25章病毒感染的检查方法与防治原则.ppt

病毒的检测 标本的采集与送检 1.标本中常加入抗生素。 2.低温保存，尽快送检。 3.血清学标本：两份 二、病毒的分离与鉴定 标 本 （一）病毒的分离培养 1.动物接种 应用：尚无敏感细胞的病毒培养 动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等 优点：结果易观察，可建立动物模型 缺点：有饲养条件要求，费用高，动物 体内常带有潜伏病毒 2.鸡胚培养 采用孵化9-14天的鸡胚 绒毛尿囊膜（allantocherion） 痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔（allantoic cavity） 接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔（amniotic cavity） 流感病毒的初次分离 卵黄囊（yolk sac） 嗜神经病毒 病毒的细胞培养 病毒增殖的指征 1. 细胞病变效应(cytopathic effect, CPE) ①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等（多数病毒）； ②形成多核巨细胞或称融合细胞（麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）； ③在培养细胞中形成包涵体（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。 3. 干扰现象（interference） 4. 细胞代谢改变 细胞代谢变慢 pH变化减慢 （二）病毒的鉴定 病毒形态学鉴定 病毒血清学鉴定 病毒分子生物学鉴定 （三）病毒数量与感染性测定 三、病毒感染的血清学诊断 1.中和试验（neutralizing test） 病毒＋中和抗体 病毒失去感染性 特点：特异性高，抗体维持时间长 应用：人群免疫情况的调查 临床诊断少用 2. 血凝抑制试验（hemagglutination inhibition test）—正粘病毒型与亚型鉴定 病毒＋鸡红细胞＝凝集（血凝试验） 病毒＋特异性抗体＋鸡红细胞＝不凝集 （血凝抑制试验） 3.补体结合试验 （complement fixation test） 用已知病毒可溶性补体抗原检测病 人血清中相应的补体抗体 特点：特异性低，抗体出现早，消失快 应用：近期感染指标。 四、病毒感染的快速诊断 数小时内出结果 病毒颗粒 病毒成分（抗原或核酸） 早期抗体检测（IgM） （一）形态学检查 电镜和免疫电镜检查 普通光学显微镜检查 包涵体 （二）病毒成分检测 （三）早期抗体检测 可诊断急性感染 特异性IgM抗体： 孕妇感染风疹病毒 EBV早期抗原抗体 第二节 病毒感染的特异性预防 人工主动免疫(artificial active immunization): 将疫苗(vaccine)或类毒素(toxoid)接种于人体，使机体主动产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施。 疫 苗 *载体疫苗 利用非致病微生物做载体，将病毒的保护性抗原基因片段重组到载体微生物基因组中，用表达保护性抗原的微生物作为疫苗。 载体疫苗是活疫苗，具有和减毒活疫苗相似的特点。 *亚单位疫苗 用化学方法裂解和提取而制成的病毒保护性抗原组份。 其特点与灭活疫苗类似。 基因工程亚单位疫苗 *用基因工程表达的病毒蛋白抗原制成的疫苗。 *表达外源基因的系统----细菌、酵母、哺乳动物细胞、昆虫细胞等。 *基因工程亚单位疫苗的安全性好，但免疫原性较差，需使用佐剂以提高其免疫原性。 *核酸疫苗 @ 将编码病毒某种抗原蛋白的外源基因， 即抗原的cDNA或mRNA与载体（如质 粒DNA）重组直接注入体内，使体细 胞编码病毒抗原，并通过细胞MHC分