犊牛腹泻的诊断与治疗.doc

犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验 犊牛腹泻是指肠蠕动亢进，肠内吸收不全或吸收困难，致使肠内容物与多量水分被排出体外的一种犊牛疾病。其临床特征是拉稀便、软便或水样便，呕吐，脱水，体重减轻和酸中毒，死亡较快。本病一年四季均可发生，尤其以夏末秋初多发，其中3周龄以内的新生犊牛发病率和死亡率最高，被称为新生犊牛的杀手。所以哺乳期犊牛的饲养管理是奶牛生产中的一个重要阶段，如果此时由于营养缺乏或管理不善，则不仅直接给奶牛场造成巨大的经济损失，而且也影响到犊牛的生长发育和成年后的泌乳性能。可以说，犊牛腹泻是影响犊牛健康生长的最主要的疾病之一。因此，如何预防犊牛腹泻就成了重中之重。它分为营养性（如由牛奶饲喂过量，牛奶突然改变成分，低质代乳品，奶温过低等引起）和传染性(如由细菌、病毒、寄生虫等引起)腹泻两种。但是，这一分类是人为的，生产实践中往往是由于营养性腹泻或饲养管理不当而使犊牛更易患传染性腹泻。大肠杆菌是引起新生犊牛腹泻的主要病原菌。Antibiotics 纸片药物含量/(Lg#片-1) Drug contents 抑菌圈直径/mm Diameter of antimicrobial circle 耐药 Resistance中敏 Midst ensitivity敏感 Sensitivity 氯霉素Chloramphenicol 30[12 13~17\18 链霉素Streptomycin 10[11 12~14\15 红霉素Erythromycin 15[13 14~17\18 四环素Tetracycline 30[14 15~18\19 庆大霉素Gentamicin 10[12 13~14\15 氟哌酸Norfloxacin 10[15 16~20\21 卡那霉素Kanamycin 30[13 14~17\18 丁胺卡那霉素Amikacin 30[14 15~16\17 氨苄青霉素Ampicillin 10[13 14~16\17 多黏菌素B Polymycin B 5[16 17~19\20 2 结果 2.1 分离菌的培养特性及形态特征 分离菌在麦糠凯培养基中形成中等大小、表面 光滑湿润的粉红色菌落;在伊红美兰培养基上形成 带有金属闪光的紫黑色小菌落;在血琼脂平板上形 成B-溶血。营养肉汤呈均匀浑浊,底部有黏性沉淀。 细菌涂片革兰染色为阴性,两端钝圆的短杆菌,大多 单个存在,有的成对存在,不形成芽孢和荚膜。结果 表明,从犊牛的腹泻粪便中分离得到的细菌的培养 特性和形态特征,基本符合大肠埃希菌生化特性,可 初步判定其为大肠埃希菌。 2.2 分离菌的生化特性 分离菌生化特性试验结果见表2。 表2 分离菌株的生化特性 Table 2 Biochemical characteristics of the isolates 项目 Item 结果 Results 项目 Item 结果 Results 三糖铁Triple sugar iron agarY苯丙氨酸Phenylalanine - 葡萄糖GlucoseY磷酸盐葡萄糖胨水Phosphate glucose peptone waterY 乳糖LactoseY硫化氢H2S - 麦芽糖MaltoseY靛基质Indole + 蔗糖Sucrose -硝酸盐还原Nitrate reduction + 甘露醇MannitolY枸橼酸盐Citrate - 尿素Carbamide -甲基红MR + 赖氨酸LysineYV-P - 注:/Y0表示产酸产气;/+0表示产酸或阳性反应;/)0阴性反应。 Note:/Y0means acidic and aeroginous reaction;/+0means acidic or positive reaction;/-0means negative reaction. 从分离菌的生化特性、结合培养特性和形态特 征,判断分离菌为大肠埃希菌。 2.3 血清型鉴定结果 将分离的大肠埃希菌与标准血清进行凝集反 应,分离菌只与O9因子的血清出现凝集反应,表明 该株大肠埃希菌的血清型为O9,为犊牛腹泻型大肠 埃希菌。 2.4 分离菌的致病性检测结果 试验小鼠接种后8 h左右出现腹泻症状,发病 率为100%。发病后小鼠精神沉郁,倦怠,饮食量减 少甚至不饮食,有的被毛逆立,腹式呼吸,80%的小 鼠肛门周围及尾部粘有黄色稀便。28 h出现死亡, 至试验末共死亡6只,死亡率为60%。无菌采集死 亡小鼠心脏和肝脏,涂片、染色、镜检,镜下可见革兰 染色阴性的杆菌。接种腹水的营养琼脂培养基上, 生长的菌落形态基本符合大肠埃希菌的形态特征。 空白对照组正常。说明从腹泻犊牛的粪便中分离的 大肠埃希菌为致病性大肠埃希菌。 2.5 分离菌的肠毒素检测结果 用乳鼠胃内注射法测定肠毒素,其