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微生物学 授课内容 第一章 绪论 第二章 纯培养与显微技术 第三章 微生物细胞的结构与功能 第四章 微生物的营养 第五章 微生物的代谢 第六章 微生物的生长繁殖及其控制 第七章 病毒 第八章 微生物遗传 第九章 原核基因表达的调控 第十章 微生物与基因工程 第十一章 微生物的生态 第十二章 微生物的进化、系统发育和分类鉴定 第十三章 感染与免疫 第一章 绪论 一、微生物和我们 微生物无处不在,我们无时不生活在“微生物的海洋”中。 二、微生物学 微生物:小、多、快、强、广 三、微生物的发现和微生物学的发展 四、20世纪的微生物学及 21世纪微生物学发展的趋势 史前时期——人类对微生物的认识与利用 微生物学初创时期——微生物形态认识时期 微生物学奠基时期——微生物生理学发展时期 微生物学发展时期——微生物生物化学发展时期 微生物学成熟时期——微生物分子生物学发展时期 微生物学在“生物学世纪”中的发展趋势 向纵深方向和分子生物学水平发展; 一批新的学科在形成; 与其他学科的交叉形成新的边缘学科; 新技术新方法在微生物学应用; 向着复合生态系统和宏观范围拓宽; 尽管如此,我们对微生物的了解开发远远不够,利用的微生物不超过1%等。 第二章 微生物的纯培养和显微技术 纯培养 显微技术 纯种微生物的分离方法 稀释倒平板法 涂布平板法 平板划线分离法 稀释摇管法 稀释倒平板法 稀释:先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如1:10、1:100、1:1,000、1:10,000......); 倒平板:然后分别取不同稀释液少许,与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板; 培养:保温培养一定时间即可出现菌落。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。 操作较麻烦,对好氧菌、热敏感菌效果不好。 2. 涂布平板法 先将已熔化的培养基倒入无菌平皿,制成无菌平板; 将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面,再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面; 经培养后挑取单个菌落; 使用较多的常规方法,但有时涂布不均匀。 3. 平板划线法 4. 稀释摇管法(dilution shake culture method) 二元培养物 纯培养物:只含有一种微生物的培养物叫做纯培养物。 混合培养物:含有两种以上微生物的培养物叫做混合培养物。 二元培养物: 培养物只含两种微生物,并有意识保持两者之间 的特定关系的培养物为二元培养物。 例如寄生于细菌细胞内的病毒与细菌一起培养。对于病毒来说,二元培养物是在实验室控制条件下可能达到的最接近于纯培养的培养方法。 第三章 微生物细胞的结构与功能 第一节 原核微生物:细菌、古细菌细胞的结构 一、细胞壁 二、细胞壁以内的构造----原生质体 1.细胞质膜 ; 2.细胞质和内含物 ; 3.核区; 4.特殊的休眠构造---芽孢 三、细胞壁以外的构造 1.糖被; 2.鞭毛; 3.菌毛和性毛 第二节 真核微生物 革兰氏染色法 初染:先用结晶紫染液染色; 媒染:再加媒染剂--碘液处理,使菌体着色; 脱色:然后用乙醇脱色; 复染:最后用复染液(沙黄或番红)复染。 显微镜下菌体呈红色者为革兰氏染色阴性细菌(常以G-表示),呈深紫色者为革兰氏染色阳性反应细菌(常以G+表示)。 细菌通过结晶紫初染和碘液媒染之后,在细胞膜内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物(CVI)。 革兰氏阳性菌由于细胞壁厚,肽聚糖的含量高,网状结构层次多和交联致密,网孔小。故用乙醇(或丙酮)作脱色处理时,乙醇使细胞壁脱水,肽聚糖的网孔变得更小,透性降低。不含类脂,用乙醇处理也不会溶出缝隙,因此,乙醇不能透过细胞壁而把结晶紫—碘复合染料抽提出来;因此,乙醇不能进入细胞去脱色,故用番红复染时仍为紫色。(实际是紫色加红色) G-细胞壁,由于肽聚糖含量小,网孔大,又由于被乙醇脱水(脂)后,网孔进一步增大,所以在脱色时,结晶紫和碘的复合物被有机溶剂所提取,故只能显示后来的沙黄番红的颜色。 真核微生物 第四章 微生物的营养 微生物生长所需要的营养物质主要是以有机物和无机物的形式提供的,小部分由气体物质供给。微生物的营养物质按其在机体中的生理作用可区分为:碳源、氮源、无机盐、生长因子和水 5大类。 营养物质进入细胞 第五章 微生物的代谢 第一节 微生物产能代谢 第二节 耗能代谢 第三节 微生物代谢的调节 第四节 微生物次级代谢与次级代谢产物 糖酵解 糖酵解:生物体内葡萄糖被降解成丙酮酸的过程。 主要分为四种途径:EMP途径、HM途径、ED途径、磷酸解酮酶途径。 呼吸作用:微生物在降解底物的过程中,将释放出的电子交给NAD(P)
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