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题目:张家口地区奶牛子宫内膜炎流行病学调查与防治 学生姓名:朱雄飞 目录 一.摘要 二.引言 三.材料 四.方法 五.结果 六.讨论 一、摘要奶牛子宫内膜炎是奶牛常见病和多发病,给奶牛饲养业带来了巨大的经济损失。本试验对张家口八个地区奶牛场中奶牛进行流行病学调查研究发现:张家口地区奶牛子宫内膜炎的平均发生率为21.25%。再对奶牛临床型或无临床型子宫内膜炎奶牛的病原菌进行分离、鉴定。试验从42份样品中分离出7种共计141株细菌。对所有分离株进行9种药物的敏感性试验。结果表明:病原菌对万古霉素、氟苯尼考、环丙沙星、卡那霉素和新霉素敏感。关键词:奶牛子宫内膜炎;流行病学;病原菌;防治 二、引言 奶牛子宫内膜炎是奶牛最为常见的产科疾病,其发病很高,经济损失较大,是当前影响奶牛繁殖和降低奶产量的最主要的疾病之一。奶牛子宫内膜炎大多数是在分娩时或产后期间,由于子宫内膜的损伤和外界微生物入侵而引起的子宫内膜的炎症过程,故有产后子宫内膜炎之称。 国外许多资料报道,奶牛子宫内膜炎的发病率在20%-40%左右。 本实验通过对张家口地区奶牛场的调查研究,了解张家口地区的奶牛子宫内膜炎的发病规律、病原分布、病原耐药性,找出抑制子宫内膜炎致病菌的有效药物。 三、材料 3.1实验动物:待检奶牛来自张家口的8个地区(万全奶牛小区、宣化县奶牛小区、察北管理区奶牛小区、怀来奶牛小区、怀安奶牛小区、塞北管理区奶牛小区、阳原奶牛小区、涿鹿奶牛小区)不同性质和规模的奶牛养殖场。 3.2仪器及药品:超净工作台:型号FLC-3(由哈尔滨市东联公司提供)、手提式不锈钢蒸汽消毒器:型号YX280B(由上海三申医疗器械有限公司提供)、电热恒温鼓风干燥箱:型号HG-9140(由上海精宏实验设备有限公司提供)、电热恒温培养箱:型号DNP-9082(由上海精宏实验设备有限公司提供)、离心机:型号LXJ64-01(由河北省吴桥电机厂提供)。 一次性输精管套,输精枪、70%酒精棉球、0. 1%百毒杀等 (由河北北方学院提供),50m1, 20m1, 5m1, lml一次性无菌注射器(购于张家口佰汇医药有限公司)。 3.3药敏试纸 药敏试纸购于杭州天和微生物试剂有限公司,批号3.4细菌分离培养基 添加3%小牛血清的牛心肉汤 营养琼脂平板(观察菌落形态) 麦康凯培养基:分离大肠杆菌用 沙保氏弱培养基:分离真菌用伊红美蓝琼脂培养基:分离沙门氏菌用 普通琼脂培养基 3.5药敏试验培养基 MH(Mueller Hinton)液体培养基和MH琼脂(MHA)(杭州天河微生物试剂有限公司),其中进行链球菌药敏试验时,在MHA中加5%的小牛血。 生化鉴定培养基(生化微量鉴定管均购自杭州天和微生物试剂有限公司)。 四、方法 4.1病料采集 先将患有子宫内膜炎的奶牛阴门清洗千净,再用百毒杀消毒。将经过高温消毒的输精专用金属管插入一次性无菌塑料输精管套中,将管套插入子宫内,用灭菌注射器在金属管另一端吸几下,取出输精管套,立即将金属管头部的一段分泌物注入无菌小瓶中,10分钟内送实验室进行细菌分离培养。同时取子宫分泌物涂片染色镜检。 4.2细菌分离 将子宫洗出液接种于血液琼脂及普通琼脂平板上,置37℃培养24-48小时。细菌太多无法分离时,进行倍比稀释后再涂布平板分离。对生长的可疑菌落,结合菌落特征、涂片染色镜检特征,标记菌株号,并挑取单个菌落进行纯化,再涂片,染色镜检。若镜检无杂菌,再接种于牛心肉汤,置于37℃恒温箱培养18-24小时,观察细菌在肉汤中的生长情况,并进行涂片、染色、镜检,作好记录和标记,作为鉴定菌种,同时保存备份菌种。 4.3细菌鉴定 根据细菌的培养特征、染色形态特征,排列等进行初步归类,确定其生化反应和其它鉴定项目。 4.4药敏试验 采用世界卫生组织推荐的、目前各实验室广泛采用的纸片琼脂扩散法((discagardiffusion)。 接种和培养等参照赵红琼2005年报道的方法进行。 判断标准:抑菌圈直径(包
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