第六章 生长繁殖及控制2内容多.ppt

第四节 微生物培养法概论 一、实验室培养法 二、生产实践中培养微生物的装置 第四节 微生物培养法概论 一、实验室培养法 第四节 微生物培养法概论 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 实验室研究厌氧菌的三大重要技术: 一、实验室培养法 第四节 微生物培养法概论 二、生产实践中培养微生物的装置 二、生产实践中培养微生物的装置 利用温度进行杀菌的定量指标？ （一） 高温灭菌的种类 热死时间 热死温度 某一温度下，杀死某微生物的 水悬浮液群体所需的最短时间 一定时间内，杀死某微生物的 水悬浮液群体所需的最低温度 二、物理灭菌因素的代表——高温 （二） 影响加压蒸气灭菌效果的因素 灭菌物体含菌量 灭菌锅内空气排除程度 灭菌对象的体积 灭菌对象的pH 加热与散热速度 二、物理灭菌因素的代表——高温 （三） 高温对培养基成分的有害影响及其防治 形成沉淀 破坏营养，提高色泽 改变培养基的pH 降低培养基浓度 采用特殊加热灭菌法 过滤除菌法等 过滤除 空气和不耐热的液体培养基的灭菌 棉花、玻璃纤维或石棉 滤膜 * * 第三节 影响微生物生长的主要因素 三、PH 值 一、温 度 二、氧气 (一) 温 度 生长温度三基点 最适生长温度 最高生长温度 最低生长温度 (一) 温 度 生长温度三基点 最适生长温度： 某菌代时最短或生长速率最高时的培养温度。 最适生长温度并非一切生理过程的最适温度 (二) 氧气 根据微生物与氧的关系可将微生物分为 好氧菌 微好氧菌 耐氧菌 兼性厌氧菌 厌氧菌 好氧微生物可以通过呼吸产生能量，满足机体的需要，但氧会使一切生物产生有毒害作用的代谢产物，如超氧阴离子自由基与H2O2 超氧阴离子自由基的特点？ 带负电，兼有分子、离子性质 性质及不稳定，化学反应能力极强 可破坏细胞内各种大分子和膜结构 形成其他活性化合物 超氧阴离子自由基的特点？ 超氧化物岐化酶 过氧化氢酶 过氧化物酶 为什么只有厌氧菌害怕氧气呢？ (三) PH 微生物生长过程中机体内发生的绝大多数的反应是酶促反应，而酶促反应都有一个最适pH范围，在此范围内只要条件适合，酶促反应速率最高，微生物生长速率最大 因此微生物生长也有一个最适生长的pH范围。 (三) PH 如何在发酵过程中及时调节pH？ 治标 治本 固体培养法 液体培养法 高层琼脂柱 厌氧培养皿 亨盖特滚管技术 厌氧罐 厌氧手套箱 固体培养法 斜面、平板、 克氏扁瓶、茄子瓶 厌氧菌培养 厌氧菌的固体培养——亨盖特滚管技术 原理：利用除氧铜柱制备高纯度氮， 制造高度无氧小环境 操作： 优点：试管内壁有较大的表面积 试管口面积、试管腔体积极小 有利于阻止氧与厌氧菌的接触 厌氧菌的固体培养——厌氧罐技术 原理：钯催化剂、混合气体 氧化还原指示剂 操作： 特点：厌氧菌培养过程处于无氧状态 培养基配制、接种、观察 分离、保藏等过程无法保证 厌氧手套箱技术 厌氧罐技术 亨盖特滚管技术 浅层液体静止培养 摇瓶振荡培养 通入加压空气 机械搅拌等 ——液体培养法 好氧菌的液体培养 如何提高氧的供应？ 试管液体培养 三角瓶浅层液体培养 摇瓶振荡培养 台式发酵罐 （一）固态培养法 好氧菌的曲法培养 曲的构成： 曲的类型： 通风曲 2. 厌氧菌的堆积培养法 白酒生产 （二）液体培养法 ——好氧菌的培养 （1）浅盘培养 （2）深层液体通气培养 发酵罐 防腐(Antisepsis) 化疗(Chemotherapy) 消毒(Disinfection) 灭菌(Sterilization) 第五节 有害微生物的控制 低温 缺氧 干燥 高渗 高酸度 高醇度 加防腐剂 二、物理灭菌因素的代表——高温 杀灭或抑制 微生物的物理因素 高温 辐射作用 过滤 渗透压 干燥 超声波 二、物理灭菌因素的代表——高温 （一） 高温灭菌的种类 （二） 影响加压蒸气灭菌效果的因素 （三） 高温对培养基成分的 有害影响及其防止 第五节 有害微生物的控制 1、干热灭菌法 火焰灼烧 烘箱内热空气灭菌 干热灭菌 温度：150-170℃ 时间：1-2h 对象：金属器械、玻璃器皿等 2、湿热灭菌 相同温度和作用时间下， 湿热比干热灭菌更好？ 更易于传递热量； 更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构 湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件： 多数细菌和真菌的营养细胞： 在60℃左右处理5-10分钟； 酵母菌和真菌的孢子：用80℃以上温度处理； 细菌的芽孢：121℃处理15分