71400222069药物分析在线必做作业【参考】.docxVIP

生物技术制药复习题第一章 绪论第一节 生物技术的发展史1、生物技术：以生命科学为基础，利用生物体的特性和功能，设计构建具有与其性状的新物种或新品系，并与工程结合，利用这样的新物种进行加工生产，为社会提供商品服务的一个综合性技术体系。它的范畴：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、生化工程。基因工程是生物技术的核心。P12、蛋白质工程第二代基因工程；海洋生物技术第三代生物技术P13、生物技术发展史：传统、近代（抗生素、发酵罐）、现代（DNA重组）P31974年，Boyer和Cohen建立了DNA重组技术1975年，Koher 和 Milstein 建立了单克隆抗体技术1982年，第一个基因工程药物重组人胰岛素被批准上市1989年，我国第一个基因工程药物干扰素批准上市2003年，中国的重组腺病毒-p53注射液成为石阶上第一个正式批准的基因治疗药物。第二节 生物技术药物1、生物技术制药：生物技术制药：采用现代生物技术人为地创造一些条件，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医药品。P42、生物技术药物：采用DNA重组技术活其他生物技术研制的蛋白质或核酸类药物。它与天然生化药物、微生物药物、海洋药物和生物制品共同归为生物药物。3、现代生物药物分为4类：重组DNA技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂；基因药物；天然药物；合成与部分合成药物。4、生物药物按用途分为：治疗药物；预防药物；诊断药物。5、生物技术药物的特征：（1）分子结构复杂；（2）具有种属特异性；（3）治疗针对性强、疗效高；（4）稳定性差（5）基因稳定性；（6）免疫原性；（7）体内半衰期短；（8）受体效应；（9）多效性和网络性效应；（10）检验的特殊性。第三节 生物技术制药1、生物技术制药的特征：高技术、高投入、长周期、高风险、高收益。P52、生物技术在制药中的应用有哪些？P7（1）基因工程制药：① 开发基因工程药物，如干扰素（IFN）、红细胞生成素（EPO）等 ②基因工程疫苗，如乙肝基因工程疫苗 ③基因工程抗体，它可以作为导向药物的载体 ④基因诊断与基因治疗⑤应用基因工程技术建立新药的筛选模型 ⑥应用极影工程激活素改良菌种，产生新的微生物药物 ⑦改进药物生产工艺 ⑧利用转基因动、植物生产蛋白质类药物。（2）细胞工程制药①单克隆抗体技术 ②动物细胞培养 ③植物细胞培养生产次级代谢产物。（3）酶工程制药 ：酶与细胞的固定化及酶转化制药（4）发酵工程制药：发酵工艺改进、新药研制、菌种改造。第二章 基因工程制药第一节 概述（略）第二节 基因工程药物的生产过程P151、基因工程技术：将重组对象的目的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞，构建成工程菌(或细胞），实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。2、基因工程药物制造的主要程序 （过程）（重点和后面几节联系起来）（1）目的基因的克隆（分离目的基因）：通过逆转录、反转录-聚合酶链式反应、化学合成方法来制备cDNA，再通过核酸探针杂交或免疫反应来筛选目的基因（2）目的基因与载体连接构建DNA重组体：通过限制性内切酶DNA连接酶等核酸酶，把目的基因组入载体的相关克隆位点，常用的载体有质粒载体和噬菌体载体（3）将DNA重组体转入宿主菌构建工程菌：常用的宿主菌有大肠杆菌、酵母菌等，先使宿主菌处于感受态，再通过转化、转导等方式把重组DNA导入宿主菌，以构建工程菌（4）工程菌发酵：提供适当的培养基、反应器、控制好发酵过程中的各种参数，如温度、PH、溶氧等，并通过升温来诱导产物表达（5）目的基因表达产物的分离纯化：通过固液分离、初步纯化、高度纯化、成品加工来制备产品；若是胞内产物需要细胞破碎，若是包涵体则需要变性和复性（6）产品的检验：检测产品的质量和性能 。第三节 目的基因的获得1、利用基因工程生产蛋白质或多肽需要得到其基因，制备目的基因常用的方法有哪些？P16 （1）逆转录法 以mRNA为模板，经逆转录的到cDNA，构建cDNA文库，从cDNA文库中筛选目的基因。由于RNA转录加工过程中，内含子序列已被剪切掉，因此，cDNA文库中无内含子，适于在原核系统中表达。但是，cDNA只包含蛋白质的结构基因部分，缺少有关的调控序列，因此在原核系统中表达，还需要根据表达载体的结构，配以相应的调控序列。 （2）利用反转录-聚合酶链式反应制备基因 （3）化学合成法：只适用于克隆小分子肽的基因 2、利用逆转录法获得目的基因的基本过程P16 （1）mRNA的纯化 ：从表达目的基因的细胞中提取总RNA，用寡聚脱氧胸苷（dT）纤维素柱从总RNA中提取纯化mRNA。 （2）cDNA的合成 ：以mRNA为模板，利用逆转录酶合成cDNA第一链，再用DNA聚合酶合成cDNA的双链。（3）cDNA克隆：利用合适的连接方法，将产生的双链cDNA片段插