2010色谱范例.ppt

讲授内容 色谱法概论 色谱法原理及其分离过程 色谱分离基本理论 气相色谱仪和高效液相色谱仪 液相色谱分类 色谱定性定量分析 应用实例 Ⅰ. 色谱法概论（Introduction of Chromatography） 1903年俄国植物学家茨维特(Tswett ）首先提出的。 玻璃柱----称为色谱柱 装有CaCO3----称为固定相 分离植物色素的石油醚提取液， 用纯石油醚进行淋洗--称为流动相。 结果分离得三种颜色的六条色带。每个色带为不同的色素组成。 他把这种色带称为“色谱”（Chromatography) 色谱法概论 色谱法不仅用于分离有色物质，还用于分离无色物质。“色谱”二字虽已失去原来的含义，但仍被人们沿用至今。并出现种类繁多的各种色谱法。 许多气体、液体和固体样品都能找到合适的色谱法进行分离和分析。 色谱法共同的基本特点是：具备两个相。 不动的一相，称为固定相 ； 携带样品流过固定相的流动体，称为流动相。 一、色谱法分类 1．按两相状态分类: ⑴ 气相色谱 （GC） ：气体为流动相的色谱。 可分为：气-固色谱（GSC－固定相是固体吸附剂）； 气-液色谱（GLC－固定液是附着在惰性载体上的一 薄层有机化合物液体）。 ⑵ 液相色谱（LC） ：液体为流动相的色谱。 可分为：液-固色谱（LSC）; 液-液色谱（LLC）。 ⑶ 超临界流体色谱（SFC）：流动相为超临界流体。 超临界流体:高于临界压力和临界温度时的一种物质的状态，它既不是气体，也不是液体，但兼有气体和液体的某些性质，如：气体的低粘度、液体的高密度以及介于气液之间的扩散系数。如CO2。 色谱按两相状态分类一览表 2．按分离机理分类 ⑴　吸附色谱法：利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附能力强弱不同而得以分离的色谱法（如气-固色谱）。 ⑵　分配色谱法：利用组分在固定液中溶解度不同而达到分离的色谱法（如液-液色谱）。 ⑶　离子交换色谱法：利用组分在离子交换剂上的亲和力大小不同而达到分离的色谱法。 ⑷　凝胶色谱法：或称排阻色谱法。以多孔凝胶作为固定相，利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而达到分离的色谱法。 还有离子色谱、离子对色谱和毛细管电泳等等。 3．按固定相的外形分类 ⑴　柱色谱: 固定相装于柱内的色谱法。 ⑵　平板色谱: 又可分为薄层色谱和纸色谱。固定相呈平板状的色谱法。 根据以上所述，将色谱法的分类总结于下表中。 色谱法分类表 二、色谱法的特点 分离效率高； 应用广泛； 分析速度快； 样品用量少； 灵敏度高； 易于自动化。 Ⅱ. 色谱法原理 色谱法实质上是一种物理化学分离分析方法，又称为色层法或层析法。 原理： 利用不同物质在两相（固定相和流动相）中具有不同的分配系数或吸附能力及其亲和作用性能的差异为分离依据，使分配系数只有微小差异的组分产生差速行移，从而得到分离。 一、 气相色谱分离原理 1.气-固色谱分离原理： 固定相是一种多孔性及较大表面积的吸附剂，随着载气的流动，被测物质在吸附剂表面进行反复的物理吸附、脱附过程。 较难吸附的组分就容易被脱附，较快的移向前方; 容易被吸附的组分移动的就慢一些. 经过一段时间后各组分彼此分离，先后流出色谱柱。 1.气-固色谱分离原理 被测物质各组分的分离是基于各组分在固定液中溶解度的不同。溶解度大的组分较难流出色谱柱。 二、液相色谱分离原理 1. 液一液分配色谱法（LLPC） 分离原理基本与液液萃取相同，都是根据物质在两种互不相溶的液体中溶解度的不同，具有不同的分配系数。 不同点是：液液色谱的分配是在柱中进行的，使这种分配平衡可反复多次进行，造成各组分的差速迁移，提高了分离效率，从而能分离各种复杂组分。 2.液－固吸附色谱法(LSAC) 液固色谱实质是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分离的。 当流动相通过固定相（吸附剂）时，吸附剂表面的活性中心就要吸附流动相分子(S)。同时，当试样分子（X）被流动相带入柱内，只要它们在固定相有一定程度的保留就要取代数目相当的已被吸附的流动相溶剂分子(Sab)而被吸附（Xab)，于是，在固定相表面发生竞争吸附: 达平衡时： 三.色谱分离过程示意图 色谱法分离原理示意图 四、色谱流出曲线及其述语 由检测器输出的电信号强度对时间作图，所得曲线称为色谱流出曲线。曲线上突起部分就是色谱峰。理想的色谱峰是对称的。 色谱流出曲线和色谱峰 ㈠、有关流出曲线的术语 1.基线：在实验操作条件下，色谱柱后没有样品组分流出时的流出曲线称为基线，稳定的基线应该是一条水平直线。 2.峰高：色谱