌不一致 有一个位点的标记基因与标准遗传概貌不一致 与标准遗传概貌完全一致 检测结果 准备试剂 样品处理 电泳检测 出具原始记录及检测报告 样品无害化处理 ? ?  遗传检测操作流程图 用干净镊子从封口袋中夹出醋酸纤维硬膜 （1）醋酸纤维膜的取用 将膜的光面向下，使膜浮在缓冲液面上。 缓冲液就会自膜的边缘逐渐渗透。 直至膜全部均匀润湿 (2)醋酸纤维膜的浸润 3.醋酸纤维膜的加样 用吸水纸吸干膜表面的缓冲液。 将醋纤膜膜面向上，固定在加样板上，用微量加样器沾取样品均匀点样一到两次。 4.醋酸纤维膜的电泳 将电泳液倒入电泳槽中，用滤纸在电泳槽的调节杆上搭好盐桥，将加好样的膜片架在盐桥上，正面朝下，加样端按电泳要求放置于正或负极。 醋酸纤维膜的电泳 接通电源，以恒定电压进行电泳。 电泳完毕，将纤维膜按照显色液配方进行显色反应。 反应结束，参照GB规定标准遗传概貌进行判定。 小鼠Es1生化位点检测 小鼠Car2生化位点检测 小鼠Hbb电泳结果 *