甘舒研究资料甘舒对小鼠急性酒精中毒的防治作用.doc

甘舒对小鼠急性酒精中毒的防治作用的研究 中山大学医学院生理学教研室：冯鉴强教授等 中山大学医学院实验生理教研室：潘实清教授 林明栋教授 周家国老师 刘玉洁老师 中山大学公共卫生学院实验室：谭炳炎老师 郑琳老师 摘要: 目的:探讨药甘舒对急性酒精中毒的防治作用。方法:用56°白酒灌胃，建立小鼠急性酒精中毒动物模型，以翻正反射消失为标准。用气相色谱仪测定中毒90分钟后血中乙醇浓度。结果:甘舒可明显减少醉酒动物数目，延长酒精中毒出现的时间，而且可以降低急性酒精中毒后血中乙醇的浓度。结论: 甘舒具有防醉、解酒作用，且预防作用比解酒作用明显。 关键词：甘舒; 防醉作用; 解酒作用; 翻正反射；血乙醇浓度 人体内存在解酒的机制，肝内有特异性的转化酶，能把乙醇降解为无毒的乙酸并能转化为乙酰辅酶A进入三羧酸循环[2]。所以肝在解酒中有重要的作用，但是肝脏很容易被酒精损害，如果能保护肝脏的功能和提高它解酒的活性，将会对防治急性酒精中毒有很好的作用。 由纯中药10只 A、对照组：常规培养，不给予任何药物，酒精中毒后用0.1ml生理盐水灌胃 B、甘舒救治组：酒精中毒后用2mg/ml甘舒溶液灌胃，0.1ml/只。 C、甘舒保护：实验前一周每天用1mg/ml的甘舒溶液灌胃，酒精中毒后用生理盐水灌胃，0.1ml/只。 D、甘舒保护+甘舒救治组：实验前一周每天用1mg/ml的甘舒溶液灌胃，0.1ml/只，酒精中毒后用2mg/ml的甘舒灌胃，0.1ml/只。 1.4.2 中毒酒量的探索 小鼠 35只常规喂养3天，禁食12小时，称重，开始实验。探索乙醇的中毒剂量：15只分3组，分别用560ml/L乙醇0.22ml/20g、0.25ml/20g、0.3ml/20g灌胃，探索翻正反射消失的乙醇的量，并记录作为实验参考。 1.4.3 甘舒的保护浓度探索[5] 20只分4组，每组5只，前3组分别用2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml浓度的甘舒（0.1ml/只）灌胃一周，选择合适的浓度进行实验，第4组用0.1ml/只生理盐水灌胃作对照。 1.4.4 标准曲线的制定 取5只正常小鼠，眼眶动脉放血（肝素抗凝），以上述血液稀释准确配制成含乙醇0、2.5、5、20、40μl/ml的标准液。密封瓶口，70℃加热15分钟，抽取1ml瓶内气体，注入气相色谱仪检测。根据峰面积数据计算回归曲线。 1.4.5 血中乙醇含量的测定 在给乙醇90min后，眼眶动脉放血，取血0.2ml，加0.1ml肝素抗凝。在气相色谱仪上测定血液中乙醇浓度。 1.5 统计学分析 SPSS 10.0统计软件进行统计分析，计量资料的数据用.x±s表示，组间比较用one-way ANOVA。 P0.05为有统计学意义。 2 结果 2.1 模型的建立(酒精中毒浓度的选择) 分别用0.22ml/20g、0.25ml/20g、0.3ml/20g红星二窝头（56度）灌胃，翻正反射消失率均为100%，而0.22ml/20g、0.25ml/20g平均用时分别为44分、4.33分钟。0.3ml/20g致死率为100%。所以选用0.25ml/20g的浓度为酒精中毒用量。 2.2 甘舒保护作用灌胃浓度的选择 用浓度分别为0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml的甘舒溶液，每只0.1ml/天进行灌胃，一周。禁食12小时后，按0.25ml/20g的酒量进行灌胃。结果如下表所示： 甘舒预处理浓度探索 0.5mg/ml 1mg/ml 2mg/ml 生理盐水 翻正反射消失率 75% 33.3% 33.3% 100% 死亡率 0 0 0 0 甘舒预处理浓度选定1mg/ml、每只0.1ml/天，因为1mg/ml组的酒精中毒率为33.3%，而0.5mg/ml的为75%，2mg/ml的为33.3%，可见1mg/ml与0.5mg/ml的有明显差异性，1mg/ml与2mg/ml没有差异性。（p0.05）l/ml的梯度，并进行检测。根据峰面积计算出血中乙醇浓度的标准曲线。曲线方程Y=.6.8795×10-5X+0 2.6 甘舒对血中乙醇代谢的影响（气相色谱法）[7] A B C D 平均峰面积 106328±13212.24 87476.8±5902.21 56998.2±14328.85 40673.6±6501.97 换算后浓度 （μl/ml） 0.74±0.12 0.62±0.07 0.41±0.13 0.33±0.07 酒灌胃90分钟后，眼眶取血，用气相色谱测定。结果如下表所示： A B C D 四组的气相色谱分析原